病理實(shí)驗(yàn)外包,樣品保存和寄送注意事項(xiàng)一、取材注意事項(xiàng)1.取材動(dòng)作要迅速,不宜作太久的拖延以免組織細(xì)胞的成分、結(jié)構(gòu)等發(fā)生變化。2.切片材料應(yīng)根據(jù)需要觀察的部位進(jìn)行選擇,盡可能不要損傷所需要的部分。二、固定注意事項(xiàng)1.一般固定液,都以新配為好,配好后應(yīng)貯存在陰涼處,不宜放在日光下,以免引起化學(xué)變化,失去固定作用。2.有些混合固定液的成份之間會(huì)發(fā)生氧化還原作用,一定要在使用前才混合,如果混合太早,固定時(shí)就沒有作用了。3.固定材料時(shí),固定液必須充足,一般為材料塊的20~30倍,有些水分多的材料,中間應(yīng)更換1~2次新液。4.材料固定完畢后,保存于嚴(yán)密緊塞或加蓋的容器里,同時(shí)在容器外上標(biāo)簽,并隨同材料在溶液中投入相應(yīng)的標(biāo)簽,以免相互混淆。標(biāo)簽上注明固定液、材料來(lái)源、日期等。標(biāo)簽上的文字,應(yīng)用黑色鉛筆或繪圖黑墨水書寫。病理實(shí)驗(yàn)外包檢測(cè),就找南京英瀚斯。安徽生物病理實(shí)驗(yàn)外包推薦
病理實(shí)驗(yàn)外包,染色包埋的知識(shí):知識(shí)點(diǎn)1:包埋的概念組織經(jīng)過固定、脫水、透明和浸蠟等過程后,用包埋劑(石蠟、火棉膠、樹脂等)將組織塊包埋成塊,使得組織和包埋劑相熔一體并迅速冷卻,這個(gè)程序稱為包埋。知識(shí)點(diǎn)2:組織石蠟包埋法石蠟包埋法是制作光學(xué)顯微鏡切片的常規(guī)方法,包埋后的組織可以長(zhǎng)期保存。包埋的方法有包埋機(jī)包埋和手工包埋兩種。知識(shí)點(diǎn)3:體液石蠟包埋法痰液、胃液、尿液、胸腔積液、腹水等可以行石蠟包埋。痰液應(yīng)當(dāng)選用含血液的部分或較為可疑的實(shí)體部分,滴上伊紅后用皺紋紙包好,然后用10%的中性甲醛固定,再經(jīng)常規(guī)脫水,透明、浸蠟并包埋。新鮮的胃液、尿液、胸腔積液、腹水等體液標(biāo)本,倒去上層的澄清液體,將渾濁的液體放入離心管中,以轉(zhuǎn)速2000-3000轉(zhuǎn)每分鐘離心15分鐘,倒去上清液后,用10%中性甲醛固定沉淀物,然后進(jìn)行脫水透明、浸蠟、包埋。安徽生物病理實(shí)驗(yàn)外包推薦南京英瀚斯,專業(yè)的病理實(shí)驗(yàn)外包服務(wù)平臺(tái)。
病理實(shí)驗(yàn)外包,南京英瀚斯可開展冰凍切片免疫熒光染色1. 冰凍切片室溫晾干15 min,可用含10%正常山羊血清的PBS室溫封閉切片1小時(shí)(此步可不洗)。2. 滴加適當(dāng)比例稀釋的一抗或一抗工作液(抗體的量視組織大小而定,原則是可以均勻覆蓋組織面,且保證整個(gè)過程中不會(huì)使組織干涸)。3. 將切片放在加了PBS的免疫組化濕盒,室溫孵育2小時(shí)或4℃過夜。4. 第二天先將濕盒放到37℃回溫1 h,然后吸取片上的一抗進(jìn)行回收,將切片插入到小染缸PBS沖洗。5. 滴加用PBS稀釋好的二抗(避光)置于分子雜交箱中37℃孵育1小時(shí)。回收二抗,切片置于染缸內(nèi),PBS洗5 min×3次。6. 滴加DAPI工作液染核,室溫10~20 min(工作濃度0.1%染色15 min)。7. 回收DAPI,滴加5-10 μl 抗熒光衰減封片劑或中性樹膠,用處理干凈的蓋玻片封片,即可到熒光顯微鏡或者共聚焦顯微鏡下觀察拍照。8. 做好的片放在切片盒內(nèi),置于4℃冰箱,可保存一周左右。
