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江蘇嘉安健達(dá)二代測(cè)序應(yīng)用

來源: 發(fā)布時(shí)間:2024-12-23

二代測(cè)序—全外顯子測(cè)序的局限性

不能檢測(cè)所有的遺傳變異:它只能檢測(cè)外顯子區(qū)域的變異,對(duì)于非外顯子區(qū)域(如內(nèi)含子、基因間區(qū)域)的變異無法檢測(cè),而這些區(qū)域的某些變異也可能對(duì)基因的表達(dá)和功能產(chǎn)生重要影響,如內(nèi)含子中的突變可能影響基因的剪接。

數(shù)據(jù)分析復(fù)雜:全外顯子測(cè)序會(huì)產(chǎn)生大量的數(shù)據(jù),需要復(fù)雜的生物信息學(xué)工具和方法來進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。包括數(shù)據(jù)的質(zhì)量控制、變異的檢測(cè)和注釋、致病性的評(píng)估等多個(gè)環(huán)節(jié),其中任何一個(gè)環(huán)節(jié)出現(xiàn)問題都可能導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)論。 二代測(cè)序又可以稱之為什么?江蘇嘉安健達(dá)二代測(cè)序應(yīng)用

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①二代測(cè)序一般多久出結(jié)果?

二代測(cè)序(Next-GenerationSequencing,NGS)出結(jié)果的時(shí)間會(huì)受到多種因素的影響,一般在數(shù)天到數(shù)周不等。

1、樣本類型和質(zhì)量

不同的樣本類型處理時(shí)間不同。例如,血液樣本相對(duì)容易處理,提取DNA的過程比較常規(guī)。如果是組織樣本,可能需要先進(jìn)行樣本的解離等復(fù)雜操作。如果樣本質(zhì)量高,DNA提取和文庫(kù)構(gòu)建等前期工作會(huì)比較順利,能加快整體進(jìn)程。但如果樣本量少或者DNA有降解等質(zhì)量問題,可能需要重新提取樣本或者進(jìn)行DNA修復(fù)等操作,這會(huì)**延長(zhǎng)時(shí)間。例如,對(duì)于新鮮血液樣本,DNA提取可能在1-2天內(nèi)完成;而對(duì)于一些福爾馬林固定石蠟包埋(FFPE)組織樣本,可能需要3-5天來完成高質(zhì)量DNA的提取和后續(xù)的優(yōu)化處理。


山西二代測(cè)序分析二代測(cè)序常用于產(chǎn)前的檢測(cè)或診斷。

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二代測(cè)序的建庫(kù)步驟⑥

六、文庫(kù)質(zhì)量檢測(cè)

定量檢測(cè):使用熒光定量PCR(qPCR)或其他核酸定量方法(如Qubit)來確定文庫(kù)的濃度。Qubit是一種基于熒光染料與核酸特異性結(jié)合的定量方法,它可以準(zhǔn)確地測(cè)量DNA或RNA的濃度,并且對(duì)不同大小的核酸片段有較好的定量準(zhǔn)確性。通過定量檢測(cè),可以了解文庫(kù)的產(chǎn)量,為后續(xù)的測(cè)序上樣量提供參考。

片段大小檢測(cè):利用瓊脂糖凝膠電泳或生物分析儀(如Agilent2100Bioanalyzer)來檢測(cè)文庫(kù)片段大小。瓊脂糖凝膠電泳是一種傳統(tǒng)的方法,通過將文庫(kù)樣品在瓊脂糖凝膠中進(jìn)行電泳,根據(jù)DNA片段在電場(chǎng)中的遷移速度來判斷片段大小。生物分析儀則可以提供更精確的片段大小分布和濃度信息,它是基于微流體芯片技術(shù),能夠快速、準(zhǔn)確地分析文庫(kù)質(zhì)量。

關(guān)于二代測(cè)序的簡(jiǎn)介:

二代測(cè)序技術(shù)(Next-Generation Seguencing,NGS)也稱為高通量測(cè)序技術(shù),是一種能夠同時(shí)對(duì)數(shù)百萬甚至數(shù)十億個(gè) DNA片段進(jìn)行測(cè)序的方法。與傳統(tǒng)的桑格測(cè)序相比二代測(cè)序技術(shù)具有高通量、高準(zhǔn)確性、高靈敏度和低成本等優(yōu)勢(shì)。

二代測(cè)序技術(shù)在大幅提高了測(cè)序速度的同時(shí),大幅度的降低了測(cè)序成本,保持了高準(zhǔn)確性,以前完成一個(gè)人類基因組的測(cè)序需要3年時(shí)間,而使用二代測(cè)序技術(shù)則需要1周,但其序列讀長(zhǎng)方面比起一代測(cè)序技術(shù)則要短很多,大多只100bp-150bp。


二代測(cè)序是2005年以后開始的嗎?

