雖然系統(tǒng)遞送的外泌體主要在肝臟、腎臟和脾臟中積累,但通過在外泌體的外表面上展示特定的靶向分子。例如,識別靶抗原的肽或抗體片段,可以獲得靶向外泌體;通過在細(xì)胞分泌囊泡上展示糖基磷脂酰肌醇(GPI)錨定的納米抗體,可以使細(xì)胞分泌囊泡顯示多種蛋白,包括抗體、熒光蛋白和信號分子。自然分泌的外泌體分離純化直接作為藥物的潛力有限,但是,將自然的外泌體分泌所需組分摻入合成脂質(zhì)體或納米顆粒中,并且使用可控程序組裝后的工程化外泌體模擬物在藥學(xué)上擁有更大的應(yīng)用潛力。外泌體作為膜和細(xì)胞溶質(zhì)蛋白、脂質(zhì)和RNA細(xì)胞之間傳遞的載體。植物外泌體熒光標(biāo)記
由于這些胞外囊泡(EV)與生理和病理狀況之間的關(guān)系,人們對EV的興趣呈指數(shù)增長。EVs對新型診斷和臨床轉(zhuǎn)化有很大希望。近的研究已經(jīng)將這些交流所需的一些任務(wù)歸結(jié)為細(xì)胞外囊泡(如外泌體和微泡),主要參與髓鞘膠質(zhì)細(xì)胞和神經(jīng)元之間的相互信號傳遞從而促進(jìn)神經(jīng)元存活、由小膠質(zhì)細(xì)胞介導(dǎo)的免疫應(yīng)答、突觸組裝和可塑性。這種囊泡也被認(rèn)為是神經(jīng)變性疾病和腦病擴(kuò)散的重要因素。這些細(xì)胞外囊泡功能為以前無法識別的神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)跨細(xì)胞相互作用增加了新方式。干細(xì)胞外泌體PKH26外泌體具有良好的生物兼容性、穩(wěn)定性和內(nèi)在靶向性,使其在藥物遞送方向大有潛力。
Pascucci等將包含有紫杉醇的間充質(zhì)細(xì)胞來源外泌體與胰腺ai細(xì)胞共培養(yǎng),發(fā)現(xiàn)裝載紫杉醇的間充質(zhì)細(xì)胞外泌體具有很強(qiáng)的抗中流增殖效果。Tian等為降低免疫原性與毒性,采用小鼠未成熟樹突狀細(xì)胞所產(chǎn)生外泌體作為藥物載體。同時(shí)為實(shí)現(xiàn)外泌體運(yùn)輸?shù)陌邢蛐裕辜?xì)胞表達(dá)能夠識別乳腺ai細(xì)胞的外泌體膜蛋白Lamp2b(lysosomeasso[1]ciatedmembraneglycoprotein2b,溶酶體相關(guān)膜蛋白2)。并采用電穿孔的方法,在純化所得的小鼠未成熟樹突狀細(xì)胞外泌體中載入阿霉素。結(jié)果表明該外泌體能夠特異性的將阿霉素傳遞給中流組織,抑制中流生長且無明顯毒性。
在過去十年中,細(xì)胞外囊泡已經(jīng)成為細(xì)胞間通訊的重要介質(zhì),參與原核生物和高等真核生物細(xì)胞之間的生物信號傳遞,以調(diào)節(jié)不同范圍的生物過程。此外,細(xì)胞外囊泡的病理生理作用開始在包括癥狀、傳播性疾病和神經(jīng)變性疾病在內(nèi)的疾病中得到認(rèn)識,突出了醫(yī)治干預(yù)的潛在新靶點(diǎn)。此外,未修飾和工程化的細(xì)胞外囊泡可能在大分子藥物遞送中具有應(yīng)用。該綜述回顧近在理解細(xì)胞外膜泡生物學(xué)和細(xì)胞外囊泡在疾病中的作用方面的進(jìn)展,討論新出現(xiàn)的醫(yī)治機(jī)會(huì)并考慮相關(guān)的挑戰(zhàn)。外泌體研究相對困難,需要盡快開發(fā)操作簡單、可提取高純度外泌體的技術(shù)。
外泌體是具有雙層脂膜的囊泡結(jié)構(gòu),其穩(wěn)定性較好,可保護(hù)內(nèi)部生物分子免受體液中各種酶的影響,從而保持其完整性和生物活性。外泌體被提取后一般懸浮于磷酸鹽緩沖液。目前,常用的儲存方法為冷凍保存,但是冷凍保存可能會(huì)導(dǎo)致外泌體形狀與物理性質(zhì)的改變,也可能導(dǎo)致多層囊泡的形成和聚集,反復(fù)凍融會(huì)導(dǎo)致外泌體表面分子的生物特性、含量和標(biāo)志物組成發(fā)生變化。血清中包含外泌體在內(nèi)的細(xì)胞外囊泡DNA在不同儲存環(huán)境可保持穩(wěn)定,血漿存放于4°C時(shí)其RNA會(huì)明顯降解,在–20°C下長期保存也會(huì)導(dǎo)致血漿中外泌體總RNA降解,但miRNA卻十分穩(wěn)定,這也提示了外泌體miRNA作為生物標(biāo)志物的潛力。外泌體的功能取決于其所來源的細(xì)胞類型。湖北外泌體tmt
外泌體本身的惰性相當(dāng)高,但它們與細(xì)胞膜融合可將所攜帶的物質(zhì)和信號傳遞到受體細(xì)胞并改變其生物學(xué)功能。植物外泌體熒光標(biāo)記
外泌體富含蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和核酸分子,這些分子具有來源細(xì)胞的特異性,所以通過分析中流細(xì)胞所釋放的外泌體分子特征就可部分反映其來源細(xì)胞表型及其生物學(xué)作用?,F(xiàn)已發(fā)現(xiàn)多種中流外泌體來源的蛋白類分子標(biāo)志物。例如,乳腺ai、結(jié)腸ai和胰腺ai中均可檢測到磷脂酰肌醇蛋白聚糖1(glypican1,GPC1)的表達(dá),且與乳腺ai和結(jié)腸ai相比,GPC1對胰腺ai的早期診斷尤具價(jià)值。前列腺ai患者血漿外泌體中凋亡抑制蛋白的表達(dá)增高則提示與中流進(jìn)展相關(guān)。隨著蛋白組學(xué)技術(shù)的發(fā)展,研究發(fā)現(xiàn)中流患者血液外泌體來源的蛋白標(biāo)志物其診斷特異性和敏感性分別可達(dá)到95%和90%。植物外泌體熒光標(biāo)記