細胞外小泡通過充當(dāng)脂肪組織、肝臟、骨骼肌和免疫細胞之間的細胞間通訊方式，在肥胖及其代謝并發(fā)癥的發(fā)展中發(fā)揮作用。外泌體可能在外周胰島素敏感性的調(diào)節(jié)中起作用，外周胰島素敏感性是T2D發(fā)病機理的主要組成部分。外泌體似乎通過至少兩種不同的機制來調(diào)節(jié)胰島素敏感性，即通過調(diào)節(jié)炎癥或通過與胰島素反應(yīng)性部位的直接相互作用。后者可通過與主要胰島素信號分子（例如磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/Akt信號通路）相互作用而影響胰島素信號通路而直接或間接發(fā)生。與對照組相比，糖尿病患者的血漿EV含量更高，并且與對照組相比，糖尿病小鼠的血漿外泌體數(shù)量也更高。然而，確定外泌體的作用及其在肝/腸軸通訊中的潛在作用將需要對它們的組成有更好的了解，特別是飲食是否會改變腸源性外泌體的含量，因此就胰島素反應(yīng)而言它們的生物學(xué)功能尚未研究。外泌體其特指直徑在40-100nm的盤狀囊泡。成都外泌體融合實驗

外泌體的提取主要包括以下幾種方式：1、免疫磁珠法，這種方法可以保證外泌體形態(tài)的完整，特異性高、操作簡單、不需要昂貴的儀器設(shè)備，但是非中性pH和非生理性鹽濃度會影響外泌體生物活性，不便進行下一步的實驗。2、PS親和法，該方法將PS（磷脂酰絲氨酸）與磁珠結(jié)合，利用親和原理捕獲外泌體囊泡外的PS。該方法與免疫磁珠法相似，獲得的外泌體形態(tài)完整，純度較高。由于不使用變性劑，不影響外泌體的生物活性，外泌體可用于細胞共培養(yǎng)和體內(nèi)注射。3、色譜法，這種方法分離到的外泌體在電鏡下大小均一，但是需要特殊的設(shè)備，應(yīng)用不普遍。外泌體作為核酸的藥物遞送載體。細胞提取試劑盒分類外泌體的大?。和饷隗w的直徑約30-150nm。

內(nèi)化的外泌體和內(nèi)源性產(chǎn)生的外泌體的細胞旅程：外泌體可以通過不同的機制直接進入細胞。外泌體由細胞通過內(nèi)吞作用過程從頭生成。外泌體不斷地被細胞產(chǎn)生和吸收。它們可能是新生成的外泌體和消耗的外泌體的混合物。目前尚不清楚內(nèi)生性產(chǎn)生或消耗的外泌體是一起釋放還是單獨釋放。被吸收的外泌體會被溶酶體降解。進入細胞的外泌體可能進入或與已存在的ESEs融合，隨后解體并將其內(nèi)容物釋放到細胞質(zhì)中。另外，內(nèi)泌體可以與質(zhì)膜融合并在細胞外釋放外泌體。

肉瘤細胞可以通過產(chǎn)生異常的抗肉瘤或肉瘤免疫應(yīng)答并促進瘤子細胞的活動而大量產(chǎn)生外泌體，這些外泌體富含促病的細胞成分，例如PD-L1、mRNA和micro-RNA等免疫阻止蛋白，參與病癥的發(fā)展、轉(zhuǎn)移和耐藥性。值得注意的是，肉瘤分泌的外泌體表面和外泌體顆粒中均存在的PD-L1。ESCRT（運輸所需的內(nèi)體分選復(fù)合體）參與將生物分子包裝到外泌體中，nSMase2（中性鞘磷脂酶2）和Rab蛋白調(diào)節(jié)外泌體分泌。已確定ESCRT、Rab27a和nSMase2參與外泌體PD-L1的包裝和分泌。外泌體可以將PD-L1轉(zhuǎn)運至其他PD-L1表達低或沒有PD-L1的細胞，并可能與PD-1結(jié)合。一個推測的作用是外泌體可能從細胞中去除多余和/或不必要的成分以維持細胞內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定。

外泌體遞送藥物的優(yōu)勢：許多新的候選藥物（例如蛋白質(zhì)和核酸）在體內(nèi)環(huán)境中高度不穩(wěn)定，對診療結(jié)果的效果提出了重大挑戰(zhàn)。鑒于與許多當(dāng)前的納米微粒遞送系統(tǒng)相關(guān)的問題，外泌體作為“自然的遞送系統(tǒng)”允許遞送這些生物分子。由于外泌體體積小和其本身就是細胞產(chǎn)物，通過外泌體遞送藥物可以避免巨噬細胞的吞噬作用或降解，還可以在體內(nèi)長時間循環(huán)，保持效果。其中，外泌體能夠穿過血腦屏障以將特定藥物輸送到中樞的神經(jīng)系統(tǒng)是外泌體遞送藥物的一個明顯優(yōu)勢。外泌體膜中有跨膜蛋白PGRL、LAMP1、LAMP2。在免疫系統(tǒng)中，據(jù)報道趨化因子受體CCR5通過外泌體在細胞之間轉(zhuǎn)移是細胞人類免疫缺陷病毒傳染的一種機制。外泌體研究服務(wù)華美

外泌體的數(shù)量：人體中大約有1014個，近乎于平均每個細胞產(chǎn)生1000-10000個。成都外泌體融合實驗

透射電子顯微鏡（TEM）和掃描電子顯微鏡（SEM）是用于評估外泌體形態(tài)、大小和表型的的兩種常見的電子顯微鏡。SEM和TEM均使用電子束產(chǎn)生高分辨率的亞微米顆粒放大圖像，以區(qū)分外泌體與殘留在樣品中相似大小的非外泌體顆粒，該方法還可用于檢查樣品的純度。TEM與SEM之間的區(qū)別在于檢測電子類別，在SEM中，電子與樣品中的粒子相互作用時會發(fā)生散射，捕獲并檢測散射的電子，從而生成粒子圖像。但是，在TEM中，不與粒子相互作用的電子穿過樣品，并使用熒光屏進行檢測。電子顯微鏡下外泌體大小不一，通常呈茶托樣的圓形或橢圓形。采用電子顯微鏡檢測外泌體時對樣品的預(yù)處理和制備要求較高，外泌體的提取方法和品質(zhì)會對電鏡結(jié)果造成影響；另外樣品的準備階段比較復(fù)雜，不適合進行大量快速的測量；而且由于樣本經(jīng)過了干燥、固定以及冷凍等預(yù)處理和制備過程，對生物樣本的結(jié)構(gòu)會造成一定的破壞，從而影響觀察的效果，無法準確測量外泌體濃度。安徽植物外泌體鑒定磁珠免疫法分離的外泌體，生物活性易受pH和鹽濃度影響，不利于下游實驗，難以普遍普及。成都外泌體融合實驗

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