HE染色常見問題:成片的染色模糊不清,灰染答:(1)組織未及時固定,部分自溶;或固定不佳,深部組織未處理到。這種只能重新固定了。(2)盡管乙醇也是一種固定液,但盡量少用或不用,因為其會導致組織發(fā)硬變脆,染色效果不好。(3)包埋時蠟的溫度過高,或切片后烤片時間和溫度過久過高都不好,可能會導致無法染色。(4)脫蠟不徹底;染料有問題;分化過度導致的顏色變淡,鏡下組織界限不清;染完后的脫水和透明不佳,水霧殘留在組織上。(5)通風窗中(防止空氣中的水霧),戴口罩操作封片(減少哈氣帶來的水霧)。HE染色技術幾種常見的染色問題。湖南病理HE染色價格
HE染色顯微鏡下見切片內有大量水珠分析以及應對原因:切片經梯度乙醇處理后沒有完全脫水,導致二甲苯透明中性樹膠封固后殘留大量水分。對策:移去蓋玻片,用二甲苯溶解封固劑如中性樹膠。將切片置入新鮮的無水乙醇中,待切片重新脫水完全后,用新二甲苯透明,中性樹膠封固。所有用于脫水和透明的液體,在使用一定時間以后,應即時更換。光鏡下切片某些區(qū)域難以聚焦分析以及應對原因:蓋玻片上可能有封固切片的封固劑。對策:移去蓋玻片,重新用干凈的蓋玻片封片浙江性價比高的HE染色HE染色需要哪些材料及實驗步驟。
HE染色知識點1:對送檢組織標本的要求送檢組織標本在手術切除或活檢后應當立即放入4%中性緩沖甲醛溶液中固定。尸檢標本應當盡量在死亡后盡早取材固定。送檢組織需要全部取材的,應當在送檢單上注明,有特殊要求(如細菌培養(yǎng)、解釋道化學分析等)應當事先聯(lián)系,并且在標本未固定前進行處理。知識點2:組織取材要求在對送檢組織標本進行詳細檢查的基礎上,根據診斷的需要,確定取材的部位和塊數。切取的組織應當按照不同的部位分別給予不同的編號或標記,以便鏡檢時核對。另外,盡可能在取材前對有意義的標本的表面及剖面鏡下攝影,并編號存檔南京英瀚斯,專業(yè)的病理染色實驗服務平臺。
HE染色組織樣本水化:將浸泡過二甲苯的待測組織樣本先放入無水乙醇中浸泡5min,使脫蠟時用的二甲苯可以被洗脫出去,使水可以進入組織中;再依次置于95%、85%、70%乙醇中各浸泡5min以達到充分水化的效果。組織切片蘇木素染色、分化與反藍:將水化后的組織樣本的切片使用PBS溶液浸泡清洗,每次浸泡5min,總共清洗3次。之后用移液***吸取已經預先配制好的蘇木素染色液,每個組織切片滴加100ul,充分染色10min。染色完畢后使用蒸餾水洗去多余的蘇木素染色液。然后再使用1%的鹽酸乙醇進行分化,使細胞核中結合過多的染液和細胞漿中的多余的染液被除去。分化完成后,再用雙蒸水將組織切片沖洗干凈。為了使蘇木素染藍色,使用弱堿性的促藍液加入組織切片中,讓細胞核染藍色。反藍結束后先用清水進行清洗,再用雙蒸水將組織切片沖洗干凈。比較常見的病理染色HE染色?
HE染色是蘇木精 — 伊紅染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ,簡稱HE染色法 ,石蠟切片技術里常用的染色法之一 。蘇木精染液為堿性 ,主要使細胞核內的染色質與胞質內的核酸著紫藍色 ;伊紅為酸性染料 ,主要使細胞質和細胞外基質中的成分著紅色 。HE染色法是組織學、胚胎學、病理學教學與科研中**基本、使用*****的技術方法。由于組織或細胞的不同成分對蘇木精的親和力不同及染色性質不一樣。經蘇木精染色后,細胞核及鈣鹽粘液等呈藍色,可用鹽酸酒精分化和弱堿性溶液顯藍,如處理適宜,可使細胞核著清楚的深藍色,胞漿等其它成分脫色。再利用胞漿染料伊紅染胞漿,使胞漿的各種不同成分又呈現(xiàn)出深淺不同的粉紅色。故各種組織或細胞成分與病變的一般形態(tài)結構特點均可顯示出來。常規(guī)HE染色和特殊染色服務。浙江性價比高的HE染色
HE染色切片知識以及如何做出漂亮的切片。湖南病理HE染色價格
HE染色伊紅著色淡分析及應對原因:(1)伊紅染液的pH值可能大于5;(2)藍化液殘留過多;(3)切片太??;(4)切片經伊紅染色后在乙醇脫水時間過長。對策:檢查伊紅染液的pH值,如果必要的話,用乙酸將其調節(jié)在4~5之間,從而使伊紅染色彩艷麗。確保每次藍化步驟完成后,使用的弱堿性溶液被充分洗去,玻片上沒有殘留的弱堿性溶液。檢查切片的厚度。脫水時不要讓切片在低濃度乙醇停留時間過長,因為含水多的低濃度乙醇會將伊紅的顏色分化掉。湖南病理HE染色價格