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云南推薦實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型制作方法

來源: 發(fā)布時(shí)間:2024-05-28

5XFAD轉(zhuǎn)基因?qū)嶒?yàn)動(dòng)物模型。5XFAD小鼠在小鼠Thy1.2啟動(dòng)子的控制下過度表達(dá)人類APP和PSEN1蛋白,共有5個(gè)AD連鎖突變,分別是APP中的瑞典(K670N/M671L)、佛羅里達(dá)(I716V)和倫敦(V717I)突變,以及PSEN1中的M146L和L286V突變。1.5個(gè)月大的5XFAD小鼠就開始出現(xiàn)Aβ沉積。5XFAD小鼠在大腦中積累的Aβ42多于Aβ40,這表明5個(gè)FAD突變累積影響Aβ42的產(chǎn)生。然而,在5XFAD小鼠中未觀察到tau過度磷酸化和NFTs的形成。2個(gè)月大時(shí)出現(xiàn)星形膠質(zhì)細(xì)胞增生和小膠質(zhì)細(xì)胞增生,表明神經(jīng)炎癥發(fā)生在該模型早期。5XFAD小鼠再現(xiàn)了人類AD的病理學(xué),類似于Tg2576、APP23和APPPS1模型。英瀚斯生物,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型,飼養(yǎng)、造模、取材、檢測(cè)一站式完成。云南推薦實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型制作方法

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常見自發(fā)性實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型1.免疫缺陷動(dòng)物疾病模型1)B淋巴細(xì)胞缺陷疾病模型CBA/A小鼠,起源于CBA/H品系,特點(diǎn)是B淋巴細(xì)胞功能減退,為X-鏈隱性突變系,基因符號(hào)是Xid。臨床表現(xiàn)為免疫球蛋白缺失,細(xì)胞免疫正常。2)T淋巴細(xì)胞缺陷疾病模型裸小鼠,主要特征為無毛、裸著的、無胸腺和細(xì)胞免疫功能喪失,由于第十一對(duì)染色體上等位基因突變引起。該鼠免疫能力低,易傳染,生長(zhǎng)不良,繁殖力低。這種動(dòng)物能接受同種或異種組織移植,包括人cancer異種移植,可作為cancer免疫研究。國(guó)內(nèi)常用裸小鼠品系為BALB/Cnu/nu,Swissnu/nu和NCnu/nu等,維持費(fèi)較高?,F(xiàn)也有裸大鼠、裸豚鼠等。圖片2.自發(fā)性糖尿病動(dòng)物模型KK糖尿病小鼠屬先天遺傳缺陷性小鼠。該鼠對(duì)胰島素不敏感、對(duì)葡萄糖耐性小、糖尿病發(fā)病率高、老年鼠偶見肥胖。BBWistar大鼠是一種典型自發(fā)遺傳Ⅰ型(胰島素依賴性)糖尿病,發(fā)病率50-70%,臨床表現(xiàn)為多飲、多食、gao血壓、酮癥、胰島內(nèi)β-細(xì)胞大量破壞等。NIH肥胖大鼠(SHR/N-cp)是新培育的一種用于肥胖和糖尿病研究的動(dòng)物模型,表現(xiàn)出與人非胰島素依賴性糖尿病相似的代謝改變。湖南實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型檢測(cè)英瀚斯生物,可承接實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型藥效實(shí)驗(yàn)。

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肝切除實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型造模方法:大小鼠的肝葉形狀和大小不同。因此,切除每個(gè)肺葉需要特別注意其獨(dú)特的形狀和血管位置。左外側(cè)葉很容易切除,因?yàn)樗幸粋€(gè)狹窄的包含門靜脈和肝靜脈的蒂,并且不與下腔靜脈旁肝相連。然而,如果切除***于切除左側(cè)肝外葉(30%切除模型),則必須在肝左門區(qū)分離左側(cè)正中門靜脈和伴隨的肝動(dòng)脈。

英瀚斯具備專業(yè)動(dòng)物房、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室、造模操作人員,承接實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型。

由于正中葉在腔靜脈周圍有一個(gè)較寬的半基部,切除該葉需要在距腔靜脈3mm的距離處進(jìn)行幾次夾持。單純結(jié)扎肝葉的寬基部切除術(shù)有很高的風(fēng)險(xiǎn)導(dǎo)致腔靜脈收縮和殘端肝組織損傷,因?yàn)榇罅拷Y(jié)扎容易導(dǎo)致剩余肝組織變形。由于右上葉位于腔靜脈上,基部非常寬,并向背側(cè)延伸至右腔靜脈旁肝組織,因此技術(shù)上**難切除。切除需要小心地將夾鉗放置在離腔靜脈3毫米的距離處,并使用4或5條穿刺縫線,以避免損傷殘端和腔靜脈旁肝組織(圖6)。由于約70%的下腔靜脈旁組織由右上門靜脈的一個(gè)分支供應(yīng),這種潛在的損傷可能對(duì)小的殘肝非常重要。

