人體內多種細胞及體液均可分泌外泌體,包括內皮細胞、免疫細胞、血小板、平滑肌細胞等。當其由宿主細胞被分泌到受體細胞中時,外泌體可通過其攜帶的蛋白質、核酸、脂類等來調節(jié)受體細胞的生物學活性。外泌體介導的細胞間通訊主要通過以下三種方式:一是外泌體膜蛋白可以與靶細胞膜蛋白結合,進而喚醒靶細胞細胞內的信號通路。二是在細胞外基質中,外泌體膜蛋白可以被蛋白酶剪切,剪切的碎片可以作為配體與細胞膜上的受體結合,從而喚醒細胞內的信號通路。有報道稱一些外泌體膜上蛋白在其來源細胞膜上未能檢測出。三是外泌體膜可以與靶細胞膜直接融合,非選擇性的釋放其所含的蛋白質、mRNA以及microRNA。建立外泌體分離、表征以及效價測定的標準化方法將是外泌體作為診斷和診療用途之前需要解決的問題。外泌體標志性蛋白
外泌體是細胞間信息傳遞的重要“信使”,可通過三種方式介導細胞通訊:(1)外泌體以旁分泌的方式與靶細胞相互作用,通過受體–配體作用黏附到靶細胞表面,隨后被內吞入靶細胞,或直接將內容物釋放到靶細胞內,從而激huo靶細胞;(2)外泌體的胞外膜蛋白可以被蛋白酶切割,產生的片段可以與靶細胞的細胞表面受體結合,從而激huo靶細胞;(3)外泌體還可以與靶細胞直接接觸發(fā)生膜融合,導致外泌體中的蛋白和核酸非選擇性轉移到目標細胞,從而引起靶細胞的響應。通過介導細胞間的通訊,外泌體不jin能夠參與多種生理過程,比如消除胞內陳舊分子、呈遞抗原、分化調節(jié)性T淋巴細胞或髓樣細胞以抑制免疫反應,而且還可以參與疾病形成的病理過程,如通過與受體細胞的相互作用傳播病原物質、促進中流轉移過程中的血管生長和中流細胞遷移。杭州外泌體Dil需要開發(fā)大規(guī)模生產質量可控的外泌體并快速純化外泌體的技術和策略。
目前,在各種健康與疾病模型中都發(fā)現(xiàn),外泌體通過分子信息傳遞扮演著重要的角色。外泌體還越來越多地被認為是疾病的生物標志物和預后因子,具有重要的臨床診斷和治理意義。除此之外,它們還有潛力被用于臨床,作為基因和藥物遞送的載體。健康人和多種疾病的患者會將含有不同RNA和蛋白質成分的外泌體釋放到體液循環(huán)中,因其特殊性,外泌體可以作為生物標志物來對疾病進行檢測。例如,從血液或尿液中分離的外泌體可以用作病癥、心臟病的診斷和預后的指標。
細胞分泌到細胞外環(huán)境中分別稱為外泌體和微泡的細胞外膜泡是內源性和質膜起源的不同類型的膜囊泡。這些細胞外囊泡(EVs)表示了細胞間通訊的一個重要模式,作為膜和細胞溶質蛋白、脂質和RNA細胞之間傳遞的載體。然而,我們對于EV形成的分子機制知識的缺乏以及缺乏干擾貨物包裝或囊泡釋放的方法仍然妨礙了其在體內生理相關性的探索。這篇綜述專注于EV的特性和目前提出的形成、定位和功能的機制。該綜述描述了將外泌體定義為特定的分泌囊泡群體的物理性質,總結了其生物學效應,特別是免疫系統(tǒng),討論了分泌囊泡可能作為細胞間信使的潛在作用。外泌體能向病變細胞輸送功能性物質,所以有很大潛力作為基因和藥物遞送的載體。
Buller等利用miR-146b的質粒轉染間充質干細胞,使其分泌的外泌體負載miR-146b,并將外泌體注射至移植到小鼠體內的GBM處。結果表明,這種利用外泌體運輸miRNA進行zhiliao的方法可以有效抑制中流的生長。對于GBM類腦部中流,體內zhiliao不同于體外細胞實驗,更需考慮腦部組織微環(huán)境對藥物的影響,外泌體可運輸miRNA并不破壞其在腦部中流組織處的原本功效。然而,至今還沒有利用外泌體載藥經靜脈注射zhiliaoGBM的報道,這主要是由于跨越血腦屏障(BBB)仍然是外泌體進行腦部中流zhiliao需要解決的難題。盡管如此,Wood等報道的在進行阿茲茨海默病zhiliao時利用對腦部神經元特異性肽RVG靶向的外泌體穿過BBB的研究顯示了經靶向修飾的外泌體具備穿過BBB的潛力,因此外泌體載藥zhiliao具有廣闊的前景。外泌體的異質性決定了外泌體藥物遞送系統(tǒng)要根據所傳遞治理物質的類型、目標組織的特點等進行針對性的調整。唾液外泌體iTRAQ
外泌體天然存在于體液中,包括血液、唾液、尿液、腦脊液和乳汁中。外泌體標志性蛋白
為獲得外泌體的大小、濃度、形態(tài)及蛋白質組成等信息,可以通過電鏡、動態(tài)光散射、納米顆粒跟蹤分析儀、蛋白質免疫印跡、酶聯(lián)免疫吸附法、流式細胞儀等對外泌體進行表征。通過電鏡可獲得外泌體的形態(tài)信息,不同類型的顯微鏡由于操作環(huán)境不同,得到的外泌體形態(tài)存在差異。例如,在掃描電鏡、透射電鏡和原子力顯微鏡中,外泌體呈現(xiàn)囊泡獨有的茶托形,可能由于樣品在固定或染色過程中極度脫水,導致外泌體塌陷所致。與之相反,在冷凍電鏡中外泌體呈現(xiàn)圓形,由于不會脫水變性,所得的外泌體形態(tài)可能更加接近囊泡的真實狀態(tài)。另外,由于透射電鏡和原子力顯微鏡具有較高分辨率,也能夠提供外泌體磷脂雙分子層厚度、粒徑分布等信息。外泌體標志性蛋白
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