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來源: 發(fā)布時間:2023-09-26

卵巢ai患者與良性卵巢疾病患者血清外泌體中的miRNA表達譜有明顯差異,表明血清外泌體中的miRNA可以作為卵巢ai活檢的替代診斷標志物。多項研究表明外泌體中的miR-21在包括大多數(shù)ai癥的多種病理條件下過度表達。尿液外泌體來源于泌尿系統(tǒng)相關的各種細胞,包括腎小球足細胞、腎小管細胞和膀胱等,因此尿液外泌體數(shù)目、形態(tài)和生化性質(zhì)的改變往往反映泌尿系統(tǒng)疾病。通過對前列腺ai癥患者尿液中的外泌體進行轉錄組分析,鑒定到兩種已知的前列腺ai癥標志物PCA-3(prostatecanceranti[1]gen3,前列腺ai抗原3)和TMPRSS2:ERG(thefusiongeneoftransmembraneproteaseserinestoERG,跨膜蛋白酶絲氨酸與ERG的融合基因),表明尿液外泌體具有診斷和監(jiān)測ai癥患者狀態(tài)的潛力。干細胞外泌體通過改變細胞外基質(zhì),改變受體細胞的轉錄組和蛋白質(zhì)組,調(diào)節(jié)細胞凋亡,生長,增殖和分化途徑。羊水提取試劑盒公司

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為了解決外泌體實驗遇到的上述的各種問題,Wako研發(fā)出MagCapture?外泌體提取試劑盒PS(MagCapture?ExosomeIsolationKitPS)提取高純度細胞外囊泡。外泌體膜含有分泌細胞源的蛋白和脂質(zhì),眾所周知磷脂酰絲氨酸(PS)在活細胞通過翻轉酶作用導向細胞膜內(nèi)側,暴露在外泌體膜外側3)。另外,T-cellimmunoglobulindomainandmucindomain-containingprotein4(Tim4通過巨噬細胞進行細胞凋亡的吞噬受體)蛋白通過細胞外域IgV域與含有鈣離子的PS結合4)。基于上述知識,我們利用Tim4固化磁珠,在鈣離子存在下捕捉培養(yǎng)上清和血清等樣品中的外泌體,再添加螯合劑洗脫外泌體,這種外泌體純化方法是和金澤大學醫(yī)學系免疫學華山教授共同開發(fā),并取得了成功。5)這是迄今為止取代黃金標準超速離心法的新型外泌體純化方法。吉林外泌體蛋白質(zhì)組學有關外泌體分泌和攝取及其組成、“運載物”和相應功能的精確分子機制剛剛開始研究。

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各種細胞粘著分子在外泌體膜表面表達,由其決定外泌體被運輸往哪一種細胞,期望開發(fā)利用該特征的新型DDS。外泌體在體液中十分穩(wěn)定,同時外囊泡所含的蛋白質(zhì)和RNA被外泌體的脂質(zhì)雙層膜所包被也不會分解。另外在從體液中提取外泌體后,體液可長期穩(wěn)定保存,因此外泌體有望成為臨床檢測的新型疾病生物標記。外泌體與各種疾病的相關性被檢測出,特別是血液中釋放的病細胞來源的外泌體,其與正常細胞來源外泌體在結構分子上的差異倍受矚目,并作為癥狀早期診斷技術,應用于與癥狀進展相關的研究。甚至人們期望將尿液中的外泌體作為腎臟、前列腺疾病、膀胱疾病的新型診斷標記,髓液中的外泌體作為腦內(nèi)種瘤和神經(jīng)退行性疾病的新型標記物。

外泌體的檢測,在其他消化道系統(tǒng)瘤的診療中,存在著巨大的潛在價值.如:食管鱗狀細胞病的研究中發(fā)現(xiàn),miRNA-21在外泌體中的高表達,表達水平可100%反應瘤水平,外泌體miRNA-21的高表達往往預示著寬泛浸潤與復發(fā)[36].十二指腸病的研究中,發(fā)現(xiàn)轉移性十二指腸病細胞分泌的外泌體富含PABP1蛋白,細胞不能耐受PABP在胞內(nèi)的大量囤積,通過外泌體PABP1蛋白排出胞外是轉移性十二指腸病細胞所具有的特性,外泌體PABP1是轉移性十二指腸病的分子標志物,此發(fā)現(xiàn)不只在轉移性十二指腸病的診斷上提供了價值,也為轉移性十二指腸病的治理提供了新的思路。建立記錄各論文實驗條件的數(shù)據(jù)庫也可作為規(guī)避混亂的方法之一。

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在血液和大多數(shù)體液(如尿液、腦脊液、唾液、胸腹腔積液、羊水和乳汁等)中均可檢測到外泌體。血液外泌體的檢測通常采用EDTA抗凝血分離的血漿,miRNA等一些微小RNA則采用血清樣本。泌尿系統(tǒng)中存在大量的RNA水解酶可降解尿液中的裸miRNAs,但外泌體外膜則可幫助RNA免于被降解,因此研究尿液外泌體miRNAs更具有應用價值。相較于血清中相關miRNA的水平,腦脊液外泌體中的miR-21可作為膠質(zhì)瘤診斷和預后的指標,特別對預測中流復發(fā)或轉移具有價值。唾液樣本在安靜狀態(tài)下主要來源于舌下腺和頜下腺,刺激狀態(tài)下則主要來源于腮腺。外泌體研究相對困難,需要盡快開發(fā)操作簡單、可提取高純度外泌體的技術。外周血外泌體提取試劑盒公司

科學家也嘗試利用外泌體的壓制發(fā)病機制功能。羊水提取試劑盒公司

外泌體能攜帶多種生物活性分子循環(huán)于血液/體液中并介導長距離的細胞間通訊,中流來源外泌體富含的蛋白質(zhì)、核苷酸、脂質(zhì)等分子能夠反映其來源細胞的生理及病理狀態(tài),外泌體特殊的脂質(zhì)雙分子層結構能保護其內(nèi)RNA等分子免于降解,因此,檢測中流外泌體成為液體活檢一個明顯優(yōu)勢。臨床試驗研究表明,外泌體在多種疾病的早期診斷、療效和預后監(jiān)測等方面都具備較好的應用價值,正逐漸成為臨床診療中新的、理想的生物標志物和可能的靶向藥物載體。隨著技術的進步,組學時代的到來,大規(guī)模蛋白質(zhì)組學已經(jīng)被聯(lián)合應用于篩選和揭示多種ai癥細胞外囊泡的標志物。羊水提取試劑盒公司