病理實(shí)驗(yàn)外包,病理染色熒光原位雜交技術(shù)詳細(xì)介紹1、原理FISH(fluorescenceinsituhybridization)技術(shù)是一種重要的非放射性原位雜交技術(shù)。它的基本原理是:如果被檢測(cè)的染色體或DNA纖維切片上的靶DNA與所用的核酸探針是同源互補(bǔ)的,二者經(jīng)變性-退火-復(fù)性,即可形成靶DNA與核酸探針的雜交體。將核酸探針的某一種核苷酸標(biāo)記上報(bào)告分子如生物素、地高辛,可利用該報(bào)告分子與熒光素標(biāo)記的特異親和素之間的**化學(xué)反應(yīng),經(jīng)熒光檢測(cè)體系在鏡下對(duì)待測(cè)DNA進(jìn)行定性、定量或相對(duì)定位分析。2、實(shí)驗(yàn)流程FISH樣本的制備→探針的制備→探針標(biāo)記→雜交→(染色體顯帶)→熒光顯微鏡檢測(cè)→結(jié)果分析。3、特點(diǎn)原位雜交的探針按標(biāo)記分子類型分為放射性標(biāo)記和非放射性標(biāo)記。用同位素標(biāo)記的放射性探針優(yōu)勢(shì)在于對(duì)制備樣品的要求不高,可以通過延長(zhǎng)曝光時(shí)間加強(qiáng)信號(hào)強(qiáng)度,故較靈敏。缺點(diǎn)是探針不穩(wěn)定、自顯影時(shí)間長(zhǎng)、放射線的散射使得空間分辨率不高、及同位素操作較繁瑣等。南京英瀚斯,專業(yè)的病理染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)平臺(tái)。南京英瀚斯-病理實(shí)驗(yàn)外包檢測(cè)-專業(yè)第三方檢測(cè)機(jī)構(gòu)。
病理實(shí)驗(yàn)外包組織切片包含以下服務(wù):1.石蠟包埋及切片:石蠟切片(paraffinsection)的基本原理是用固定劑石蠟固定組織、細(xì)胞以及各種亞細(xì)胞器,保持組織微細(xì)結(jié)構(gòu),制成薄片,并用不同的染色方法增加各部分色差,在顯微鏡下觀察組織、細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu),或利用化學(xué)或物理方法顯示組織、細(xì)胞內(nèi)的某些化學(xué)成分,并可進(jìn)行形態(tài)和化學(xué)成分的定量分析。2.冰凍包埋及切片:冰凍切片(frozensection)是一種在低溫條件下使組織快速冷卻到一定硬度,然后進(jìn)行切片的方法,能夠較完好地保存細(xì)胞膜表面和細(xì)胞內(nèi)多種酶活性以及抗原免疫活性。因其制作過程較石蠟切片快捷、簡(jiǎn)便,而多應(yīng)用于手術(shù)中的快速病理診斷。病理實(shí)驗(yàn)外包檢測(cè),一站式生物病理實(shí)驗(yàn)外包檢測(cè)平臺(tái)。安徽生物病理實(shí)驗(yàn)外包推薦
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病理實(shí)驗(yàn)外包,病理染色常見染色介紹TTC染色:TTC染色是TTC和活細(xì)胞線粒體內(nèi)的琥珀酸脫氫酶反應(yīng),生成紅色的甲月贊,用來(lái)表示細(xì)胞的活力。配制多為2%,染色要避光,37度條件下,它是評(píng)價(jià)腦缺血損傷常用的指標(biāo)。TTC(2,3,5—氯化三苯基四氮唑)是脂溶性光敏感復(fù)合物,1894年初次合成用來(lái)檢測(cè)種子的生存能力,1958年開始用來(lái)染色檢測(cè)哺乳動(dòng)物組織的缺血梗塞。它是呼吸鏈中吡啶—核苷結(jié)構(gòu)酶系統(tǒng)的質(zhì)子受體,與正常組織中的脫氫酶反應(yīng)而呈紅色,而缺血組織內(nèi)脫氫酶活性下降,不能反應(yīng),故不會(huì)產(chǎn)生變化呈蒼白。TTC可以被活細(xì)胞中的具有還原活性的酶(好像主要是琥珀酸脫氫酶)還原生成粉紅色的還原產(chǎn)物,所以活組織部分呈現(xiàn)粉紅色,而死亡的細(xì)胞的還原酶的活力已經(jīng)消失,因此TTC不能被還原,所以死亡的組織呈現(xiàn)白色。南京英瀚斯,專業(yè)的病理染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)平臺(tái)。安徽生物病理實(shí)驗(yàn)外包推薦
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