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病理實(shí)驗(yàn)外包,病理染色切片常見問題及解決方法:1.切片彎曲且不能形成直帶●原因:①蠟塊上下或左右兩邊不平行。②蠟塊與切片刀刀口不平行。③組織塊外形不整齊。④切片刀各處的鋒利程度不一致?!窠鉀Q方法:①將蠟塊四邊反復(fù)修平對稱。②調(diào)節(jié)蠟塊夾持器,使其與切片刀平行。③修整組織塊時,注意修切整齊。④移動切片刀,更換刀口位置。2.切片上出現(xiàn)裂紋●原因:①切片刀上有小缺口,或刀口不平整。②組織中可能含有較硬之物質(zhì),如固定液之結(jié)晶石灰質(zhì)。③包埋時石蠟凍結(jié)太慢?!窠鉀Q方法:①切片刀某處有缺口,可調(diào)換刀口部位或重新磨刀。刀口上缺口過多且不平整,可先將刀鋒垂直在磨刀石上輕輕磨數(shù)次,然后按常規(guī)磨刀田。②組織中硬性物質(zhì)太多,則不宜用。③糾正包埋時的缺點(diǎn)。一般待蠟塊周圍凝結(jié)一層,即可放入冷水中。南京英瀚斯,專業(yè)的病理染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)平臺。病理實(shí)驗(yàn)外包檢測,就找南京英瀚斯。云南專門做病理實(shí)驗(yàn)外包公司
病理實(shí)驗(yàn)外包,病理染色常見染色介紹TUNEL染色:基因組DNA斷裂時,暴露的3’-OH可以在末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶(TerminalDeoxynucleotidylTransferase,TdT)的催化下加上熒光素(FITC)標(biāo)記的dUTP(fluorescein-dUTP),從而可以通過熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀進(jìn)行檢測,這就是TUNEL(TdT-mediateddUTPNick-EndLabeling)法檢測細(xì)胞凋亡的原理。實(shí)驗(yàn)步驟使細(xì)胞或組織貼在載玻片上?固定?洗滌?通透?洗滌?預(yù)平衡?用熒光素12-dUTP標(biāo)記斷裂的DNA鏈?終止反應(yīng)?洗滌?封片?分析樣品南京英瀚斯,專業(yè)的病理染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)平臺。云南專門做病理實(shí)驗(yàn)外包公司南京英瀚斯,專業(yè)的病理實(shí)驗(yàn)外包服務(wù)平臺。
病理實(shí)驗(yàn)外包,病理染色膠原纖維染色法1.VanGieson(V.G)***-酸性品紅法鮮紅色:膠原纖維黃色:肌纖維、細(xì)胞質(zhì)、紅細(xì)胞藍(lán)褐色:胞核2.天狼星紅(Siriusred)***染色法紅色:膠原纖維綠色:細(xì)胞核黃色:其他另:天狼星紅***染色法:(偏光顯微鏡)Ⅰ型:強(qiáng)雙折光性,呈黃色或紅色纖維Ⅱ型:弱雙折光,呈多種色彩疏網(wǎng)狀分布Ⅲ型:弱雙折光,呈綠色的細(xì)纖維Ⅳ型:弱雙折光的基膜,呈淡黃色 公司自建有標(biāo)準(zhǔn)的細(xì)胞培養(yǎng)房,配備有生物安全柜、超凈工作臺、三氣細(xì)胞培養(yǎng)箱、二氧化碳細(xì)胞培養(yǎng)箱、熒光倒置顯微鏡、體視鏡、酶標(biāo)儀、流式細(xì)胞儀等設(shè)備。
