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實驗一無菌操作技術(shù)與主要儀器設(shè)備的使用本實驗主要介紹分子生物學(xué)實驗的課程設(shè)計及其必備的無菌操作技術(shù)。讓學(xué)生了解課程框架,建立無菌概念,掌握滅菌方法、無菌操作技能以及主要儀器設(shè)備的操作和使用規(guī)范。1.1緒論課程設(shè)計與課程特色1.2常用器材的準備與滅菌酒精燈和酒精棉球的制作,小指管、***頭、培養(yǎng)皿等耗材的準備與滅菌1.3培養(yǎng)基的配制與滅菌液體和固體LB培養(yǎng)基的配制與滅菌1.4溶液的配制與滅菌溶液Ⅰ、酚-氯仿-異戊醇溶液、***等的配制1.5主要儀器設(shè)備的虛擬操作高壓滅菌鍋、超凈臺、天平、離心機和移液器等的主要儀器設(shè)備的虛擬操作訓(xùn)練重難點:培養(yǎng)基及溶液的配制、試劑與耗材的滅菌方法及主要儀器的操作規(guī)范。細胞實驗外包。細胞實驗外包南京哪家比較好?英瀚斯生物。
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細胞實驗外包藍白班篩選實驗的原理是什么?一些載體(如PUC系列質(zhì)粒)帶有β-半乳糖苷酶(lacZ)N端α片段的編碼區(qū),該編碼區(qū)中含有多克隆位點(MCS),可用于構(gòu)建重組子。這種載體適用于只編碼β-半乳糖苷酶C端ω片段的突變宿主細胞。因此,宿主和質(zhì)粒編碼的片段雖都沒有半乳糖苷酶活性,但它們同時存在時,α片段與ω片段可通過α-互補形成具有酶活性的β-半乳糖苷酶。這樣,lacZ基因在缺少近操縱基因區(qū)段的宿主細胞與帶有完整近操縱基因區(qū)段的質(zhì)粒之間實現(xiàn)了互補。由α-互補而產(chǎn)生的LacZ+細菌在誘導(dǎo)劑IPTG(異丙基硫代半乳糖苷)的作用下,在生色底物X-Gal存在時產(chǎn)生藍色菌落。而當外源DNA插入到質(zhì)粒的多克隆位點后,幾乎不可避免地破壞α片段的編碼,使得帶有重組質(zhì)粒的LacZ-細菌形成白色菌落。這種重組子的篩選,稱為藍白斑篩選。吉林醫(yī)學(xué)細胞實驗外包選擇
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