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湖北ELISA試劑盒使用方法

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2022-08-02

ELISA檢測(cè)試劑盒的保質(zhì)期一般都是在一年,如果保存得當(dāng)?shù)脑?,不?huì)出現(xiàn)問(wèn)題的。但不要反復(fù)凍融。當(dāng)然如果是正常的ELISA試劑盒,應(yīng)該放在4℃左右冰箱保存。但要注意的是,如果將試劑盒剛從冰箱里面拿出來(lái)就立即使用的話,可能會(huì)影響,其直接的后果是對(duì)一些弱陽(yáng)性標(biāo)本的檢測(cè)出現(xiàn)假陰性。建議:先從冰箱中拿出來(lái),在室溫下放置20分鐘以上后,再進(jìn)行測(cè)定,以使試劑盒在ELISA檢測(cè)試劑盒使用前與室溫平衡。這樣做的目的,主要是為了在后面的溫育反應(yīng)步驟中,能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度能較快地達(dá)到所要求的高度,以滿足測(cè)定要求。ELISA試劑盒保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。湖北ELISA試劑盒使用方法

ELISA試劑盒切記在加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。合理安排檢測(cè)量,以免反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。在吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的噴頭去吸,減少誤差。務(wù)必做雙孔實(shí)驗(yàn),這樣才既能保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性,又能反映出試劑盒的精密度。樣品稀釋液應(yīng)用加液器加注,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性。為防止樣品蒸發(fā),試驗(yàn)時(shí)將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),酶標(biāo)板加上蓋或覆膜。未使用完的酶標(biāo)板或者試劑,請(qǐng)于2-8℃保存。辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記抗人IgG工作液請(qǐng)依據(jù)所需的量配置使用。請(qǐng)勿重復(fù)使用已稀釋過(guò)的辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記抗人IgG工作液。安徽ELISA試劑盒哪家便宜ELISA試劑盒用量少時(shí),可使用分裝,前期是它的長(zhǎng)久性不是很好。

ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí),受檢標(biāo)本(測(cè)定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開(kāi)。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過(guò)反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果,使測(cè)定方法達(dá)到很高的敏感度。 ELISA可用于測(cè)定抗原,也可用于測(cè)定抗體。

Elisa生物檢測(cè)是一種敏感度高,同時(shí)特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)檢測(cè)方法,由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡(jiǎn)便,結(jié)果判斷較客觀等因素,已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗(yàn)的各領(lǐng)域中。Elisa試劑盒評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn):標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值,應(yīng)大于等于0.9900。靈敏度:反應(yīng)試劑盒的較低檢測(cè)濃度,特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù),回收率:判斷實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和特異性,目前市面上的Elisa試劑盒檢測(cè)原理主要有以下四種:直接法,間接法,夾心法,競(jìng)爭(zhēng)法。ELISA試劑盒可用于測(cè)定抗原,也可用于測(cè)定抗體。

ELISA檢測(cè)試劑盒應(yīng)用定性?shī)A心免疫檢測(cè)技術(shù),用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板條,這些多肽是中國(guó)型HEV毒株關(guān)鍵氨基酸序列中抗原性很強(qiáng)的肽段,分別來(lái)自于該毒株的開(kāi)放閱讀框2和開(kāi)放閱讀框3。將樣品或標(biāo)準(zhǔn)品加入孔中并孵育,如果其中存在HEV IgM抗體,這些抗體就會(huì)與HEV 的多肽抗原結(jié)合,并固定在上面,洗板除去其它非特異性抗體和樣品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP(辣根過(guò)氧化物酶)酶結(jié)合物,經(jīng)第二次孵育后,酶結(jié)合物就會(huì)與一次孵育結(jié)合上的HEV IgM抗體相結(jié)合,洗板除去未結(jié)合的酶結(jié)合物,加入TMB底物溶液,在第三次孵育時(shí)會(huì)發(fā)生酶-底物反應(yīng),只有那些含有HEV IgM抗體和酶結(jié)合物所形成的復(fù)合物的孔才會(huì)發(fā)生顏色變化,加入硫酸溶液終止酶和底物間的反應(yīng),并在波長(zhǎng): 450nm處測(cè)量O.D.值,按照本HEV IgM抗體elisa試劑盒的測(cè)試標(biāo)準(zhǔn), O.D.值大于或等于Cut-Off值的樣品被認(rèn)為是初試陽(yáng)性。ELISA檢測(cè)操作步驟復(fù)雜,可能會(huì)影響測(cè)定結(jié)果的因素較多。安徽ELISA試劑盒哪家便宜

ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中,加樣后及時(shí)放人孵箱,標(biāo)本較多時(shí),要分批操作。湖北ELISA試劑盒使用方法

ELISA試劑盒測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序丈量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加停止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。ELISA試劑盒運(yùn)用注意事項(xiàng):試劑蛻變的痕跡發(fā)色試劑有任何顏色標(biāo)明發(fā)色劑蛻變,應(yīng)當(dāng)棄之。0規(guī)范的吸光度(450/630nm)值小于0.5(A450nm<0.5)時(shí),表明試劑或許蛻變。室溫低于20℃或試劑及樣本沒(méi)有回到室溫(20~25℃)會(huì)導(dǎo)致一切規(guī)范的OD值偏低。在洗板過(guò)程中如果出現(xiàn)板孔枯燥的情況,ELISA試劑盒則會(huì)出現(xiàn)規(guī)范曲線不成線性,重復(fù)性不好的現(xiàn)象。所以洗板拍干后應(yīng)立即進(jìn)行下一步操作。湖北ELISA試劑盒使用方法

深圳市寶安康生物技術(shù)有限公司專注技術(shù)創(chuàng)新和產(chǎn)品研發(fā),發(fā)展規(guī)模團(tuán)隊(duì)不斷壯大。公司目前擁有較多的高技術(shù)人才,以不斷增強(qiáng)企業(yè)重點(diǎn)競(jìng)爭(zhēng)力,加快企業(yè)技術(shù)創(chuàng)新,實(shí)現(xiàn)穩(wěn)健生產(chǎn)經(jīng)營(yíng)。公司業(yè)務(wù)范圍主要包括:食品安全檢測(cè)試劑,膠體金檢測(cè)卡,ELISA試劑盒,獸藥殘留檢測(cè)等。公司奉行顧客至上、質(zhì)量為本的經(jīng)營(yíng)宗旨,深受客戶好評(píng)。公司憑著雄厚的技術(shù)力量、飽滿的工作態(tài)度、扎實(shí)的工作作風(fēng)、良好的職業(yè)道德,樹(shù)立了良好的食品安全檢測(cè)試劑,膠體金檢測(cè)卡,ELISA試劑盒,獸藥殘留檢測(cè)形象,贏得了社會(huì)各界的信任和認(rèn)可。