ELISA試劑盒以靈敏度較高、特異性較好的特點在上得到了普遍的應用，但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大，如不注意，有可能導致顯色不全、花板等結(jié)果。我將操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給同行帶來一些啟發(fā)，提高試驗質(zhì)量。下面分析ELISA試驗操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應的解決辦法。選擇試劑，選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴格按照試劑說明書進行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。加樣，可能原因：血清或血漿標本分離不好即進行加樣；ELISA屬固相，抗原、抗體的結(jié)合只在固相表面上發(fā)生。ELISA試劑盒供應公司

ELISA試劑盒如果采用AT或其他全自動加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 標本較多時，請分批操作?？赡茉颍悍跤龝r未貼封片或加蓋，使標本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗徹底； 孵育時間人為延長，導致非特異性結(jié)合緊附于反應孔周圍，難以清洗徹底。解決辦法： 貼封片或加蓋；按說明步驟嚴格控制操作時間。洗板ELISA試劑盒可能原因：采用手工洗板，孔與孔之間液體交叉。采用半自動洗板機洗板時，洗液量不足，導致洗板不徹底；洗板針堵塞，抽吸不完全；洗板不暢，導致洗板效果差。ELISA試劑盒供應公司ELSIA 就是靠洗滌來達到分離游離的和結(jié)合的酶標記物的目的。

ELISA試劑盒要求陽性參閱血清和陰性參閱血清的O.D值有明顯差別。運用ELISA檢測試劑盒進行實驗時，應別離以陽性對照與陰性對照操控實驗條件，待檢樣品應作一式二份，以保證實驗效果的準確性。ELISA試劑盒有時本底較高，說明有非特異性反應。在ELISA中，進行各項實驗條件的選擇是很重要的，其間包含：固相載體的選擇：許多物質(zhì)可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可所以凹孔平板、試管、珠粒等。現(xiàn)在常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。

ELISA試劑盒操作要點一共有七大點，它們分別是：標本的采取和保存、試劑的準備、加樣、保溫、洗滌、顯色和比色、酶標比色儀、結(jié)果判斷。作ELISA試劑盒測定的標本十分廣闊，體液（如血清）、分泌物（唾液）和排泄物（如尿液、糞便）等均可作標本以測定其中某種抗體或抗原成份。有些標本可直接進行測定（如血清、尿液），有些則需經(jīng)預處理（如糞便和某些分泌物）。大部分ELISA試劑盒檢測均以血清為標本。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外，其他成份均同等于血清。制備血漿標本需借助于抗凝劑，而血清標本只要待血清自然凝固、血塊收縮后即可取得。除特殊情況外，在醫(yī)學檢驗中均以血清作為檢測標本。在ELISA試劑盒中血漿和血清可同等應用。血清標本可按常規(guī)方法采集，應注意避免溶血，紅細胞溶解時會釋放出具有過氧化物酶活性的物質(zhì)，以HRP為標記的ELISA試劑盒測定中，溶血標本可能會增加非特異性顯色。ELISA試劑盒加強各個環(huán)節(jié)的質(zhì)量保證才能充分發(fā)揮其方法學的優(yōu)點。

ELISA試劑盒試驗是一種敏感性高，特異性強，重復性好的實驗診斷方法。ELISA試劑盒自從60-70年代問世以來，得到全世界科研工作者的認可及推崇，在歐美及中國獲得很大的推廣，尤其是國內(nèi)生化領(lǐng)域的長足發(fā)展。ELISA生物試驗是一種敏感性高，特異性強，重復性好的實驗診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡便，結(jié)果判斷較客觀等因素，已主要應用在免疫學檢驗的各領(lǐng)域中。酶標抗體，它是ELISA中關(guān)鍵試劑之一，既要求有酶催化活性，又能保持了抗體的免疫活性。ELISA檢測試劑盒酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性，又保留酶的活性。海南ELISA試劑盒哪家靠譜

ELISA試劑盒中用的蒸餾 水或去離子水，包括用于洗滌的，應為新鮮的和高質(zhì)量的。ELISA試劑盒供應公司

ELISA試劑盒的反應板過多造成洗板等待時間長。解決辦法：保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水特殊材料）上輕輕拍干； 合理安排，或多用幾臺洗板機。顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑； 2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時保持顯色劑不外流； 3) A、B液應避免接觸金屬器械?？赡茉蛉缂咏K止液時產(chǎn)生較多氣泡，導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產(chǎn)生氣泡。ELISA試劑盒供應公司

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