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來源: 發(fā)布時間:2023-06-20

外泌體大小不均可能是由于MVB的限制膜不均勻內(nèi)陷,導(dǎo)致流體和固體的總含量不同;細胞的微環(huán)境和固有的生物學(xué)特性可能會影響外顯體的含量及其生物學(xué)標記,如乳腺病細胞及其外泌體的蛋白質(zhì)組可以顯示來源細胞是上皮樣細胞還是間充質(zhì)樣細胞;由于細胞表面受體表達的不同,外泌體對受體細胞的影響可能不同,可能誘導(dǎo)細胞存活,也可能誘導(dǎo)凋亡,或誘導(dǎo)免疫調(diào)節(jié)等;異質(zhì)性也可以基于外泌體起源的組織,包括它們是否來自病細胞,瘤細胞產(chǎn)生的外泌體傳遞致瘤miRNAs明顯促進瘤細胞增殖。外泌體又存在檢測時需使用大量外泌體和難以檢測到低表達水平的標記蛋白。細胞提取試劑盒成分

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血清和血漿為常規(guī)檢測樣本,具有微創(chuàng)取樣的優(yōu)點,是診斷疾病的理想樣本。血液中外泌體能夠作為胰腺ai、胃ai、肺ai和阿爾茲海默等疾病的早期診斷和療效評價提供潛在標志物。血液外泌體來源的疾病標志物主要包括蛋白質(zhì)和miRNA兩類。Melo等發(fā)現(xiàn)利用胰腺ai細胞外泌體表面的磷脂酰肌醇聚糖-1(GPC1)能夠?qū)崿F(xiàn)胰腺ai早期診斷,利用該方法對血清中包含GPC1的外泌體進行檢測,能夠高特異性(100%)、高靈敏度(100%)地區(qū)分胰腺ai患者(246例)和正常人(20例)以及慢性胰腺炎患者(37例)。浙江CD63外泌體慢病毒外泌體功能在研究初期階段發(fā)現(xiàn)是參與細胞成熟過程中去除不必要的蛋白質(zhì)。

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由于特殊的結(jié)構(gòu)和循環(huán)方式,外泌體作為藥物運輸?shù)妮d體具有獨特的優(yōu)勢。例如外泌體的尺寸分布能夠增強滲透滯留效應(yīng),從而有選擇性地深入中流組織;其外層磷脂雙分子層可以保護內(nèi)容物不受各種生物酶的影響,維持各種生物分子的活性;外泌體普遍存在于各種體液和組織中,其體積小,結(jié)構(gòu)、組成與細胞膜類似,導(dǎo)致外泌體可以在避開免疫系統(tǒng)監(jiān)督的同時深入組織內(nèi)部,有較好的生物相容性;當(dāng)采用內(nèi)源外泌體時,能明顯降低其他藥物載體可能引起的有害免疫反應(yīng);除此之外,某些細胞來源或經(jīng)特殊修飾過的外泌體具有良好的特異性,可以與特定的qi官或組織結(jié)合。

外泌體有很多潛在優(yōu)勢,但是外泌體在藥物遞送中的應(yīng)用研究才剛剛起步,尚有許多問題需解決:如何修飾外泌體的靶向性:缺氧瘤細胞來源的外泌體傾向于向缺氧瘤組織內(nèi)募集;此外,還可通過在外泌體膜表面設(shè)計與靶細胞特異性結(jié)合的抗體、配體或受體來實現(xiàn)。如何提高藥物裝載效率:目前主要有①前裝載方法(首先將藥物加載到母細胞中,隨后外泌體形成并包裹藥物分泌到細胞外,常用的方法如轉(zhuǎn)染、共孵育等);②后裝載方法(直接將藥物加載到外泌體中,例如孵育、電穿孔、超聲、擠出、凍融循環(huán)等);③其他裝載方法(主要是通過生物工程修飾母細胞來實現(xiàn))。如何實現(xiàn)外泌體的大量生產(chǎn):目前大規(guī)模生產(chǎn)外泌體的方法主要是自發(fā)生產(chǎn)和非自發(fā)生產(chǎn)。外泌體研究使用血漿樣本進行實驗較好。

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外泌體可以調(diào)控星狀細胞(HSC)活化,并參與HSC細胞遷移的進程。活化的HSC來源的外泌體中,CCN2表達升高,Twist1和miR-214表達被抑制,這些外泌體還能誘導(dǎo)靜止的HSC細胞表達CCN2。此外,Twist1可以誘導(dǎo)miR-214表達從而抑制CCN2的表達。CCL4處理的外泌體和外泌體SK1/S1P會誘導(dǎo)HSC遷移。MSC分泌的外泌體可以有效減緩肝纖維化過程,這可能成為肝纖維化治理的靶點。研究顯示,CP-MSC來源的外泌體miR-125b可以抑制Hedgehog信號通路的活化,抑制纖維化;而HUC-MSC分泌的外泌體可以逆轉(zhuǎn)細胞形態(tài)和TGF-β1誘導(dǎo)的EMT進程,減弱肝纖維化。外泌體的提取的方式:免疫磁珠法。鼻腔灌洗液外泌體融合實驗

神經(jīng)細胞來源的外泌體含有與神經(jīng)退行性疾病相關(guān)的分子。細胞提取試劑盒成分

流式細胞技術(shù)針對外泌體的表面抗原標記物進行檢測,能夠?qū)崿F(xiàn)外泌體的高通量、多通道分析。但是由于外泌體的粒徑小、折射率低,所以采用常規(guī)的流式細胞儀進行檢測時往往需要將外泌體與beads連接以增大表面積、增強反射,操作耗時又費力。Tian等搭建了一種高靈敏度的流式細胞儀(HSFCM),將可檢測的外泌體粒徑降至40nm,能夠在不連接beads的情況下實現(xiàn)每分鐘10000個外泌體的檢測,并且能夠結(jié)合免疫熒光的方法進行外泌體標志蛋白質(zhì)的定量檢測,目前該儀器已商品化。細胞提取試劑盒成分

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