HE染色常見問題：切片染色不均勻，有片狀的弱著**存在答：（1）取材時組織太厚，固定過久，導(dǎo)致深部組織固定不佳，而表淺組織過度固定，而透明、脫水、浸蠟均是如此，這樣在后期染色時就會出現(xiàn)染色不均勻。應(yīng)該將厚的組織剖開固定。（2）制片過程有問題，切片厚薄不一，或者有刀痕，或組織與玻片間存在氣泡。同一張切片厚薄不一，一般都是在制片時，刀片固定不佳或刀片鈍或刀片與組織角度不佳（一般比較好角度為5°）（3）脫蠟前未烘烤，脫蠟時間過短或脫蠟液使用過久，導(dǎo)致脫蠟不徹底。（4）染色液過少，著色不均勻；或染色時部分組織干涸而另一部分濕潤，這樣會導(dǎo)致組織吸附染料的能力不一。（5）分化不當(dāng)。南京英瀚斯，專業(yè)的病理染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)平臺。讓您放心的實(shí)驗(yàn)外包公司，專業(yè)HE染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)平臺。湖北比較好的HE染色價格

HE染色觀察肝臟HE染色切片，首先要在顯微鏡下找到肝臟的標(biāo)志性結(jié)構(gòu)——肝小葉。顯微鏡首先調(diào)4倍物鏡，調(diào)準(zhǔn)焦螺旋至視野清晰，可以看到肝小葉結(jié)構(gòu)。人的肝小葉之間結(jié)締組織少，小葉分隔不明顯，但動物如豬或小鼠，其肝小葉分界非常明顯。肝小葉**有**靜脈，在橫切片上顯示為空洞。肝小葉之間為將物鏡調(diào)制10倍或20倍，就可以清楚地看到肝小葉結(jié)構(gòu)。肝細(xì)胞以**靜脈為中心向周圍放射狀排列，稱為肝板。一般在20倍物鏡下可以清晰看到肝細(xì)胞。20倍物鏡下，肝細(xì)胞內(nèi)染色為藍(lán)色的是細(xì)胞核，細(xì)胞核大而圓，居中，異染色質(zhì)少而著色淺，能清晰看到核仁。肝細(xì)胞胞質(zhì)豐富，多成嗜酸性，當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)合成旺盛時，胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)散在的嗜堿性物質(zhì)。肝細(xì)胞內(nèi)有豐富的細(xì)胞器比如溶酶體、高爾基體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，等等，但是在光鏡下是無法看到的，需要在電鏡下才能觀察到。當(dāng)然，肝小葉內(nèi)除了肝細(xì)胞，還有膽小管、肝血竇、肝巨噬細(xì)胞等組織形態(tài)，但是在HE染色時并不容易觀察到。做肝臟HE染色切片主要目的一般都是為了觀察肝細(xì)胞形態(tài)是否完整、胞核有無增大、肝小葉形態(tài)是否完整，以檢測藥物等刺激因素對肝臟的損傷作用。天津?qū)I(yè)的HE染色價格肺部組織HE染色如何觀察。

HE染色全名為蘇木精和伊紅染色方法，是**基本的病理學(xué)染色技術(shù)。由于組織或細(xì)胞的不同成分對蘇木精的親和力不同及染色性質(zhì)不一樣。經(jīng)蘇木精染色后，細(xì)胞核及鈣鹽粘液等呈藍(lán)色，可用鹽酸酒精分化和弱堿性溶液顯藍(lán)，如處理適宜，可使細(xì)胞核著清楚的深藍(lán)色，胞漿等其它成分脫色。再利用胞漿染料伊紅染胞漿，使胞漿的各種不同成分又呈現(xiàn)出深淺不同的粉紅色。故各種組織或細(xì)胞成分與病變的一般形態(tài)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)均可顯示出來。質(zhì)量好的HE具備條件1.細(xì)胞核與細(xì)胞漿藍(lán)紅相映，鮮艷亮麗；2.胞核鮮明、核膜、核染色質(zhì)顆粒均清晰可見；3.組織或一般結(jié)構(gòu)特點(diǎn)及假物質(zhì)成分均能顯示出來。