理想的人類疾病實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型應(yīng)該是標(biāo)準(zhǔn)化的,可重復(fù)再現(xiàn)的。應(yīng)盡量選擇標(biāo)準(zhǔn)化實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,也應(yīng)在標(biāo)準(zhǔn)化動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)施內(nèi)完成,要均一性。復(fù)制的動(dòng)物模型來應(yīng)該力求可真實(shí)地反映人類疾病,即可特異地、可靠地反映某種疾病或某種機(jī)能、代謝、結(jié)構(gòu)變化,應(yīng)具備該種疾病的主要癥狀和體征,經(jīng)化驗(yàn)或X光照片、心電圖、病理切片等證實(shí)。若易自發(fā)地出現(xiàn)某些相應(yīng)病變的動(dòng)物,就不應(yīng)加以選用,易產(chǎn)生與復(fù)制疾病相混淆的疾病者也不宜選用。供醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)研究用的動(dòng)物模型,在復(fù)制時(shí),應(yīng)盡量考慮到今后臨床應(yīng)用和便于控制其疾病的發(fā)展,以利于研究的開展。如雌ji素能終止大鼠和小鼠的早期妊娠,但不能終止人的妊娠。因此,選用雌ji素復(fù)制大鼠和小鼠終止早期妊娠的模型是不適用的。有的動(dòng)物對(duì)某致病因子特別敏感,極易死亡,也不適用。如狗腹腔注射糞便濾液引起腹膜炎很快死亡(80% 24小時(shí)內(nèi)死亡),來不及做實(shí)驗(yàn)醫(yī)療觀察,而且糞便劑量及細(xì)菌菌株不好控制,因此不能準(zhǔn)確重復(fù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果。英瀚斯生物,承接大鼠實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型。

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實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型建模的原則。相似性,重復(fù)性,可靠性,適用性和可控性,易行性和經(jīng)濟(jì)性。在動(dòng)物身上復(fù)制人類疾病模型。目的在于從中找出可以推廣(外推)應(yīng)用于病人的有關(guān)規(guī)律。外推法(Extrapolation)要冒風(fēng)險(xiǎn),因?yàn)閯?dòng)物與人到底不是一種生物。例如在動(dòng)物身上無效的藥物不等于臨床無效,反之也然。因此,設(shè)計(jì)動(dòng)物疾病模型的一個(gè)重要原則是,所復(fù)制的模型應(yīng)盡可能近似于人類疾病的情況。能夠找到與人類疾病相同的動(dòng)物自發(fā)性疾病當(dāng)然比較好。英瀚斯生物公司 動(dòng)物房、手術(shù)操作實(shí)驗(yàn)室,可制作各類實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型。廣西好的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型外包

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型基因敲除、表性分析。云南推薦實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型制作方法

裸鼠瘤模型是比較常見和常用的一種瘤動(dòng)物模型,它在皮下移植瘤瘤模型的建立中起到重要作用。裸鼠瘤模型的接種一般有細(xì)胞接種和瘤塊接種兩種方式。裸鼠移植瘤模型的建立具有建立周期短、成瘤率高、易于操作、成本低的優(yōu)點(diǎn)。

造模方法:

1、細(xì)胞是貼壁細(xì)胞,細(xì)胞培養(yǎng)在RPMI-1640培養(yǎng)基中細(xì)胞傳代培養(yǎng):當(dāng)細(xì)胞長(zhǎng)至80-90%時(shí),去除培養(yǎng)基,加入PBS洗1-2次,去除PBS后,加入1ml胰酶消化1-3min后,加入3ml完全培養(yǎng)基中和胰酶終止消化,將消化的細(xì)胞轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1000rpm離心5min。倒掉上清后,加入3ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,1:3傳代至培養(yǎng)皿中培養(yǎng)。

2、將長(zhǎng)到培養(yǎng)皿80%-90%的細(xì)胞用胰酶消化下來,1000rpm離心,去除上清,加入完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,將細(xì)胞分別種在6孔板中,每孔種1×105個(gè)細(xì)胞。

3、將細(xì)胞進(jìn)行擴(kuò)增培養(yǎng),對(duì)細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù),將數(shù)量調(diào)整為2×107個(gè)細(xì)胞/ml。5、8周齡15只裸鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)7天后,隨機(jī)分為3組,每組分別在右腋皮下接種2×106(100ul/只)細(xì)胞。接種約兩周后出現(xiàn)結(jié)節(jié),每周瘤大小兩次。將裸鼠放入鼠籠中正常飼養(yǎng)4周后處死裸鼠,取裸鼠瘤拍照凍存。 云南推薦實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型制作方法