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二代測(cè)序技術(shù)的一些***研究進(jìn)展②

植物基因組學(xué)研究領(lǐng)域 :

花生四倍體野生種基因組測(cè)序:河南農(nóng)業(yè)大學(xué)殷冬梅教授團(tuán)隊(duì)和上海交通大學(xué)韋朝春教授團(tuán)隊(duì)聯(lián)合發(fā)布了花生四倍體野生種近乎完整基因組 amon2.0 版本。該研究結(jié)合 ONT 超長(zhǎng)讀段、二代測(cè)序和 Hi-C 等多種測(cè)序技術(shù),使基因組的連續(xù)性、完整性和準(zhǔn)確性都得到了顯著提高,為花生的遺傳馴化和分子育種提供了重要的基因組數(shù)據(jù)信息資源。

長(zhǎng)雄野生稻基因組解析:中科院昆明動(dòng)物所王文研究組與云南省農(nóng)科院糧食作物研究所胡鳳益研究組等中外機(jī)構(gòu)合作,利用二代測(cè)序技術(shù)成功組裝出高質(zhì)量的長(zhǎng)雄野生稻基因組,并對(duì)其與近緣物種的分歧時(shí)間、基因的收縮擴(kuò)張等進(jìn)行了分析,還鑒定出一批可能影響地下莖以及自交不親和性狀的候選基因及代謝途徑,為解析相關(guān)分子機(jī)制提供了重要線索。 二代測(cè)序與Sanger測(cè)序相同嗎?山西嘉安健達(dá)二代測(cè)序運(yùn)用

二代測(cè)序的原理是什么?江蘇嘉安健達(dá)二代測(cè)序應(yīng)用

二代測(cè)序的應(yīng)用領(lǐng)域有哪些?

基因組學(xué)研究:用于全基因組測(cè)序,快速獲取物種的基因組序列信息,研究基因組結(jié)構(gòu)、變異、進(jìn)化等;進(jìn)行全外顯子組測(cè)序,重點(diǎn)關(guān)注編碼蛋白質(zhì)的外顯子區(qū)域,發(fā)現(xiàn)與疾病相關(guān)的基因突變。

轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究:通過對(duì)轉(zhuǎn)錄組進(jìn)行測(cè)序,可分析基因的表達(dá)水平、可變剪接、新轉(zhuǎn)錄本發(fā)現(xiàn)等,有助于深入了解基因在不同生理和病理狀態(tài)下的表達(dá)調(diào)控機(jī)制。

疾病診斷與***:在遺傳病診斷中,能夠檢測(cè)出導(dǎo)致遺傳病的基因突變,為疾病的診斷、遺傳咨詢和產(chǎn)前診斷提供依據(jù);在**研究中,可分析腫瘤細(xì)胞的基因突變、拷貝數(shù)變異、基因融合等,為**的早期診斷、靶向***和預(yù)后評(píng)估提供支持。

藥物研發(fā):用于藥物靶點(diǎn)的發(fā)現(xiàn)和驗(yàn)證,通過分析疾病相關(guān)的基因變異和表達(dá)變化,確定潛在的藥物作用靶點(diǎn);還可進(jìn)行藥物基因組學(xué)研究,預(yù)測(cè)患者對(duì)藥物的反應(yīng)和不良反應(yīng),實(shí)現(xiàn)個(gè)體化藥物***。

微生物學(xué)研究:對(duì)微生物群落進(jìn)行宏基因組測(cè)序,無需培養(yǎng)即可分析微生物的種類、豐度和功能基因,了解微生物群落的結(jié)構(gòu)和動(dòng)態(tài)變化,研究微生物與宿主的相互作用,以及在環(huán)境科學(xué)、農(nóng)業(yè)、醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域的應(yīng)用


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標(biāo)簽: 二代測(cè)序