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廣州ELISA試劑盒保質(zhì)期

來源: 發(fā)布時間:2023-03-27

ELISA試劑盒切記在加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。合理安排檢測量,以免反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。在吸取液體時,要用量程和需要量接近的噴頭去吸,減少誤差。務(wù)必做雙孔實驗,這樣才既能保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性,又能反映出試劑盒的精密度。樣品稀釋液應(yīng)用加液器加注,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性。為防止樣品蒸發(fā),試驗時將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),酶標(biāo)板加上蓋或覆膜。未使用完的酶標(biāo)板或者試劑,請于2-8℃保存。辣根過氧化物酶標(biāo)記抗人IgG工作液請依據(jù)所需的量配置使用。請勿重復(fù)使用已稀釋過的辣根過氧化物酶標(biāo)記抗人IgG工作液。ELISA試劑盒如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。廣州ELISA試劑盒保質(zhì)期

酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價的滴定(見酶標(biāo)記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng),而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致疾病作用,應(yīng)注意防護(hù)。有條件者應(yīng)使用不致疾病、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后,應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng)。廣州ELISA試劑盒保質(zhì)期elisa試劑盒采用多種可靠的分析方法、由具有豐富經(jīng)驗的分析人員經(jīng)過反復(fù)多次測定得出的結(jié)果平均值。

ELISA試劑盒手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。解決辦法:標(biāo)本為血清:盡可能將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,**后必須立即顛倒**管混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 2) 加樣后及時放入孵箱。 3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。

ELISA試劑盒技術(shù)原理:1.抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。2.結(jié)合在固相載體表面a的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性。3.酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。4.受檢標(biāo)本與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。5.此時固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。6.加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。ELISA是蛋白定量檢測的金標(biāo)準(zhǔn),同時對實驗操作的要求也極其嚴(yán)格。

Elisa試劑盒固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。測定方法具有很高的敏感度(pg-ng/ml水平),并且重復(fù)性好。以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對底物的高效催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗技術(shù)。Elisa試劑盒使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。廣州ELISA試劑盒保質(zhì)期

ELISA檢測試劑盒只有貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸。廣州ELISA試劑盒保質(zhì)期

ELISA測定模式包括以下幾種:雙抗體夾心法、間接法、雙抗原夾心法、IgM抗體捕捉法、競爭抑制法,其中競爭抑制法(HBeAb,HBcAb等采用)因受操作時差所引起的不公平競爭等因素的影響,結(jié)果重復(fù)性較差,質(zhì)量較難控制。不同批次的ELISA試劑在制作過程中很難保證質(zhì)量完全致,即使是通過批批檢的項目其檢測結(jié)果也存在差異,因此必須選擇和訂購長批號的試劑,并保證保存條件。嚴(yán)格執(zhí)行這標(biāo)準(zhǔn)可以避免因試劑批號改變而重新建立質(zhì)控體系及重新評估試劑的復(fù)雜過程,并且能夠保證結(jié)果的穩(wěn)定性;對于效期短、使用率低的試劑,應(yīng)當(dāng)小量分裝,每次使用則取分裝部分即可,避免反復(fù)凍融造成試劑的失效。廣州ELISA試劑盒保質(zhì)期

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