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肌外泌體提升是什么

來源: 發(fā)布時間:2023-04-29

外泌體的提取分離方法:1、PEG-base沉淀法:聚乙二醇(PEG)可與疏水性蛋白和脂質(zhì)分子結(jié)合共沉淀,早先應(yīng)用于從血清等樣本中收集病毒,現(xiàn)在也被用來沉淀外泌體,其原理可能與競爭性結(jié)合游離水分子有關(guān)。利用PEG沉淀外泌體存在不少問題:比如純度和回收率低,雜蛋白較多(假陽性),顆粒大小不均一,產(chǎn)生難以去除的聚合物,機械力或者吐溫-20等化學(xué)添加物將會破壞外泌體等,因此發(fā)表文章時易受質(zhì)疑。2、試劑盒提取:近幾年來,市場上已出現(xiàn)各種商業(yè)化的外泌體提取試劑盒,有的是通過特殊設(shè)計的過濾器過濾掉雜質(zhì)成分,有的則采用空間排阻色譜法(SEC)進行分離純化,也有的則利用化合物沉淀將法外泌體沉淀出來。外泌體是指包含了復(fù)雜RNA和蛋白質(zhì)的小膜泡(30-150nm)。肌外泌體提升是什么

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外泌體生物學(xué)功能:1、在心血管系統(tǒng)中,據(jù)報道,源自人胚胎干細胞(ESC)的間充質(zhì)干細胞(MSC)外泌體可減少小鼠和豬模型中的心肌缺血和再灌注損傷;2、在免疫系統(tǒng)中,據(jù)報道趨化因子受體CCR5通過外泌體在細胞之間轉(zhuǎn)移是細胞人類免疫缺陷病毒傳染的一種機制;3、在中樞的神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)中,外泌體的作用是消除廢物并介導(dǎo)大腦活動,從而阻止神經(jīng)退行性疾病的發(fā)病機理;迄今為止,尚未完全發(fā)現(xiàn)調(diào)節(jié)外泌體-細胞結(jié)合的途徑。然而,比較明顯,其結(jié)合過程從外泌體識別受體細胞PM上的特定受體開始。膜受體的識別是外泌體細胞反應(yīng)的基礎(chǔ),它可能活躍受體并隨后導(dǎo)致相關(guān)信號通路的活躍,外泌體與PM融合或外泌體的內(nèi)吞作用,從而導(dǎo)致蛋白質(zhì)和RNA直接釋放到受體細胞中。細胞上清外泌體PKH26突狀細胞釋放的外泌體可以強化殺傷性T細胞對癥狀細胞的特異性反應(yīng)。

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研究者利用電穿孔法對外泌體進行DOX的負載,進行體內(nèi)抗中流效果的研究。實驗結(jié)果顯示,負載DOX的iRGD肽靶向性外泌體對中流的抑制效果遠優(yōu)于單純的DOX。直接靜脈注射DOX,其不僅水溶性低,而且容易使DOX與血液中的蛋白結(jié)合,從而被網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)識別捕獲,起不到理想的抗中流效果。而用iRGD肽靶向性的外泌體保護DOX,可以提高DOX水溶性,避免被網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)捕捉,提高靶向性,從而降低由于用藥過量和非靶向性引起的毒性,起到更好的抗中流效果。

外泌體攜帶大量特異性的蛋白質(zhì)(如細胞因子、生長因子)以及功能性的mRNAs、miRNAs等生物活性物質(zhì),在體內(nèi)參與細胞通訊、細胞遷移、促血管新生和抗瘤子免疫等生理過程,與多種疾病的發(fā)生和進程密切相關(guān)。由于外泌體的特殊結(jié)構(gòu)和功能,使得它具有潛在的應(yīng)用價值,一方面可以作為診斷多種疾病的生物指標,另一方面也可以作為診療手段,未來有可能作為藥物的天然載體用于臨床診療。外泌體研究,應(yīng)選用血漿還是血清?答:血清是血液凝固之后收集的液體,所以其中少了纖維蛋白原,凝血因子,以及多了比較多凝血產(chǎn)物。纖維蛋白原可轉(zhuǎn)化為纖維蛋白,具有凝血功能。在凝血過程中血小板會分泌大量的外泌體,有研究發(fā)現(xiàn)血清中有接近50%的外泌體來自額外的分泌。高濃度集聚誘導(dǎo)細胞死亡的TNF-α,可使類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎惡化。

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外泌體的脂質(zhì)和蛋白質(zhì)組成可以影響它們的藥代動力學(xué)特性,它們的天然成分可能在提高生物利用度和減少不良反應(yīng)方面發(fā)揮作用。除了它們的診療潛力,外泌體也有幫助疾病診斷的潛力。它們已經(jīng)在所有的生物液體中被報道,并且通過生物液體取樣(液體活組織檢查)可以比較容易地獲得外泌體的復(fù)雜貨物的組成?;谕饷隗w的液體活檢在病癥和其他疾病的診斷和確定預(yù)后方面具有潛在的應(yīng)用價值。疾病的進展和對診療的反應(yīng)也可以通過外泌體的多組分分析來確定。外泌體的膜蛋白有可能與細胞膜蛋白作用,活躍細胞內(nèi)通路。galnac-l96-ps

隨著EV研究倍受世界矚目,各國啟動了大型研究項目。肌外泌體提升是什么

外泌體研究背景:胞外囊泡是從細胞膜上脫落或者由細胞分泌的具有雙層膜結(jié)構(gòu)的囊泡狀小體,主要由微囊泡、凋亡小體、外泌體組成。而外泌體是其中一類小囊泡,直徑為30~150nm,密度1.10~1.18g/ml,可攜帶核酸、蛋白質(zhì)質(zhì)和脂質(zhì)等,存在于血液、唾液、尿液等多種體液中。越來越多的研究證實,外泌體可以通過細胞間轉(zhuǎn)移核酸、蛋白質(zhì)、脂質(zhì)等特定物質(zhì),發(fā)揮特殊的功能。如在抗原提呈細胞中呈遞抗原程中、肉瘤細胞發(fā)生了發(fā)展、神經(jīng)細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)過程中都發(fā)揮著重要作用。對外泌體的分析和檢測可以輔助疾病的早期診斷、療效評價和預(yù)后分析。肌外泌體提升是什么

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