●原因:①組織脫水,透明不夠。②浸蠟時(shí)間過長(zhǎng)、浸蠟溫度過高。③組織脫出是由于脫水、透明時(shí)間不夠,或組織中含有乙醇等,石蠟不易滲入組織中故導(dǎo)致石蠟與組織分離。④二甲苯使用時(shí)間過久。●解決方法:①必須按組織大小厚薄選擇脫水、透明時(shí)間。②依組織的性質(zhì)和結(jié)構(gòu)特點(diǎn)確定浸蠟時(shí)間、控制包埋溫度。一般這種情況難以補(bǔ)救。③脫水,透明滲蠟不夠,應(yīng)重新熔化,退回入二甲苯和酒精,再進(jìn)行滲蠟包埋。④更換二甲苯。2.切片皺褶太多且不能完全展開●原因:①石蠟太軟或室溫過高。②切片刀上粘有殘余的石蠟,刀口不干凈。③組織浸蠟時(shí)間不夠或脫水、透明不夠。④切片刀不鋒利。●解決方法:①可將蠟塊放入冰箱中冰凍后切片。并在切片時(shí)一邊切片一邊用冰塊冰凍或換蠟。如室溫過高,可開空調(diào)降低室溫。②切片刀不干凈,可用棉花沾少許二甲苯將刀口拭干凈。③組織浸蠟不夠,可重復(fù)浸蠟過程。④將切片刀磨銳利再行切片。南京英瀚斯,專業(yè)的病理染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)平臺(tái)。南京英瀚斯生物-病理實(shí)驗(yàn)外包檢測(cè)_疾病醫(yī)學(xué)模型_。海南靠譜的病理實(shí)驗(yàn)外包服務(wù)
病理實(shí)驗(yàn)外包常見染色介紹Warthin-Starry銀染:Warthin-Starry銀染染色原理在于螺旋體表面的黏蛋白與銀結(jié)合,呈黑色。染色結(jié)果:菌絲及顆粒呈黑色,背景呈黃色。銀染一種是檢測(cè)聚丙烯酰胺凝膠中蛋白質(zhì)的方法,其原理是銀離子在堿性pH環(huán)境下被還原成金屬銀,沉淀在蛋白質(zhì)的表面上顯色。銀染的方法種類很多,有文獻(xiàn)報(bào)道的就有100多種。但是其準(zhǔn)確的染色機(jī)制還不是特別地清楚。由于銀染的靈敏度很高,可染出膠上低于1ng的蛋白質(zhì)點(diǎn),故普遍地用在2D凝膠分析上,及極低蛋白含量測(cè)定的垂直凝膠中。主要是用于垂直凝膠電泳中低豐度蛋白的檢測(cè),如內(nèi)源性GST-Pulldown、Co-IP等實(shí)驗(yàn)中相互作用蛋白的研究。南京英瀚斯,專業(yè)的病理染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)平臺(tái)。青海專業(yè)的病理實(shí)驗(yàn)外包病理實(shí)驗(yàn)外包,真實(shí)靠譜的公司南京英瀚斯。
病理實(shí)驗(yàn)外包,石蠟組織脫水注意事項(xiàng)1. 脫水必須在有蓋的玻璃品中進(jìn)行,防止吸收空氣中的水分。2. 在更換高一級(jí)的脫水劑時(shí),比較好不要移動(dòng)材料以免損壞,可用吸管吸出器皿中的脫水劑,再用吸水吸盡器皿內(nèi)剩余液,然后于皿中加入高一級(jí)脫水劑。3. 在低濃度酒精中,每級(jí)停留不宜太長(zhǎng),否則易使組織變軟,助長(zhǎng)材料的解體。4. 在高濃度或純酒精中,每級(jí)停留的時(shí)間也不宜太長(zhǎng),否則會(huì)使組織變脆,影響切片。5. 如需過夜,應(yīng)停留在70%酒精中。6. 脫水必須徹底,否則不易透明,甚至使透明劑內(nèi)出現(xiàn)白色混濁現(xiàn)象。
