HE染色脫蠟不凈的原因及驗證方法：1)二甲苯使用過久，含蠟成分太高或脫蠟效果差：可更換二甲苯驗證。2)切片經(jīng)烤片，冷卻后放入二甲苯脫蠟或室溫太低；延長拖拉時間或用熱的切片脫蠟驗證。3)脫蠟時間太短或振蕩太少，幅度太??；可延長脫蠟時間或以多振蕩來驗證。4)洗滌二甲苯用的乙醇使用時間過久，導(dǎo)致乙醇中二甲苯含量過高，二甲苯殘留在切片上（由于二甲苯與水不相溶，切片上有二甲苯的地方，蘇木精就沒有辦法滲透進(jìn)去，在切片染色完成后留下了點(diǎn)狀的不著**域）：更換各道乙醇驗證。5)二甲苯、乙醇質(zhì)量不佳（偶有試劑瓶內(nèi)裝的試劑與試劑名不相符）：換批號驗證。6)更換脫蠟液體時試劑拿錯：需重新配置驗證。7)更換脫蠟液體時試劑次序放錯：需重新配置驗證。8)烤片時間短，切片上水分沒有烤干，也會導(dǎo)致著色不勻，出現(xiàn)點(diǎn)狀發(fā)白區(qū)域。HE染色結(jié)果如何分析和讀片？河南靠譜的HE染色公司

HE染色全名為蘇木精和伊紅染色方法，是**基本的病理學(xué)染色技術(shù)。由于組織或細(xì)胞的不同成分對蘇木精的親和力不同及染色性質(zhì)不一樣。經(jīng)蘇木精染色后，細(xì)胞核及鈣鹽粘液等呈藍(lán)色，可用鹽酸酒精分化和弱堿性溶液顯藍(lán)，如處理適宜，可使細(xì)胞核著清楚的深藍(lán)色，胞漿等其它成分脫色。再利用胞漿染料伊紅染胞漿，使胞漿的各種不同成分又呈現(xiàn)出深淺不同的粉紅色。故各種組織或細(xì)胞成分與病變的一般形態(tài)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)均可顯示出來。質(zhì)量好的HE具備條件1.細(xì)胞核與細(xì)胞漿藍(lán)紅相映，鮮艷亮麗；2.胞核鮮明、核膜、核染色質(zhì)顆粒均清晰可見；3.組織或一般結(jié)構(gòu)特點(diǎn)及假物質(zhì)成分均能顯示出來。江蘇質(zhì)量好的HE染色公司關(guān)于HE染色，你不知道的實驗技巧。

HE染色實驗步驟：（1）樣品制備：對于貼壁生長細(xì)胞，胰酶消化，調(diào)整細(xì)胞濃度約1×105/ml，滴加于蓋玻片上(置于6孔板中)，培養(yǎng)相應(yīng)時間后，取出細(xì)胞爬片，用PBS洗滌3次。（2）樣品固定：95%乙醇固定20min，PBS洗滌2次，每次1min。（3）染核：蘇木素染液染色2-3min，自來水洗滌。（4）分色：鏡下觀察，若細(xì)胞核染色過深，用1%鹽酸酒精溶液分色數(shù)秒，自來水洗滌。（5）染胞質(zhì)：浸入伊紅染液染色1min，自來水洗滌。（6）吹干或自然晾干細(xì)胞爬片后，中性樹膠封片。若細(xì)胞用4%多聚甲醛固定，則染色時間相應(yīng)延長，蘇木素染色12-15min，伊紅5min即可

HE染色切片中出現(xiàn)類似色素樣的點(diǎn)狀結(jié)晶和黑色光滑的細(xì)胞核原因：切片封片前放置在空氣中時間太長，以至于二甲苯揮發(fā)切片干燥所致。對策：移去組織切片上的蓋玻片和封固劑，重新處理。將切片水洗數(shù)分鐘，然后重新脫水、透明、封固。封片過程中要保持組織切片的輕度濕潤，盡量不要讓其干燥。細(xì)胞核呈紅、棕色改變原因：蘇木精染色液過度氧化和切片在蘇木精染液染色后返藍(lán)不足。對策：首先，每次染色之前檢查蘇木精染色液的染色能力，發(fā)現(xiàn)氧化過度應(yīng)及時更換。其次，可用流水、溫水或弱堿性溶液如稀氨水、0.2%碳酸氫鈉等，在蘇木精染色后，給切片以足夠的藍(lán)化時間。HE染色 ,石蠟切片技術(shù)里常用的染色法之一。

HE染色常見問題：Q3：細(xì)胞核染色過淺，顏色暗淡答：切片在蘇木素染液中停留過短，或蘇木素過度氧化失效，或分化時間太長。對策：重新染色。將組織切片放入0.01%氫氧化鈉、0.5%氨水、飽和的碳酸氫鈉溶液、乙醇溶液，每個3-5min即可，接著重新染色?？梢赃m當(dāng)?shù)亟M織的嗜堿性以增強(qiáng)核染色，如Zenker液固定的切片可放入5%碳酸氫鈉溶液中3h，自來水沖洗5-10min染色，或Bouin液固定的切片可放入5%碳酸氫鈉溶液中1h，自來水沖洗10min染色。Q4：細(xì)胞核染色過深，胞漿著藍(lán)色答：切片在蘇木素染液中停留過長；或切片太厚；或分化時間太短。這種情況首先鏡下看看切片厚度(比較好厚度1-2層細(xì)胞核)，要么重新染色，要么重新制片。南京英瀚斯，專業(yè)的病理染色實驗服務(wù)平臺。HE染色，一站式實驗外包服務(wù)平臺。海南HE染色

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HE染色常見問題：Q5：細(xì)胞核呈棕紅色改變答：蘇木素染液過度氧化；或蘇木素染色后反藍(lán)不足導(dǎo)致。應(yīng)該立即更換蘇木素染色液?；蛟诹鲃幼詠硭?一般自來水PH7.5-7.8)，或在稀釋的氨水溶液，或在0.2%碳酸氫鈉中適當(dāng)浸泡，這些步驟均可一定程度地加強(qiáng)蘇木素染色后的反藍(lán)效果。Q6：伊紅染色較淡答：伊紅的PH改變了(PH可能已大于5)；或反藍(lán)液體未漂洗干凈，殘留后影響胞漿嗜酸性染色；或者切片太薄并且在隨后的脫水步驟停留過久。對策：檢查伊紅染色液PH，可采用乙酸調(diào)至4.6-5.0。根據(jù)以上提示，調(diào)整實驗步驟。河南靠譜的HE染色公司