酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）：將其中一種針對外泌體表面抗原的抗體固定在微孔板的表面上，將外泌體樣品暴露于含有固定抗體的孔中，由于抗體-抗原相互作用，表達抗原的外泌體將被捕獲固定在板上。將未捕獲的樣品內(nèi)容物洗掉，并使用另一種抗體檢測固定的外泌體。ELISA已用于從尿液、血漿和血清中分離出外泌體，當使用標準液（已知外泌體的量）創(chuàng)建標準曲線時，甚至可以進行定量。但是，此方法需要通過超速離心或超濾對樣品進行預處理。同樣，流場-流分離與紫外線分析儀和光散射檢測器相結合已被用于分析外泌體的大小和純度。從研究上來講并不太嚴格區(qū)分外泌體或微泡。干細胞外泌體粒徑檢測

外泌體攜帶大量特異性的蛋白質（如細胞因子、生長因子）以及功能性的mRNAs、miRNAs等生物活性物質，在體內(nèi)參與細胞通訊、細胞遷移、促血管新生和抗瘤子免疫等生理過程，與多種疾病的發(fā)生和進程密切相關。由于外泌體的特殊結構和功能，使得它具有潛在的應用價值，一方面可以作為診斷多種疾病的生物指標，另一方面也可以作為診療手段，未來有可能作為藥物的天然載體用于臨床診療。外泌體研究，應選用血漿還是血清？答：血清是血液凝固之后收集的液體，所以其中少了纖維蛋白原，凝血因子，以及多了比較多凝血產(chǎn)物。纖維蛋白原可轉化為纖維蛋白，具有凝血功能。在凝血過程中血小板會分泌大量的外泌體，有研究發(fā)現(xiàn)血清中有接近50%的外泌體來自額外的分泌。納米流式 外泌體超速離心法，這是目前外泌體提取較常用的方法。

酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）：將其中一種針對外泌體表面抗原的抗體固定在微孔板的表面上，將外泌體樣品暴露于含有固定抗體的孔中，由于抗體-抗原相互作用，表達抗原的外泌體將被捕獲固定在板上。將未捕獲的樣品內(nèi)容物洗掉，并使用另一種抗體檢測固定的外泌體。ELISA已用于從尿液、血漿和血清中分離出外泌體，當使用標準液（已知外泌體的量）創(chuàng)建標準曲線時，甚至可以進行定量。但是，此方法需要通過超速離心或超濾對樣品進行預處理。同樣，流場-流分離與紫外線分析儀和光散射檢測器相結合已被用于分析外泌體的大小和純度。外泌體屬于胞外囊泡類，除了外泌體之外細胞還分泌微泡以及其它的膜囊泡。

外泌體的生物發(fā)生和鑒定。液體和細胞外成分，如蛋白質、脂類、代謝物、小分子和離子，可以通過內(nèi)吞作用和質膜內(nèi)陷，與細胞表面蛋白一起進入細胞。由此產(chǎn)生的胞腔側質膜芽的形成表現(xiàn)為質膜的外-內(nèi)取向。這一出芽過程導致芽的形成可能與內(nèi)質網(wǎng)(ER)、跨高爾基網(wǎng)絡(TGN)和線粒體預先形成的早期核內(nèi)體融合。ESEs也可以與ER和TGN融合，這可能解釋了內(nèi)吞物如何到達它們的。因此，一些ESEs可以包含膜和腔的成分，可以表示不同的起源。外泌體表面蛋白包括四聚體蛋白、整合蛋白、免疫調節(jié)蛋白等。外泌體可以包含不同類型的細胞表面蛋白、細胞內(nèi)蛋白、RNA、DNA、氨基酸和代謝物。外泌體的存在：外泌體幾乎存在于所有的組織、細胞間隙、體液中。

外泌體生物學功能：1、在心血管系統(tǒng)中，據(jù)報道，源自人胚胎干細胞（ESC）的間充質干細胞（MSC）外泌體可減少小鼠和豬模型中的心肌缺血和再灌注損傷；2、在免疫系統(tǒng)中，據(jù)報道趨化因子受體CCR5通過外泌體在細胞之間轉移是細胞人類免疫缺陷病毒傳染的一種機制；3、在中樞的神經(jīng)系統(tǒng)（CNS）中，外泌體的作用是消除廢物并介導大腦活動，從而阻止神經(jīng)退行性疾病的發(fā)病機理；迄今為止，尚未完全發(fā)現(xiàn)調節(jié)外泌體-細胞結合的途徑。然而，比較明顯，其結合過程從外泌體識別受體細胞PM上的特定受體開始。膜受體的識別是外泌體細胞反應的基礎，它可能活躍受體并隨后導致相關信號通路的活躍，外泌體與PM融合或外泌體的內(nèi)吞作用，從而導致蛋白質和RNA直接釋放到受體細胞中。外泌體是其中一類小囊泡，直徑為30~150nm，密度1.10~1.18g/ml。湖南CD63外泌體慢病毒包裝

外泌體膜中有膜轉運融合蛋白annexins、RAN、GTPases。干細胞外泌體粒徑檢測

人體內(nèi)多種細胞及體液均可分泌外泌體，包括內(nèi)皮細胞、免疫細胞、血小板、平滑肌細胞等。當其由宿主細胞被分泌到受體細胞中時，外泌體可通過其攜帶的蛋白質、核酸、脂類等來調節(jié)受體細胞的生物學活性。外泌體介導的細胞間通訊主要通過以下三種方式：一是外泌體膜蛋白可以與靶細胞膜蛋白結合，進而活躍靶細胞細胞內(nèi)的信號通路。二是在細胞外基質中，外泌體膜蛋白可以被蛋白酶剪切，剪切的碎片可以作為配體與細胞膜上的受體結合，從而活躍細胞內(nèi)的信號通路。有報道稱一些外泌體膜上蛋白在其來源細胞膜上未能檢測出。三是外泌體膜可以與靶細胞膜直接融合，非選擇性的釋放其所含的蛋白質、mRNA以及microRNA。干細胞外泌體粒徑檢測

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