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青??孔V的HE染色報(bào)告

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2024-06-26

HE染色:在組織病理學(xué)中,蘇木素-伊紅染色是一種日常使用比較普遍的常規(guī)染色方法。常規(guī)蘇木素染色的對(duì)比染色是用伊紅,也有采用焰紅,因?yàn)檠婕t比伊紅色澤更鮮明,還有采用橘黃G,比布里希猩紅,波爾多紅等作為對(duì)比染色。伊紅是比較常用的胞質(zhì)染料,本身溶于醇而不溶于水,為磚紅色粉末狀或醬紅色結(jié)晶。配方:伊紅Y(水溶)0.5-1g,蒸餾水99ml。如果取用伊紅Y(醇溶性)應(yīng)當(dāng)溶于99ml 75%或95%的乙醇中。如果在伊紅液中加入0.5ml冰醋酸,可以加速其染色過(guò)程,使得胞質(zhì)的色澤更加艷麗。結(jié)果是細(xì)胞核呈藍(lán)色,胞質(zhì)、肌肉、結(jié)締組織、紅細(xì)胞和嗜伊紅顆粒呈不同程度的紅色。鈣鹽和各種微生物也可染成藍(lán)色或紫藍(lán)色。比較常見(jiàn)的病理染色HE染色?青??孔V的HE染色報(bào)告

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HE染色顯微鏡下見(jiàn)切片內(nèi)有大量水珠分析以及應(yīng)對(duì)原因:切片經(jīng)梯度乙醇處理后沒(méi)有完全脫水,導(dǎo)致二甲苯透明中性樹(shù)膠封固后殘留大量水分。對(duì)策:移去蓋玻片,用二甲苯溶解封固劑如中性樹(shù)膠。將切片置入新鮮的無(wú)水乙醇中,待切片重新脫水完全后,用新二甲苯透明,中性樹(shù)膠封固。所有用于脫水和透明的液體,在使用一定時(shí)間以后,應(yīng)即時(shí)更換。光鏡下切片某些區(qū)域難以聚焦分析以及應(yīng)對(duì)原因:蓋玻片上可能有封固切片的封固劑。對(duì)策:移去蓋玻片,重新用干凈的蓋玻片封片上海性價(jià)比高的HE染色哪家好常用HE染色試劑配制方法。

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HE染色常見(jiàn)問(wèn)題:成片的染色模糊不清,灰染答:(1)組織未及時(shí)固定,部分自溶;或固定不佳,深部組織未處理到。這種只能重新固定了。(2)盡管乙醇也是一種固定液,但盡量少用或不用,因?yàn)槠鋾?huì)導(dǎo)致組織發(fā)硬變脆,染色效果不好。(3)包埋時(shí)蠟的溫度過(guò)高,或切片后烤片時(shí)間和溫度過(guò)久過(guò)高都不好,可能會(huì)導(dǎo)致無(wú)法染色。(4)脫蠟不徹底;染料有問(wèn)題;分化過(guò)度導(dǎo)致的顏色變淡,鏡下組織界限不清;染完后的脫水和透明不佳,水霧殘留在組織上。(5)通風(fēng)窗中(防止空氣中的水霧),戴口罩操作封片(減少哈氣帶來(lái)的水霧)。

HE染色骨組織的處理方式:組織里存有鈣鹽可妨礙用常規(guī)方法制作良好切片。骨組織及鈣化病灶,經(jīng)過(guò)固定后,需要先將鈣鹽除去使組織軟化,才能進(jìn)行常規(guī)切片。如果脫鈣不全,則切片容易撕開(kāi)或碎裂,損傷切片刀刀刃。脫去鈣鹽的過(guò)程,稱為脫鈣。骨組織固定24小時(shí)后,鋸下不超過(guò)0.5cm厚的薄骨片,以4%甲醛溶液固定后,進(jìn)行脫鈣。骨組織過(guò)厚則需延長(zhǎng)脫鈣時(shí)間,但長(zhǎng)時(shí)間浸于強(qiáng)酸會(huì)影響切片染色效果。取材骨組織固定于10%甲醛溶液24小時(shí)后再鋸取厚度約0.5cm骨片固定以10%甲醛溶液固定2天脫鈣將組織置于脫鈣劑中,每日更換新鮮液,直至組織軟化為止除酸流水沖洗24小時(shí)脫水、浸蠟、切片進(jìn)行常規(guī)脫水、透明、浸蠟、切片南京英瀚斯,專(zhuān)業(yè)的病理染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)平臺(tái)。南京英瀚斯,專(zhuān)業(yè)的技術(shù)提供專(zhuān)業(yè)的HE染色服務(wù)。

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HE染色主要是為通細(xì)胞及胞核形態(tài)、大小來(lái)區(qū)別各種細(xì)胞的,并不是直接通過(guò)顏色來(lái)區(qū)分的蘇木精染液為堿性,主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著紫藍(lán)色;伊紅為酸性染料,主要使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分著紅色.炎性細(xì)胞一類(lèi)人體內(nèi)的免疫細(xì)胞,包括中性粒細(xì)胞、嗜酸粒細(xì)胞、單核巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和漿細(xì)胞.淋巴細(xì)胞是**容易和其它幾種細(xì)胞區(qū)分的,細(xì)胞小而圓,核漿比很大,核濃染成深藍(lán)紫色.漿細(xì)胞大小介于淋巴細(xì)胞和巨噬/多核/巨細(xì)胞之間,胞漿略嗜堿,核偏位,核染色深,高倍鏡下可見(jiàn)核呈車(chē)輪狀.多核細(xì)胞和巨細(xì)胞的概念是不是有點(diǎn)重疊,多核細(xì)胞故名思意是有多個(gè)核的大型細(xì)胞,如朗漢氏巨細(xì)胞,常在肺結(jié)核的干酪樣壞死灶周?chē)霈F(xiàn),多個(gè)核排成一圈,異物巨細(xì)胞也是有許多個(gè)核的體積巨大的細(xì)胞,這兩種巨細(xì)胞胞質(zhì)都偏酸.巨噬細(xì)胞似乎在不同的組織中有不同的名稱.HE染色過(guò)程中常見(jiàn)的問(wèn)題以及應(yīng)對(duì)方法。湖南性價(jià)比高的HE染色

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HE染色伊紅溶液中加入少量的冰醋酸(一般小于10%就行),可改變組織等電點(diǎn),促進(jìn)伊紅與胞漿蛋白質(zhì)結(jié)合,其本身不參與染色的反應(yīng)。當(dāng)蘇木素染色效能極高,很短時(shí)間就導(dǎo)致核漿共染時(shí),可適當(dāng)?shù)靥砑颖姿?一般不超過(guò)2%),抑制蘇木素染色效能,方便控制染色時(shí)間,同時(shí)也能提高蘇木素染色的清晰度。現(xiàn)在有商用的HE染色液賣(mài),但是質(zhì)量參差不齊。如果課題組較大,完全可以自己配制,效果也挺好。配制為乙酸濃度5%-7.5%和鹽酸濃度為0.5%-1%的蘇木素溶液放置一周,即可完全成熟,染色效果好,氧化膜和結(jié)晶都很少(一般蘇木素中酸度越低越容易產(chǎn)生氧化膜和結(jié)晶,這也是提示更換蘇木素的標(biāo)志之一)。青海靠譜的HE染色報(bào)告