病理實(shí)驗(yàn)外包,病理染色常見染色介紹普魯士藍(lán)染色:普魯士藍(lán)染色(Prussianbluereaction)又稱為含鐵血黃素染色,即經(jīng)過亞鐵**鉀和稀酸處理后可以產(chǎn)生藍(lán)色,常見于吞噬細(xì)胞內(nèi)會間質(zhì)內(nèi),主要顯示三價鐵鹽。Perls普魯士藍(lán)是非常經(jīng)典的組織化學(xué)反應(yīng),是顯示組織內(nèi)三價鐵的一種敏感、傳統(tǒng)優(yōu)良的方法,其染色原理為:亞鐵**鉀溶液使三價鐵離子從蛋白質(zhì)中被稀鹽酸分離出來,三價鐵與亞鐵**鉀反應(yīng),生成一種不溶解的藍(lán)色化合物即三價鐵的亞鐵**物普魯士藍(lán),所以該反應(yīng)被稱為普魯士藍(lán)反應(yīng)。三價鐵的亞鐵**物是一種很穩(wěn)定的化合物,在反應(yīng)后可用紅色染色劑進(jìn)行復(fù)染,如核固紅、伊紅、中性紅等。Perlsstain常用于顯示局部組織內(nèi)各種出血***變,常見于吞噬細(xì)胞內(nèi)。在判斷含鐵血黃素沉積時,用Perls反應(yīng)可以得到證實(shí),該染色方法可以很好的區(qū)分含鐵血黃素和其他色素。該染色液穩(wěn)定性好、可以長期保存、不易產(chǎn)生沉淀、應(yīng)用范圍廣、可以進(jìn)行復(fù)染。南京英瀚斯,專業(yè)的病理染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)平臺。南京英瀚斯-病理實(shí)驗(yàn)外包檢測-專業(yè)第三方檢測機(jī)構(gòu)。
病理實(shí)驗(yàn)外包,病理染色免疫組化染色的分類:1)按標(biāo)記物質(zhì)的種類,如熒光染料、放射性同位素、酶(主要有辣根過氧化物酶和堿性磷酸酶)、鐵蛋白、膠體金等,可分為免疫熒光法、放射免疫法、免疫酶標(biāo)法和免疫金銀法等。2)按染色步驟可分為直接法(又稱一步法)和間接法(二步、三步或多步法)。與直接法相比,間接法的靈敏度提高了許多。3)按結(jié)合方式可分為抗原-抗體結(jié)合,如過氧化物酶-抗過氧化物酶(***)法;親和連接,如卵白素-生物素-過氧化物酶復(fù)合物(ABC)法、鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化物酶連結(jié)(SP)法等,其中SP法是比較常用的方法;聚合物鏈接,如即用型二步法,此方法尤其適合于內(nèi)源性生物素含量高的組織抗原檢測。病理實(shí)驗(yàn)外包檢測-南京英瀚斯-生物實(shí)驗(yàn)外包-大小鼠實(shí)驗(yàn)。安徽推薦的病理實(shí)驗(yàn)外包公司
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病理實(shí)驗(yàn)外包,病理染色常見染色介紹TTC染色:TTC染色是TTC和活細(xì)胞線粒體內(nèi)的琥珀酸脫氫酶反應(yīng),生成紅色的甲月贊,用來表示細(xì)胞的活力。配制多為2%,染色要避光,37度條件下,它是評價腦缺血損傷常用的指標(biāo)。TTC(2,3,5—氯化三苯基四氮唑)是脂溶性光敏感復(fù)合物,1894年初次合成用來檢測種子的生存能力,1958年開始用來染色檢測哺乳動物組織的缺血梗塞。它是呼吸鏈中吡啶—核苷結(jié)構(gòu)酶系統(tǒng)的質(zhì)子受體,與正常組織中的脫氫酶反應(yīng)而呈紅色,而缺血組織內(nèi)脫氫酶活性下降,不能反應(yīng),故不會產(chǎn)生變化呈蒼白。TTC可以被活細(xì)胞中的具有還原活性的酶(好像主要是琥珀酸脫氫酶)還原生成粉紅色的還原產(chǎn)物,所以活組織部分呈現(xiàn)粉紅色,而死亡的細(xì)胞的還原酶的活力已經(jīng)消失,因此TTC不能被還原,所以死亡的組織呈現(xiàn)白色。南京英瀚斯,專業(yè)的病理染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)平臺。云南專門做病理實(shí)驗(yàn)外包公司