外泌體可以由體內(nèi)或體外培養(yǎng)的幾乎所有類型的細胞分泌,并廣fan存在于血漿、膽汁、尿液、母乳、唾液、胸腔積液、淋巴、胃酸、支氣管肺泡灌洗液、腦脊液、眼淚、滑膜液、羊水、腹水、鼻分泌物和子宮抽吸物液體等體液中。目前,基于不同的分離原理,研究者建立了五種主要的提取純化技術(shù),分別為基于質(zhì)量密度的超速離心技術(shù)、基于粒徑大小的分離技術(shù)、基于溶解性質(zhì)的聚合物沉淀技術(shù)、基于免疫親和原理的分離技術(shù)和基于流體性質(zhì)的微流控技術(shù)?;顑?nèi)的外泌體動態(tài)(哪個外泌體遷移至何處)也會成為今后需要努力研究的重要課題。體液外泌體提取試劑盒分類
前列腺ai患者尿液外泌體中的miR-574-3p、miR-141-5p和miR-21-5p的表達水平明顯上升,表明這些miRNAs可用于前列腺ai的早期篩查。膽管ai是惡性程度較高的消化系統(tǒng)中流,發(fā)展隱蔽且臨床癥狀及體征出現(xiàn)晚,故給早期診斷帶來困難。高通量小RNA測序篩查了來自膽管ai和膽囊ai患者外泌體中一系列差異表達的miRNA,小RNA長度在正常個體、膽管ai患者和膽囊ai患者之間的分布存在明顯差異,膽管ai患者的外泌體中miR-96-5p、miR-151a-5p、miR-191-5p、miR-4732-3p明顯升高,而膽囊ai患者的外泌體中miR-151a-5p略有升高,為膽管ai和膽囊ai提供了一套新的生物診斷標志物。杭州CD63外泌體慢病毒從外泌體中篩選的生物標志物,可用于疾病的診斷、預后及治理。
所有真核細胞類型包括造血細胞、上皮細胞、神經(jīng)細胞、干細胞、脂肪細胞和病癥細胞均可在培養(yǎng)條件下分泌外泌體。體內(nèi)所有體液,包括血液、唾液、腦脊液、腹水,甚至尿液中都可以分離得到外泌體。這些外泌體傳輸多種信號分子,包括蛋白質(zhì)、信使核糖核酸(mRNA)和非編碼核糖核酸(RNA),其攜帶的分子可以被其他細胞吸收。因此,外泌體可以將生物信息轉(zhuǎn)移到相鄰細胞。這種細胞間通信不只涉及生理功能,還涉及一些疾病的發(fā)病機理,包括瘤、心血管疾病和神經(jīng)退行性疾病等。
外泌體富含蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和核酸分子,這些分子具有來源細胞的特異性,所以通過分析中流細胞所釋放的外泌體分子特征就可部分反映其來源細胞表型及其生物學作用?,F(xiàn)已發(fā)現(xiàn)多種中流外泌體來源的蛋白類分子標志物。例如,乳腺ai、結(jié)腸ai和胰腺ai中均可檢測到磷脂酰肌醇蛋白聚糖1(glypican1,GPC1)的表達,且與乳腺ai和結(jié)腸ai相比,GPC1對胰腺ai的早期診斷尤具價值。前列腺ai患者血漿外泌體中凋亡抑制蛋白的表達增高則提示與中流進展相關(guān)。隨著蛋白組學技術(shù)的發(fā)展,研究發(fā)現(xiàn)中流患者血液外泌體來源的蛋白標志物其診斷特異性和敏感性分別可達到95%和90%。血液中的成纖維細胞所釋放的外泌體,可以促進角質(zhì)形成細胞的移動和增殖以及血管新生來促進傷口愈合。
在20世紀80年代,外泌體被描述為從網(wǎng)織紅細胞分泌的內(nèi)體來源的囊泡。人們對這些細胞外囊泡的興趣逐漸增加,因為它們似乎參與了很多細胞過程。外泌體攜帶蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和RNAs,介導體內(nèi)不同細胞類型之間的細胞間通訊,從而影響正常和病理狀態(tài)。只有近,科學家才認識到將外泌體與其他類型的細胞外囊泡分開的困難,這排除了特定功能對不同類型分泌的囊泡的明確歸因。為了闡明這個復雜但正在發(fā)展的科學領(lǐng)域,該綜述著重于外泌體和其他分泌的細胞外囊泡的定義。討論了它們的生物發(fā)生,分泌及其后續(xù)的命運,因為它們的功能依賴于這些重要過程。超速離心是從生物體液或細胞上清分離外泌體的金標準方法。海洋生物外泌體粒徑檢測
外泌體作為核酸分子的藥物載體主要用于基因治理。體液外泌體提取試劑盒分類
通過改變外泌體的溶解性或者分散性,可以將它們從體液或細胞培養(yǎng)液中沉淀出來。常見的方法是使用聚乙二醇或凝集素來沉淀樣品中的外泌體。聚乙二醇是一種水溶性非離子化合物,不含水的聚乙二醇可以通過“劫持”水分子增加疏水性蛋白和脂質(zhì)分子的相互結(jié)合力,從而迫使其脫離溶液,進而在低速離心條件下發(fā)生沉降。凝集素是一種具有高度特異性的碳水化合物結(jié)合蛋白,可通過與外泌體質(zhì)膜糖蛋白上的糖鏈結(jié)合來改變外泌體的溶解性。此外,還可使用魚精蛋白、醋酸鈉、有機溶劑沉淀等方法進行沉淀分離。體液外泌體提取試劑盒分類