病理實(shí)驗(yàn)外包,病理染色HE染色常見問題:Q1:HE染色比較常見的紅藍(lán)失調(diào)答:(1)偏藍(lán)色:蘇木素染色過深,分化不夠;伊紅試劑過期;伊紅染色時(shí)間太短,分化過度。(2)偏紅色:蘇木素染色過淺,分化過度;組織固定不佳,細(xì)胞核不著色;脫蠟不徹底,蘇木素染不上;蘇木素氧化成熟不夠;伊紅染色過深,分化不足。Q2:HE染色后出現(xiàn)的大白色斑塊或斑點(diǎn)答:脫蠟前烤片溫度偏低,時(shí)間過短,蠟未完全融化;切片在脫蠟溶劑中停留時(shí)間過短;脫蠟溶劑使用太久,得更新。代做實(shí)驗(yàn),病理實(shí)驗(yàn)外包檢測(cè),實(shí)驗(yàn)樣本檢測(cè)。
病理實(shí)驗(yàn)外包,病理染色常見染色介紹甲苯胺藍(lán)染色:甲苯胺藍(lán)(Toloniumchloride),是一種化合物,分子式為C28H20N2O10S2·2Na,分子量為656.62,甲苯胺藍(lán)深綠色粉末,具古銅色光澤,易溶于水,呈藍(lán)紫色溶液。微溶于醇呈藍(lán)色,極微溶于氯仿,幾乎不溶于醚。商品大部分為氯化鋅復(fù)鹽。主要用于氧化還原指示劑。用于眼科檢查角膜缺陷和損傷部分,組織化學(xué)中用于測(cè)定脫氧核糖核酸和診斷白喉。甲苯胺藍(lán)是常用的人工合成染料的一種,屬于醌亞胺染料類,這類染料一般含有兩個(gè)發(fā)色團(tuán),一個(gè)是胺基,一個(gè)是醌型苯環(huán),來構(gòu)成色原顯色。染料除有發(fā)色團(tuán)外,還要有能使色原對(duì)組織及其他被染物產(chǎn)生親和力的原子團(tuán)即助色。助色團(tuán)能促使染料產(chǎn)生電離成鹽類,幫助發(fā)色團(tuán)對(duì)組織產(chǎn)生染色力,使切片上的組織細(xì)胞著色。甲苯胺藍(lán)不僅含有兩個(gè)發(fā)色團(tuán),還含有兩個(gè)助色團(tuán),為堿性染料,甲苯胺藍(lán)中的陽離子有染色作用,組織細(xì)胞的酸性物質(zhì)與其中的陽離子相結(jié)合而被染色。軟骨基質(zhì)對(duì)甲苯胺藍(lán)的異染性,是因?yàn)檐浌腔|(zhì)的主要成分是軟骨黏蛋白、多糖物質(zhì),而酸性硫酸根與嗜堿性染料有親和力。病理實(shí)驗(yàn)外包檢測(cè),動(dòng)物模型 - 南京英瀚斯生物提供小鼠模型.**模型.病理實(shí)驗(yàn)外包檢測(cè)。海南靠譜的病理實(shí)驗(yàn)外包服務(wù)
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病理實(shí)驗(yàn)外包,冰凍切片取樣實(shí)驗(yàn)步驟:一、取材應(yīng)盡可能快地采取新鮮的材料,防止組織發(fā)生死后變化。二、速凍1.將組織塊平放于軟塑瓶蓋或特制小盒內(nèi)(直徑約2cm)。2.如組織塊小可適量加OCT包埋劑浸沒組織,然后將特制小盒緩緩平放入盛有液氮的小杯內(nèi)。3.當(dāng)盒底部接觸液氮時(shí)即開始?xì)饣序v,此時(shí)小盒保持原位切勿浸入液氮中,大約10~20s組織即迅速冰結(jié)成塊。4在制成凍塊后,即可置入恒冷箱切片機(jī)冰凍切片。5.若需要保存,應(yīng)快速以鋁箔或塑料薄膜封包,立即置入-80℃冰箱貯存?zhèn)溆谩H?、固?.樣品托上涂一層OCT包埋膠,將速凍組織置于其上,4℃冰箱預(yù)冷5~10min讓OCT膠浸透組織。2.取下組織置于錫箔或者玻片上,樣品托速凍。3.組織置于樣品托上,其上再添一層OCT膠,以完全覆蓋為宜,速凍架(PE)上30min。海南靠譜的病理實(shí)驗(yàn)外包服務(wù)