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HE染色細(xì)胞核灰藍(lán)原因:(1)組織處理溫度過(guò)高、過(guò)熱,在石蠟停留的時(shí)間過(guò)長(zhǎng);(2)固定時(shí)間太短,接下來(lái)就直接在高濃度的乙醇中行脫水處理。對(duì)策:理論上來(lái)說(shuō),加熱處理*在組織浸蠟步驟才使用,組織不能在熱的蠟液中停留過(guò)長(zhǎng)時(shí)間。如果由于某些原因不能進(jìn)行下步包埋處理,完成浸蠟處理后的組織,可將組織連同塑料包埋盒一并放置在室溫空氣中,冷卻凝固,以備包埋。待需要包埋時(shí)再重新加溫直至石蠟融化即可。組織在處理前必須確保固定良好,脫水比較好能從低濃度的乙醇開(kāi)始。HE染色,南京英瀚斯,專業(yè)的實(shí)驗(yàn)外包公司。湖南值得信賴的HE染色服務(wù)
HE染色常見(jiàn)問(wèn)題:Q5:細(xì)胞核呈棕紅色改變答:蘇木素染液過(guò)度氧化;或蘇木素染色后反藍(lán)不足導(dǎo)致。應(yīng)該立即更換蘇木素染色液。或在流動(dòng)自來(lái)水(一般自來(lái)水PH7.5-7.8),或在稀釋的氨水溶液,或在0.2%碳酸氫鈉中適當(dāng)浸泡,這些步驟均可一定程度地加強(qiáng)蘇木素染色后的反藍(lán)效果。Q6:伊紅染色較淡答:伊紅的PH改變了(PH可能已大于5);或反藍(lán)液體未漂洗干凈,殘留后影響胞漿嗜酸性染色;或者切片太薄并且在隨后的脫水步驟停留過(guò)久。對(duì)策:檢查伊紅染色液PH,可采用乙酸調(diào)至4.6-5.0。根據(jù)以上提示,調(diào)整實(shí)驗(yàn)步驟。海南結(jié)果客觀的HE染色哪家好HE染色觀察細(xì)胞形態(tài)變化。
HE染色切片中出現(xiàn)類似色素樣的點(diǎn)狀結(jié)晶和黑色光滑的細(xì)胞核原因:切片封片前放置在空氣中時(shí)間太長(zhǎng),以至于二甲苯揮發(fā)切片干燥所致。對(duì)策:移去組織切片上的蓋玻片和封固劑,重新處理。將切片水洗數(shù)分鐘,然后重新脫水、透明、封固。封片過(guò)程中要保持組織切片的輕度濕潤(rùn),盡量不要讓其干燥。細(xì)胞核呈紅、棕色改變?cè)颍禾K木精染色液過(guò)度氧化和切片在蘇木精染液染色后返藍(lán)不足。對(duì)策:首先,每次染色之前檢查蘇木精染色液的染色能力,發(fā)現(xiàn)氧化過(guò)度應(yīng)及時(shí)更換。其次,可用流水、溫水或弱堿性溶液如稀氨水、0.2%碳酸氫鈉等,在蘇木精染色后,給切片以足夠的藍(lán)化時(shí)間。
HE染色樣本組織固定與切片:首先將組織樣本進(jìn)行常規(guī)的石蠟包埋。在模具中加入液態(tài)石蠟,將待包埋的組織樣本放入石蠟中,確保組織位置規(guī)整。補(bǔ)充少許液態(tài)的石蠟后,進(jìn)行降溫冷凍,使石蠟變?yōu)楣虘B(tài)達(dá)到組織固定的效果,然后使用石蠟切片機(jī)進(jìn)行切片,厚度在4-8um左右。將切完后的組織切片放入載玻片上使用40℃溫水浸泡使組織充分伸展。組織樣本脫蠟:將待測(cè)組織樣本切片放于二甲苯中,充分浸泡10min,浸泡完后更換二甲苯繼續(xù)浸泡10min,目的是使用二甲苯將切片中的石蠟溶解,這樣可以在進(jìn)行染液染色的時(shí)候,染液可以充分進(jìn)入組織種,同時(shí),二甲苯還可以起到透明的作用,使切片更容易觀察。HE染色,一站式實(shí)驗(yàn)外包服務(wù)平臺(tái)。
HE染色主要是為通細(xì)胞及胞核形態(tài)、大小來(lái)區(qū)別各種細(xì)胞的,并不是直接通過(guò)顏色來(lái)區(qū)分的蘇木精染液為堿性,主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著紫藍(lán)色;伊紅為酸性染料,主要使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分著紅色.炎性細(xì)胞一類人體內(nèi)的免疫細(xì)胞,包括中性粒細(xì)胞、嗜酸粒細(xì)胞、單核巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和漿細(xì)胞.淋巴細(xì)胞是**容易和其它幾種細(xì)胞區(qū)分的,細(xì)胞小而圓,核漿比很大,核濃染成深藍(lán)紫色.漿細(xì)胞大小介于淋巴細(xì)胞和巨噬/多核/巨細(xì)胞之間,胞漿略嗜堿,核偏位,核染色深,高倍鏡下可見(jiàn)核呈車輪狀.多核細(xì)胞和巨細(xì)胞的概念是不是有點(diǎn)重疊,多核細(xì)胞故名思意是有多個(gè)核的大型細(xì)胞,如朗漢氏巨細(xì)胞,常在肺結(jié)核的干酪樣壞死灶周圍出現(xiàn),多個(gè)核排成一圈,異物巨細(xì)胞也是有許多個(gè)核的體積巨大的細(xì)胞,這兩種巨細(xì)胞胞質(zhì)都偏酸.巨噬細(xì)胞似乎在不同的組織中有不同的名稱.冰凍組織切片的HE染色。海南結(jié)果客觀的HE染色哪家好
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HE染色骨組織的處理方式:組織里存有鈣鹽可妨礙用常規(guī)方法制作良好切片。骨組織及鈣化病灶,經(jīng)過(guò)固定后,需要先將鈣鹽除去使組織軟化,才能進(jìn)行常規(guī)切片。如果脫鈣不全,則切片容易撕開(kāi)或碎裂,損傷切片刀刀刃。脫去鈣鹽的過(guò)程,稱為脫鈣。骨組織固定24小時(shí)后,鋸下不超過(guò)0.5cm厚的薄骨片,以4%甲醛溶液固定后,進(jìn)行脫鈣。骨組織過(guò)厚則需延長(zhǎng)脫鈣時(shí)間,但長(zhǎng)時(shí)間浸于強(qiáng)酸會(huì)影響切片染色效果。取材骨組織固定于10%甲醛溶液24小時(shí)后再鋸取厚度約0.5cm骨片固定以10%甲醛溶液固定2天脫鈣將組織置于脫鈣劑中,每日更換新鮮液,直至組織軟化為止除酸流水沖洗24小時(shí)脫水、浸蠟、切片進(jìn)行常規(guī)脫水、透明、浸蠟、切片南京英瀚斯,專業(yè)的病理染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)平臺(tái)。湖南值得信賴的HE染色服務(wù)