外泌體為細(xì)胞療法中的不同合成分子和生物分子的遞送提供了廣闊的前景和嶄新的診療領(lǐng)域。外泌體還顯示出了在診療各種疾?。ㄈ缧募〔『蜕窠?jīng)?。┓矫娴臐摿?。但是,在實際應(yīng)用外泌體之前,需要使用大型動物模型進(jìn)行進(jìn)一步研究和臨床試驗。同時需要開發(fā)大規(guī)模生產(chǎn)質(zhì)量可控的外泌體并快速純化外泌體的技術(shù)和策略。另外,在研究和評估外泌體的副作用和功效時,必須考慮到肉瘤細(xì)胞來源的外泌體可能增強肉瘤生長的潛在風(fēng)險。外泌體給藥途徑:給藥途徑是獲得所需功效的重要參數(shù)。外泌體可以通過多種方法給藥,但是,靜脈內(nèi)給藥是較常用的途徑。通過利用增強通透性和保留(EPR)效應(yīng),在荷瘤動物中靜脈內(nèi)遞送外來體似乎是有用的。在某些容易達(dá)到肉瘤部位的不同惡性肉瘤中,外泌體療法的給藥途徑是瘤內(nèi)注射。在疾病部位直接注射外泌體的優(yōu)點是可以特異性地運送裝載的藥物。另外口服給藥,腹腔給藥,皮內(nèi)給藥和鼻內(nèi)給藥途徑已成功用于外泌體遞送。在免疫系統(tǒng)中,據(jù)報道趨化因子受體CCR5通過外泌體在細(xì)胞之間轉(zhuǎn)移是細(xì)胞人類免疫缺陷病毒傳染的一種機制。細(xì)菌外泌體提取試劑盒成分
外泌體攜帶大量特異性的蛋白質(zhì)(如細(xì)胞因子、生長因子)以及功能性的mRNAs、miRNAs等生物活性物質(zhì),在體內(nèi)參與細(xì)胞通訊、細(xì)胞遷移、促血管新生和抗瘤子免疫等生理過程,與多種疾病的發(fā)生和進(jìn)程密切相關(guān)。由于外泌體的特殊結(jié)構(gòu)和功能,使得它具有潛在的應(yīng)用價值,一方面可以作為診斷多種疾病的生物指標(biāo),另一方面也可以作為診療手段,未來有可能作為藥物的天然載體用于臨床診療。外泌體研究,應(yīng)選用血漿還是血清?答:血清是血液凝固之后收集的液體,所以其中少了纖維蛋白原,凝血因子,以及多了比較多凝血產(chǎn)物。纖維蛋白原可轉(zhuǎn)化為纖維蛋白,具有凝血功能。在凝血過程中血小板會分泌大量的外泌體,有研究發(fā)現(xiàn)血清中有接近50%的外泌體來自額外的分泌。唾液提取試劑盒方法外泌體鑒定方法從物理特征到表面分子標(biāo)志物,多角度進(jìn)行鑒定。
外泌體中常見的細(xì)胞質(zhì)蛋白是Rabs蛋白,是鳥苷酸三磷酸酶家族的一種。它可以調(diào)節(jié)外泌體膜與受體細(xì)胞的融合,有文獻(xiàn)報道稱RAB4,RAB5和RAB11主要出現(xiàn)在早期以及回收的核內(nèi)體中,RAB7和RAB9主要出現(xiàn)在晚期的核內(nèi)體?,F(xiàn)有大量的研究發(fā)現(xiàn)外泌體中含有40種RAB蛋白。除了RAB蛋白,外泌體中富含具有外泌體膜交換以及融合作用的膜聯(lián)蛋白(包括膜聯(lián)蛋白1、2、4、5、6、7、11等)。外泌體膜上富含參與外泌體運輸?shù)乃目缒さ鞍准易澹–D63,CD81和CD9))、熱休克蛋白家族((HSP60,HSP70,HSPA5,CCT2和HSP90以及一些細(xì)胞特異性的蛋白包括A33(結(jié)腸上皮細(xì)胞來源)、MHC-Ⅱ(抗原提呈細(xì)胞來源)、CD86(抗原提呈細(xì)胞來源)以及乳凝集素(不成熟的樹突狀細(xì)胞)。
