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江西外泌體NTA

來源: 發(fā)布時間:2023-05-15

PEG沉淀法分離外泌體:通常通過將無水聚合物,如聚乙二醇(PEG),與樣品混合來沉淀外泌體。PEG聚合物競爭性結(jié)合水分子,增加疏水性蛋白和脂質(zhì)分子的相互結(jié)合力從而沉淀外泌體,然后通過離心分離外泌體。這種分離的方法快速,簡便,可用于各種起始體積(從100μL到幾毫升)適合于各種研究和臨床設(shè)定。然而,這種方法缺乏選擇性,PEG聚合物不只會導致外泌體小泡沉淀,還會引起其他細胞外囊泡、細胞外蛋白質(zhì)和蛋白質(zhì)聚集體沉淀。因此,在使用這種方法之前,必須進行樣品預處理,例如過濾或超速離心,以減少較終的外泌體制劑的污染。外泌體作為一個新型的研究熱點,由于它在體內(nèi)存在的普遍性和獲取的便捷性。江西外泌體NTA

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干細胞外泌體可直接促進血管生成,改善大腦缺氧后的損傷。因此,干細胞外泌體可用于中風的治理,改善神經(jīng)預后,增加血管與神經(jīng)生成。干細胞外泌體對多種類型的免疫細胞均具有免疫調(diào)節(jié)作用,包括樹突狀細胞、T細胞、B細胞和巨噬細胞。靜脈輸注干細胞外泌體可抑制CD4+T和CD8+T細胞的活化和浸潤,從而延長GVHD小鼠模型的存活時間,并減少多個組織的病理損傷。干細胞在人類健康領(lǐng)域所發(fā)揮出來的潛能,令人驚嘆。而干細胞外泌體,作為干細胞與其它組織細胞相互交流信息的載體,儼然會成為生物醫(yī)學研究的新風口之一。細胞上清外泌體label free實際上,用PS親和法提取的人白血病細胞釋放的外泌體。

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有研究表明外泌體通過喚醒瘤相關(guān)信號通路、誘導免疫耐受、重塑細胞外基質(zhì)、增強瘤細胞侵襲性和調(diào)控瘤微環(huán)境促進瘤的發(fā)生和發(fā)展,外泌體在瘤的診斷上有諸多優(yōu)勢:外泌體可保護其中的核酸類物質(zhì),防止其迅速降解;外泌體的形成與親源細胞的狀態(tài)密切相關(guān);針對外泌體內(nèi)容物的檢測比傳統(tǒng)的瘤標志物更具有特異性;外泌體寬泛存在于多種體液樣本中,以其為基礎(chǔ)的瘤診斷可在病情發(fā)展過程中及時監(jiān)測分子標志物的變化,這種檢測更易監(jiān)控且樣本更易收集。

隨著科學研究的不斷深入,目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)外泌體是由通過細胞內(nèi)吞泡膜向內(nèi)凹陷形成多泡內(nèi)涵體,多泡內(nèi)涵體再與細胞膜融合后,釋放到細胞外基質(zhì)中的一種直徑約30~120nm的膜性囊泡。外泌體介導瘤細胞的化療抵抗。在瘤的治理過程中經(jīng)常會出現(xiàn)藥物耐受的情況,這會導致化療失敗,在這和過程中外泌體以多種途徑參與了化療抵抗這一過程。通常,發(fā)生EMT過程的瘤細胞可獲得抵抗凋亡能力,而抵抗凋亡通常使瘤表現(xiàn)為化療抵抗。瘤細胞來源的外泌體能通過傳遞相關(guān)的組織因子(如VEGF、TGF2β)介導細胞發(fā)生EMT,從而增加瘤細胞的化療抵抗能力。外泌體及活性蛋白能直接穿透皮膚間隙,快速直達基底層起效。

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Buller等利用miR-146b的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染間充質(zhì)干細胞,使其分泌的外泌體負載miR-146b,并將外泌體注射至移植到小鼠體內(nèi)的GBM處。結(jié)果表明,這種利用外泌體運輸miRNA進行zhiliao的方法可以有效抑制中流的生長。對于GBM類腦部中流,體內(nèi)zhiliao不同于體外細胞實驗,更需考慮腦部組織微環(huán)境對藥物的影響,外泌體可運輸miRNA并不破壞其在腦部中流組織處的原本功效。然而,至今還沒有利用外泌體載藥經(jīng)靜脈注射zhiliaoGBM的報道,這主要是由于跨越血腦屏障(BBB)仍然是外泌體進行腦部中流zhiliao需要解決的難題。盡管如此,Wood等報道的在進行阿茲茨海默病zhiliao時利用對腦部神經(jīng)元特異性肽RVG靶向的外泌體穿過BBB的研究顯示了經(jīng)靶向修飾的外泌體具備穿過BBB的潛力,因此外泌體載藥zhiliao具有廣闊的前景。需要開發(fā)大規(guī)模生產(chǎn)質(zhì)量可控的外泌體并快速純化外泌體的技術(shù)和策略。杭州外泌體iTRAQ

干細胞外泌體有減少細胞凋亡、促進血管生成、抑制纖維化等重要生物學功能,在調(diào)控組織再生方面有好的前景。江西外泌體NTA

雖然外泌體作為藥物載體具有生物兼容性、穩(wěn)定性和內(nèi)在靶向性等潛在優(yōu)勢,但是外泌體在藥物遞送中的應(yīng)用研究才剛剛起步,尚有許多問題需解決:選擇何種細胞作為外泌體的供體:如DCs來源的外泌體可用于免疫治理,因其富含組織相容復合物(MHC)及T細胞共刺激分子,能在體內(nèi)喚醒T淋巴細胞,進而抑制瘤細胞增殖;骨髓來源的間充質(zhì)干細胞(MSCs)來源的外泌體對KRAS基因有抑制作用;γδT細胞、自然殺傷細胞(NK)、瘤細胞等均有研究報道可作為載藥級別外泌體的細胞來源。江西外泌體NTA

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