HE染色石蠟和冰凍切片樣本的處理，樣品處理：a.對于石蠟切片:二甲苯中脫蠟5-10分鐘;換用新鮮的二甲苯，再脫蠟5-10分鐘;無水乙醇5分鐘;90%乙醇2分;70%乙醇2分鐘;蒸餾水2分鐘.b.對于冰凍切片：蒸餾水2分鐘。c對于培養(yǎng)細(xì)胞：用4%多聚甲醛固定10分鐘以上。蒸餾水洗滌2分鐘。換用新鮮的蒸餾水，再洗滌2分鐘。蘇木素伊紅(HE)染色對于上述處理好的樣品：蘇木素染色液染色5-10分鐘(可以根據(jù)染色結(jié)果和要求調(diào)整時間)。浸自來水中沖洗去多余的染色液，約10分鐘。蒸餾水再洗滌一遍(數(shù)秒鐘)。95%乙醇5秒。伊紅染色液染色30秒-2分鐘(可以根據(jù)染色結(jié)果和要求調(diào)整時間)。此時，如果需要直接觀察，可以用70%乙醇洗滌2次。如需脫水、透明后封片按后續(xù)步驟進(jìn)行，70%乙醇洗滌后仍可按照后續(xù)步驟進(jìn)行脫水、透明和封片處理。HE染色原理 試劑 染色步驟 注意事項(xiàng) 。

HE染色構(gòu)成組織內(nèi)蛋白質(zhì)的氨基酸的種類很多，它們有不同的等電點(diǎn)。在普通染色法中，染色液的酸堿度為pH6左右，細(xì)胞內(nèi)的酸性物質(zhì)如細(xì)胞核的染色質(zhì)、腺細(xì)胞和神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)及透明軟骨基質(zhì)等均被堿性染料染色，這些物質(zhì)稱為嗜堿性。而細(xì)胞質(zhì)中的其它蛋白質(zhì)如紅細(xì)胞中的血紅蛋白、嗜酸粒細(xì)胞的顆粒及膠原纖維和肌纖維等被酸性染料染色，這些物質(zhì)稱為嗜酸型。如果改變?nèi)旧旱乃釅A度，pH值升高時，則原來被酸性染料染色的物質(zhì)可變?yōu)槭葔A性；pH值降低時，原來被堿性染料染色的物質(zhì)則可變?yōu)槭人嵝浴Ｋ哉f染色液的pH值可以影響染色的反應(yīng)。石蠟組織切片的HE染色。安徽推薦的HE染色分析

HE染色的實(shí)驗(yàn)?zāi)康囊约皩?shí)驗(yàn)結(jié)果分析。湖北比較好的HE染色價格

HE染色全名蘇木精—伊紅染色法，屬于化學(xué)染色法，其主要依靠蘇木精染液為堿性，主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著紫藍(lán)色；伊紅為酸性染料，主要使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分著紅色。實(shí)驗(yàn)過程：1、石蠟切片脫蠟至水：依次將切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-無水乙醇Ⅰ5min-無水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min，自來水洗。2、蘇木素染色：切片入蘇木素染液染3-5min，自來水洗，分化液分化，自來水洗，返藍(lán)液返藍(lán)，流水沖洗。3、伊紅染色：切片依次入85%、95%的梯度酒精脫水各5min，入伊紅染液中染色5min。4、脫水封片：切片依次放入無水乙醇I5min-無水乙醇II5min-無水乙醇Ⅲ5min-二甲Ⅰ5min-二甲苯Ⅱ5min透明，中性樹膠封片。5、顯微鏡鏡檢，圖像采集分析。結(jié)果判讀：細(xì)胞核呈藍(lán)色，細(xì)胞質(zhì)呈紅色湖北比較好的HE染色價格