分光光度計是用不連續(xù)的波長采樣反射物體或透射物體的一種測量儀器。由于不同物體分子的結(jié)構(gòu)不同,對不同波長光線的吸收能力也不同,因此,每種物體都具有特定的吸收光譜。能從含有各種波長的混合光中,將每一種單色光分離出來,并測量其強度的儀器叫做分光光度計。分光光度法是比色法的發(fā)展。比色法只限于在可見光區(qū),分光光度法則可以擴展到紫外光區(qū)和紅外光區(qū)。分光光度法則要求近于真正單色光,其光譜帶寬比較大不超過3-5nm,在紫外區(qū)可到1nm以下,來自棱鏡或光柵,具有較高的精度。波長的實際測定值和理論值相減,就是紫外可見火焰光度計的波長的準確度。四川光度計火焰光度計
羅丹明B的標準溶液的熒光光譜如圖4所示。短波長側(cè)的熒光被再次吸收,導致標準溶液的濃度變高的同時峰頂向長波長側(cè)變化。根據(jù)577nm的熒光強度值創(chuàng)建的標準曲線如圖5以及圖6所示。如圖5所示,在ug/ml(Abs)或更高的高濃度區(qū)域,標準曲線是彎曲的,但在圖6的低濃度區(qū)域,可獲得線性度良好的標準曲線。3比較結(jié)果、定量下限值來比較靈敏度與應用報告,使用標準曲線和10次空白測定中計算得的標準偏差σ,計算出了定量下限值(10σ)和檢測下限值(3σ)。另外,采用了線性度較高的標準曲線。UV-2600i和RF-6000的定量下限值和檢測下限值如表3所示。從通過本實驗算出的定量下限值的比可知,RF-6000的靈敏度較高,是UV-2600i的400倍以上。即使對圖3和圖6的低濃度區(qū)域的標準曲線進行比較,圖6(RF-6000)的結(jié)果中得到了離散較小的標準曲線。與對未被樣品吸收的照射光進行檢測的吸光光度法不同,熒光光度法以零為標準檢測熒光,因此噪聲水平低,可得到較高的靈敏度。UV-2600i和RF-6000的標準曲線的相關(guān)系數(shù)的平方值與濃度范圍的關(guān)系如表4所示。另外,使用UV-2600i時,低于空白以外的定量下限值的點除外。即使在未達到UV-2600i的定量下限值的區(qū)域(0~)。河南f-500火焰光度計原理紫外-可見火焰光度計應避免長期不用。
PMTs提供快速的反應時間和良好的靈敏度,并且可以在紫外光譜調(diào)節(jié)至特定的范圍。但一些制造商依賴于光敏二極管的動態(tài)范圍在數(shù)秒內(nèi)行使所有的光譜測量。在大部分的樣品類型中,分光光度計可接受樣品孔、小玻璃管cuvette、吸漿管和微孔板。微孔板主要是滿足高通量的需要和大規(guī)模的實驗室需求。但盡管對于小實驗室來說,制造商仍然提供了多種容器轉(zhuǎn)換器來滿足通量的要求和減少實驗時間。用小試管cuvette裝樣品容量一般從1μl-5ml,并且一些儀器裝備了各種樣品的固定物來滿足各種改變需要。
紫外可見分光光度計是分析測試實驗室里常見的一種分析實驗室儀器,屬于光學儀器的一種可廣泛應用于醫(yī)療衛(wèi)生、化學化工、環(huán)保、地質(zhì)、機械、冶金、石油、食品、生物、材料、計量科學、農(nóng)業(yè)、林業(yè)、漁業(yè)等領(lǐng)域中的科研、教學等各個方面,用來進行定性分析、純度檢查、結(jié)構(gòu)分析、絡合物組成及穩(wěn)定常數(shù)的測定、反應動力學研究等。世界首臺紫外可見分光光度計誕生于1918年的美國國家標準局,后來紫外可見分光光度計經(jīng)不斷改進,又出現(xiàn)自動記錄、自動打印、數(shù)字顯示、微機控制等各種類型的儀器,使光度法的靈敏度和準確度也不斷提高,其應用范圍也在不斷擴大。紫外可見分光光度法從問世以來,在應用方面有了很大的發(fā)展,尤其是在相關(guān)學科發(fā)展的基礎(chǔ)上,促使紫外可見分光光度計的不斷創(chuàng)新,功能更加齊全,使得光度法的應用更拓寬了范圍。武漢集思儀器設備有限公司,一家專注于實驗室儀器服務的企業(yè),服務了上百家實驗室、科研機構(gòu)以及各大高校,供多種實驗室儀器和試劑!有實驗室儀器采購需求的可以咨詢武漢集思儀器設備有限公司!保持紫外-可見火焰光度計表面和工作環(huán)境的清潔。
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超微量火焰光度計不需要比色皿。四川光度計火焰光度計
分光光度計的光譜也是需要考慮的一個重要因素。實驗室研究人員希望省錢購入專門儀器定量核酸、蛋白或者細菌的生長情況。例如AmershamBiosciencesofPiscataway公司的GeneQuantII能在230、260、280、320、595和600nm的波長下測量樣品。果果需要更大的靈活性,研究者可以考慮一種更高性能的寬光譜儀器,可以程序性地進行ELISAs分析和比色分析。紫外分光光度計一般覆蓋190nm和380nm波長,通常利用氘燈照明。一些特殊的儀器可以提供滿足光子學和半導體研究需要的光譜范圍。四川光度計火焰光度計