HE染色反藍(lán)的原理：蘇木素染液，細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)主要是去氧核糖核酸（DNA）,DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)中，兩條鏈上的磷酸基向外，帶負(fù)電荷，呈酸性，很容易與帶正電荷的蘇木素精堿性染料以離子或氫鍵結(jié)合而被染色。蘇木精在堿性溶液中呈藍(lán)色，所以細(xì)胞核被染成藍(lán)色。 分化：蘇木素染色之后，用水洗去未結(jié)合在細(xì)胞上的染液，但是在細(xì)胞核中結(jié)合過多的染料和細(xì)胞漿中吸附的染料必須用分化液1%鹽酸酒精脫去，才能保證細(xì)胞核和細(xì)胞漿染色的分明，把這個過程稱為染色的分化作用。因酸能破壞蘇木素的醌型結(jié)構(gòu)，使色素與組織解離，分化不可過度。藍(lán)化：分化之后蘇木素在酸性條件下處于紅色離子狀態(tài)，在堿性條件下處于藍(lán)色離子狀態(tài)，而呈藍(lán)色，所以分化之后用水洗去酸而中止分化，再用弱堿性水使蘇木精染上的細(xì)胞核變呈藍(lán)色，稱藍(lán)化作用，一般多用自來水浸洗即可變藍(lán)，也可用溫水（50度溫水比較好）變藍(lán)。比較基礎(chǔ)的病理染色HE染色。湖南比較好的HE染色

HE染色脫蠟不凈的原因及驗(yàn)證方法：1)二甲苯使用過久，含蠟成分太高或脫蠟效果差：可更換二甲苯驗(yàn)證。2)切片經(jīng)烤片，冷卻后放入二甲苯脫蠟或室溫太低；延長拖拉時間或用熱的切片脫蠟驗(yàn)證。3)脫蠟時間太短或振蕩太少，幅度太??；可延長脫蠟時間或以多振蕩來驗(yàn)證。4)洗滌二甲苯用的乙醇使用時間過久，導(dǎo)致乙醇中二甲苯含量過高，二甲苯殘留在切片上（由于二甲苯與水不相溶，切片上有二甲苯的地方，蘇木精就沒有辦法滲透進(jìn)去，在切片染色完成后留下了點(diǎn)狀的不著**域）：更換各道乙醇驗(yàn)證。5)二甲苯、乙醇質(zhì)量不佳（偶有試劑瓶內(nèi)裝的試劑與試劑名不相符）：換批號驗(yàn)證。6)更換脫蠟液體時試劑拿錯：需重新配置驗(yàn)證。7)更換脫蠟液體時試劑次序放錯：需重新配置驗(yàn)證。8)烤片時間短，切片上水分沒有烤干，也會導(dǎo)致著色不勻，出現(xiàn)點(diǎn)狀發(fā)白區(qū)域。上海比較好的HE染色報告HE染色切片知識以及如何做出漂亮的切片。

HE染色骨組織的處理方式：組織里存有鈣鹽可妨礙用常規(guī)方法制作良好切片。骨組織及鈣化病灶，經(jīng)過固定后，需要先將鈣鹽除去使組織軟化，才能進(jìn)行常規(guī)切片。如果脫鈣不全，則切片容易撕開或碎裂，損傷切片刀刀刃。脫去鈣鹽的過程，稱為脫鈣。骨組織固定24小時后，鋸下不超過0.5cm厚的薄骨片，以4%甲醛溶液固定后，進(jìn)行脫鈣。骨組織過厚則需延長脫鈣時間，但長時間浸于強(qiáng)酸會影響切片染色效果。取材骨組織固定于10%甲醛溶液24小時后再鋸取厚度約0.5cm骨片固定以10%甲醛溶液固定2天脫鈣將組織置于脫鈣劑中，每日更換新鮮液，直至組織軟化為止除酸流水沖洗24小時脫水、浸蠟、切片進(jìn)行常規(guī)脫水、透明、浸蠟、切片南京英瀚斯，專業(yè)的病理染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)平臺。

