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來源: 發(fā)布時間:2023-03-29

先將抗原結(jié)合到ELISA板上,隨后分兩步進(jìn)行檢測:首先加入檢測抗體與抗原特異性結(jié)合,隨后加入酶標(biāo)二抗檢測并利用底物顯色。與直接ELISA相比,間接ELISA用到酶標(biāo)二抗,具有更高的靈敏度,也需要更少的標(biāo)記抗體,更經(jīng)濟(jì)。間接ELISA還提供了更大的靈活性,因?yàn)椴煌囊豢鼓軌蚺c單一標(biāo)記的二抗一同使用。間接ELISA實(shí)驗(yàn)的缺點(diǎn)是存在交叉反應(yīng)的可能性(酶標(biāo)二抗直接與抗原結(jié)合),可能會增加背景,同時與直接ELISA相比,間接ELISA實(shí)驗(yàn)多了二抗孵育的步驟,實(shí)驗(yàn)周期延長。ELISA試劑盒可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。ELISA試劑盒公司

elisa試劑盒采用多種可靠的分析方法、由具有豐富經(jīng)驗(yàn)的分析人員經(jīng)過反復(fù)多次測定得出的結(jié)果平均值,是一個比較準(zhǔn)確的結(jié)果。實(shí)際工作中一般用標(biāo)準(zhǔn)值代替真值。例如原子量、物理化學(xué)常數(shù):阿佛伽得羅常數(shù)為6.02×10等。與我們實(shí)驗(yàn)相關(guān)的是將純物質(zhì)中元素的理論含量作為真實(shí)值。準(zhǔn)確度是測定值與真實(shí)值接近的程度。為了獲得可靠的結(jié)果,在實(shí)際工作中人們總是在相同條件下,多測定幾次,然后求平均值,作為測定值。一般把這幾次在相同條件下的測定叫平行測定。如果這幾個數(shù)據(jù)相互比較接近,就說明分析的精密度高。梅州ELISA試劑盒哪家便宜ELSIA試劑盒就是靠洗滌來達(dá)到分離游離的和結(jié)合的酶標(biāo)記物的目的。

Elisa試劑盒技術(shù)原理:(1). 抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。(2). 結(jié)合在固相載體表面a的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性。(3). 酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。(4). 受檢標(biāo)本與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。(5). 此時固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。(6). 加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。

ELISA試劑盒測定方法具有很高的敏感度(pg-ng/ml水平),并且重復(fù)性好。以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對底物的高效催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)。在 ELISA試劑盒 中一般有兩次抗原抗體反響,即加標(biāo)本和加酶結(jié)合物后??乖贵w反響的完結(jié)需求有一定的溫度和時刻,這一保溫進(jìn)程稱為溫育,有人稱之為孵育,在ELISA試劑盒中似不恰當(dāng)。ELISA屬固相免疫測定,抗原、抗體的結(jié)合只在固相表面上發(fā)生。以抗體包被的夾心法為例,加入板孔中的標(biāo)本,其間的抗原并不是都有平等的和固相抗結(jié)合的時機(jī)。ELISA試劑盒的使用要嚴(yán)格按照說明書要求進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化操作。

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Elisa生物檢測是一種敏感度高,同時特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)檢測方法。ELISA試劑盒公司

在ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)血清為何要稀釋?有兩個原因:(1)比賽按捺對比明顯,應(yīng)稀釋比賽物;(2)以下降非特異性反應(yīng),使特異性的抗原抗體反應(yīng)充分體現(xiàn)出來。血清稀釋用一般的PBS即可,可加1%的BSA,能有用下降ELISA本底,當(dāng)然假如你嫌費(fèi)事我覺得用生理鹽水代替PBS也不大。不管你是用直接比賽仍是直接比賽,血清的稀釋倍數(shù)必定要事前確認(rèn),但也不必一點(diǎn)點(diǎn),你做一個預(yù)實(shí)驗(yàn)即可,挑選OD在1.0左右的稀釋倍數(shù),即你的ELISA中陰性孔OD在1.0,這么作出來的曲線對比靈敏。ELISA試劑盒公司

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