1.設(shè)計(jì)原理紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)是基于紫外可見(jiàn)分光光度法原理,利用物質(zhì)分子對(duì)紫外可見(jiàn)光譜區(qū)的輻射吸收來(lái)進(jìn)行分析的一種分析儀器。主要由光源、單色器、吸收池、檢測(cè)器和信號(hào)處理器等部件組成。光源的功能是提供足夠強(qiáng)度的、穩(wěn)定的連續(xù)光譜。紫外光區(qū)通常用氫燈或氘燈.見(jiàn)光區(qū)通常用鎢燈或鹵鎢燈。單色器的功能是將光源發(fā)出的復(fù)合光分解并從中分出所需波長(zhǎng)的單色光。色散元件有棱鏡和光柵兩種??梢?jiàn)光區(qū)的測(cè)量用玻璃吸收池,紫外光區(qū)的測(cè)量須用石英吸收池。檢測(cè)器的功能是通過(guò)光電轉(zhuǎn)換元件檢測(cè)透過(guò)光的強(qiáng)度,將光信號(hào)轉(zhuǎn)變成電信號(hào)。常用的光電轉(zhuǎn)換元件有光電管、光電倍增管及光二極管陣列檢測(cè)器。分光光度計(jì)的分類(lèi)方法有多種:按光路系統(tǒng)可分為單光束和雙光束分光光度計(jì);按測(cè)量方式可分為單波長(zhǎng)和雙波長(zhǎng)分光光度計(jì);按繪制光譜圖的檢測(cè)方式分為分光掃描檢測(cè)與二極管陣列全譜檢測(cè)??梢?jiàn)分光光度計(jì)(又名可見(jiàn)光度計(jì)、分光光度計(jì))是可見(jiàn)光分光光度法是采用新型單片機(jī)技術(shù),開(kāi)發(fā)出能夠進(jìn)行定量測(cè)量(標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)量,可對(duì)物質(zhì)進(jìn)行濃度直讀);OD值直接測(cè)量(吸光度、透過(guò)率和能量等直讀);動(dòng)力學(xué)測(cè)試(測(cè)出物質(zhì)濃度隨時(shí)間變化OD值的變化);光譜掃描。分光光度計(jì)應(yīng)按照國(guó)家計(jì)量檢定規(guī)程規(guī)定,定期進(jìn)行校正檢定。中國(guó)澳門(mén)紫外可見(jiàn)分光分光光度計(jì)
基態(tài)原子吸收光源的能量而變成激發(fā)態(tài),激發(fā)態(tài)原子在去活化過(guò)程中將吸收的能量以熒光的形式釋放出來(lái),此熒光信號(hào)的強(qiáng)弱與樣品中待測(cè)元素的含量成線性關(guān)系,因此通過(guò)測(cè)量熒光強(qiáng)度就可以確定樣品中被測(cè)元素的含量。原子熒光光度計(jì)具有原子吸收光譜和原子發(fā)射光譜兩種技術(shù)優(yōu)勢(shì),并克服現(xiàn)有分析技術(shù)的不足,是一種優(yōu)良的痕量分析儀器。其原理是利用硼氫化鉀或硼氫化鈉作為還原劑,將樣品溶液中的待分析元素還原為揮發(fā)性共價(jià)氣態(tài)氫化物(或原子蒸汽),然后借助載氣將其導(dǎo)入原子化器進(jìn)行原子化而形成基態(tài)原子?;鶓B(tài)原子吸收光源的能量而變成激發(fā)態(tài),激發(fā)態(tài)原子在去活化過(guò)程中將吸收的能量以熒光的形式釋放出來(lái),此熒光信號(hào)的強(qiáng)弱與樣品中待測(cè)元素的含量成線性關(guān)系,因此通過(guò)測(cè)量熒光強(qiáng)度就可以確定樣品中被測(cè)元素的含量。浙江原子吸收分光分光光度計(jì)教程選購(gòu)分光光度計(jì)時(shí)需要能夠考慮到紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)設(shè)備的檢測(cè)器。
在測(cè)量準(zhǔn)確性和精確度時(shí),將空白濾光片和樣品濾光片放入插槽內(nèi)。將測(cè)得的輸出吸光度值與允許值范圍比較。在檢查波長(zhǎng)時(shí),測(cè)定三個(gè)測(cè)試濾光片在對(duì)應(yīng)波長(zhǎng)(260nm、280nm和800nm)下的吸光度,以確定每個(gè)波長(zhǎng)的變異系數(shù)。許多分光光度計(jì),包括Eppendorf的所有儀器,都帶有一個(gè)特殊的功能——自檢。Eppendorf建議用戶(hù)至少每周運(yùn)行一次自檢,但自動(dòng)自檢的頻率可根據(jù)需要進(jìn)行設(shè)定。自檢主要檢查儀器的幾個(gè)部分。它通過(guò)測(cè)定現(xiàn)有波長(zhǎng)的隨機(jī)誤差來(lái)校驗(yàn)檢測(cè)器,通過(guò)檢查大能量、隨機(jī)誤差、基準(zhǔn)傳感器的信號(hào)和光強(qiáng)度來(lái)校驗(yàn)光源。