HE染色是目前國內(nèi)外病理診斷上***采用的常規(guī)染色方法。切片質(zhì)量的好壞，可直接影響疾病診斷的及時與準(zhǔn)確性。因此，能制作出一張高質(zhì)量的HE染色切片，是必須掌握的技術(shù)之一。送檢樣本經(jīng)4%多聚甲醛固定，固定狀態(tài)良好后，嚴(yán)格按照本單位病理實(shí)驗(yàn)檢測SOP程序進(jìn)行修剪、脫水、包埋、切片、染色、封片***鏡檢合格的樣片。在顯微鏡下瀏覽切片或?yàn)g覽數(shù)字切片，在不同倍數(shù)下詳細(xì)觀察組織切片情況，對切片中基本病理改變?nèi)绯溲?、淤血、出血、水腫、變性、壞死、增生、纖維化、機(jī)化、肉芽組織、炎性變化等情況文字描述，并反映出片子之間的差異。對典型病變部位成像并在word文檔中用箭頭標(biāo)識。HE染色取材、染色以及分析方法介紹。

HE染色注意事項(xiàng)：1．組織切片的脫蠟步驟應(yīng)徹底，否則無論進(jìn)行那種染色都會發(fā)生困難。脫蠟時間要充分，若溶蠟劑使用過久應(yīng)及時更換以免效率降低，若室溫過低，可將溶蠟劑置于溫箱中進(jìn)行脫蠟。  2．蘇木素染液使用一段時間后表面易出現(xiàn)亮晶狀飄浮物，這可能是液體表面的過氧化物，必須過濾除去，以防沉渣污染組織切片。蘇木素液一般染過三、四百張切片后，著色力會減弱，著色不鮮艷，呈灰藍(lán)色時應(yīng)及時更換新液。  3．染色的時間長短需依據(jù)：染劑對組織的染色作用，室溫條件，切片厚薄，固定液的類別，染液的新舊而進(jìn)行調(diào)節(jié)。所以在染色時必須使用顯微鏡觀察染色程度以利掌握時間。  4．分化十分重要。分化步驟的準(zhǔn)確也是染色成敗的關(guān)鍵，若分化失當(dāng)則必然引起染色不勻或過淡，過深等現(xiàn)象，因此分化后一定要鏡檢，觀察胞核是否清晰，胞漿呈淡白色。否則需再次分化，不然一旦復(fù)染后，組織會呈紫藍(lán)色即“藍(lán)蓋紅”現(xiàn)象。  5．還原液不宜過濃，若堿性太強(qiáng)易使組織脫落故以淡為宜。  6．伊紅宜淡染，復(fù)染過深胞核會不清晰，影響鏡檢。 石蠟組織切片的HE染色。上海比較好的HE染色報告

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HE染色注意事項(xiàng)：1、染色時調(diào)節(jié)pH值很重要。如果組織塊在福爾馬林中固定時間長，組織酸化而影響細(xì)胞核著色。因此，要在自來水中沖洗時間長一些或在飽和碳酸鋰水溶液中處理10-30min，這樣可以使細(xì)胞核著色較深。染伊紅時胞漿著色不佳，可在伊紅溶液中滴加1-2滴冰醋酸。2、切片染蘇木精后，分色這一步是關(guān)鍵，應(yīng)在顯微鏡下控制進(jìn)行，一般以細(xì)胞核染色清楚（晰）而細(xì)胞質(zhì)基本無色為佳。如果過分延長分色時間將導(dǎo)致染色太淺，應(yīng)重新染色后再行分色。3、切片經(jīng)酒精脫水后，入二甲苯時可出現(xiàn)白色不透明狀態(tài)，此為脫水不徹底，應(yīng)將切片退回?zé)o水酒精，更換酒精、二甲苯，以求徹底脫水與透明。4、在染色過程中不要讓切片干燥，以免切片收縮、變形，影響神經(jīng)元形態(tài)。5、切片從二甲苯取出或進(jìn)入二甲苯前，切片周邊均應(yīng)擦干凈或吸干多余水分。6、***封固時，要用中性樹脂，防止日后褪色，蓋片要選大于組織塊的面積，如漏出一部分不久將會褪色，所用樹脂濃度要適當(dāng)，樹脂封固時不能有氣泡。湖南比較好的HE染色