外泌體較有用的特性之一是它們穿過屏障(如細(xì)胞質(zhì)膜和血/腦屏障)的能力。這使它們成為理想的診療傳遞分子。外泌體由于其天然的材料運輸特性,固有的長期循環(huán)能力和出色的生物相容性而具有比較大的潛力成為藥物遞送載體,其適合于遞送各種化學(xué)物質(zhì),蛋白質(zhì),核酸和基因診療劑。(1)外泌體作為小分子的藥物傳遞載體:關(guān)于外泌體遞送姜黃素,多巴胺,PTX和DOX等化學(xué)診療藥物的報道已有充分文獻(xiàn)記載。(2)外泌體作為蛋白質(zhì)的藥物遞送載體:已經(jīng)發(fā)現(xiàn)外泌體可遞送多種蛋白質(zhì),例如酶,細(xì)胞骨架蛋白質(zhì)和跨膜蛋白質(zhì)。(3)外泌體作為核酸的藥物遞送載體:研究表明,外泌體天然的可以攜帶遺傳(例如miRNA,siRNA)到靶細(xì)胞中,從而在生物學(xué)和致病過程中誘導(dǎo)遺傳修飾。外泌體的這些特征已成為涉及遺傳療法和使用外泌體進(jìn)行研究的主要策略。外泌體可以作為“天然的納米粒子”來進(jìn)行藥物遞送。
外泌體的提取主要包括以下幾種方式。一是超速離心法,這是目前外泌體提取較常用的方法。此種方法得到的外泌體量多,但是純度不足,電鏡鑒定時發(fā)現(xiàn)外泌體聚集成塊,由于微泡和外泌體沒有非常統(tǒng)一的鑒定標(biāo)準(zhǔn),也有一些研究認(rèn)為此種方法得到的是微泡不是外泌體。二是過濾離心,這種操作簡單、省時,不影響外泌體的生物活性,但同樣存在純度不足的問題。三是密度梯度離心法,用此種方法分離到的外泌體純度高,但是前期準(zhǔn)備工作繁雜,耗時,量少。膜受體的識別是外泌體細(xì)胞反應(yīng)的基礎(chǔ),它可能活躍受體并隨后導(dǎo)致相關(guān)信號通路的活躍。外泌體屬于胞外囊泡類,除了外泌體之外細(xì)胞還分泌微泡以及其它的膜囊泡。何謂外泌體
外泌體具有異質(zhì)性,即使是同一種細(xì)胞分泌的外泌體都有可能具有比較大功能區(qū)別。細(xì)菌外泌體提取試劑盒成分
外泌體病毒傳染:外泌體可以限制或促進(jìn)病毒傳染。如IFNα或APOBEC3G等外泌體載體可通過限制病毒復(fù)制或增強抗病毒免疫來阻止傳染。病毒也可以劫持外泌體的生物發(fā)生機制來促進(jìn)病毒的傳播。外泌體可以作為一個假包膜,通過四聚體蛋白(CD81,CD9)和PtSer相互作用增強病毒進(jìn)入受體細(xì)胞,并幫助逃避抗病毒免疫。病毒組分(蛋白質(zhì)和miRNA)的共轉(zhuǎn)運也可能增強傳染性。外泌體介導(dǎo)的病毒轉(zhuǎn)移可能參與了病毒的遺傳協(xié)同和多重傳染.(CMV,巨細(xì)胞病毒;HSV-1,1型皰疹病毒)。細(xì)菌外泌體提取試劑盒成分
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