分光光度計(jì)的光譜也是需要考慮的一個(gè)重要因素。實(shí)驗(yàn)室研究人員希望省錢(qián)購(gòu)入專(zhuān)門(mén)儀器定量核酸、蛋白或者細(xì)菌的生長(zhǎng)情況。例如AmershamBiosciencesofPiscataway公司的GeneQuantII能在230、260、280、320、595和600nm的波長(zhǎng)下測(cè)量樣品。果果需要更大的靈活性,研究者可以考慮一種更高性能的寬光譜儀器,可以程序性地進(jìn)行ELISAs分析和比色分析。紫外分光光度計(jì)一般覆蓋190nm和380nm波長(zhǎng),通常利用氘燈照明。一些特殊的儀器可以提供滿(mǎn)足光子學(xué)和半導(dǎo)體研究需要的光譜范圍。可見(jiàn)分光光度計(jì)一般使用玻璃比色皿即可,而紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的紫外區(qū)段需使用石英比色皿。
試劑盒包含一個(gè)空白濾光片、三個(gè)檢查光度的濾光片和三個(gè)校正波長(zhǎng)的濾光片。每個(gè)濾光片的吸光值是相對(duì)空白濾光片測(cè)定的。這個(gè)試劑盒不僅能讓用戶(hù)獲得測(cè)量準(zhǔn)確性的信息,也能提供精確度的信息,包括平均值和變異系數(shù)。在測(cè)量準(zhǔn)確性和精確度時(shí),將空白濾光片和樣品濾光片放入插槽內(nèi)。將測(cè)得的輸出吸光度值與允許值范圍比較。在檢查波長(zhǎng)時(shí),測(cè)定三個(gè)測(cè)試濾光片在對(duì)應(yīng)波長(zhǎng)(260nm、280nm和800nm)下的吸光度,以確定每個(gè)波長(zhǎng)的變異系數(shù)。**后,許多分光光度計(jì),包括Eppendorf的所有儀器,都帶有一個(gè)特殊的功能——自檢。Eppendorf建議用戶(hù)至少每周運(yùn)行一次自檢,但自動(dòng)自檢的頻率可根據(jù)需要進(jìn)行設(shè)定。自檢主要檢查儀器的幾個(gè)部分。它通過(guò)測(cè)定現(xiàn)有波長(zhǎng)的隨機(jī)誤差來(lái)校驗(yàn)檢測(cè)器,通過(guò)檢查大能量、隨機(jī)誤差、基準(zhǔn)傳感器的信號(hào)和光強(qiáng)度來(lái)校驗(yàn)光源。**后,它還通過(guò)測(cè)定紫外光譜范圍內(nèi)強(qiáng)度峰值位置的精確度來(lái)確定波長(zhǎng)的系統(tǒng)及隨機(jī)誤差。遵照這些建議來(lái)維護(hù)分光光度計(jì),那么在今后的使用過(guò)程中再也不用擔(dān)心測(cè)量結(jié)果有問(wèn)題啦。(來(lái)源:互聯(lián)網(wǎng)整理)(圖片來(lái)源:Pixabay)上周看點(diǎn)2832萬(wàn)大單!山一大公開(kāi)采購(gòu)成像分析系統(tǒng)等設(shè)備刷瓶子!紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)應(yīng)放置于可承重的穩(wěn)定水平臺(tái)面。天津分光分光光度計(jì)選購(gòu)
使用分光光度計(jì)前要調(diào)零。中國(guó)澳門(mén)紫外可見(jiàn)分光分光光度計(jì)
兩束光合為一束。并交替通過(guò)入射狹縫進(jìn)入單色器中,經(jīng)離軸拋物鏡將光束平行地投射在光柵上,色散并通過(guò)出射狹縫之后,被濾光片濾除高級(jí)次光譜,再經(jīng)橢球鏡聚焦在探測(cè)器的接收面上。探測(cè)器將上述交變的信號(hào)轉(zhuǎn)換為相應(yīng)的電信號(hào),經(jīng)放大器進(jìn)行電壓放大后,轉(zhuǎn)入A/D轉(zhuǎn)換單位,計(jì)算機(jī)處理后得到從高波數(shù)到低波數(shù)的紅外吸收光譜圖。元析儀器紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)二、紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)和紅外分光光度計(jì)的概述不同:1、紫外分光光度計(jì)的概述:根據(jù)吸收光譜圖上的一些特征吸收,特別是比較大吸收波長(zhǎng)λmax和摩爾吸收系數(shù)ε是檢定物質(zhì)的常用物理參數(shù)。這在藥物分析上就有著很***的應(yīng)用。在國(guó)內(nèi)外的藥典中,已將眾多的藥物紫外吸收光譜的比較大吸收波長(zhǎng)和吸收系數(shù)載入其中,為藥物分析提供了很好的手段。2、紅外分光光度計(jì)的概述:由光源發(fā)出的光,被分為能量均等對(duì)稱(chēng)的兩束,一束為樣品光通過(guò)樣品,另一束為參考光作為基準(zhǔn)。這兩束光通過(guò)樣品室進(jìn)入光度計(jì)后,被扇形鏡以一定的頻率所調(diào)制,形成交變信號(hào)。三、紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)和紅外分光光度計(jì)的應(yīng)用不同:1、紫外分光光度計(jì)的應(yīng)用:將分析樣品和標(biāo)準(zhǔn)樣品以相同濃度配制在同一溶劑中,在同一條件下分別測(cè)定紫外可見(jiàn)吸收光譜。中國(guó)澳門(mén)紫外可見(jiàn)分光分光光度計(jì)