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細(xì)胞外泌體提取試劑盒報價

來源: 發(fā)布時間:2023-10-23

在血液和大多數(shù)體液(如尿液、腦脊液、唾液、胸腹腔積液、羊水和乳汁等)中均可檢測到外泌體。血液外泌體的檢測通常采用EDTA抗凝血分離的血漿,miRNA等一些微小RNA則采用血清樣本。泌尿系統(tǒng)中存在大量的RNA水解酶可降解尿液中的裸miRNAs,但外泌體外膜則可幫助RNA免于被降解,因此研究尿液外泌體miRNAs更具有應(yīng)用價值。相較于血清中相關(guān)miRNA的水平,腦脊液外泌體中的miR-21可作為膠質(zhì)瘤診斷和預(yù)后的指標(biāo),特別對預(yù)測中流復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移具有價值。唾液樣本在安靜狀態(tài)下主要來源于舌下腺和頜下腺,刺激狀態(tài)下則主要來源于腮腺。從體液和培養(yǎng)上清中高純度提取的高純度外泌體,在活內(nèi)是否真的能發(fā)生作用尚未能確定。細(xì)胞外泌體提取試劑盒報價

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外泌體作為疾病診斷的標(biāo)志物具有其獨特優(yōu)勢:(1)與正常細(xì)胞相比,病變細(xì)胞產(chǎn)生的外泌體在分泌量和內(nèi)容物方面存在明顯差異。病變的細(xì)胞和組織能夠產(chǎn)生更多外泌體。(2)由于特殊的生成方式,外泌體的組成不同于來源細(xì)胞。其內(nèi)包含的一些特異性蛋白質(zhì)能夠揭示外泌體的起源、結(jié)構(gòu)和運輸方式,有利于深入了解外泌體的產(chǎn)生機制。(3)病變細(xì)胞分泌的外泌體通過胞吐的過程進(jìn)入血液、尿液等體液,囊泡狀結(jié)構(gòu)能夠保護(hù)外泌體內(nèi)部生物分子不受體液中蛋白酶、磷酸酶、核酸酶等干擾,有利于保持其結(jié)構(gòu)完整和生物活性,通過對此類體液進(jìn)行分析可以實現(xiàn)疾病的無創(chuàng)或微創(chuàng)檢測。外泌體冷藏還是冷凍外泌體其純度與超離心法和PEG沉淀法提取外泌體做比較。

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外泌體即細(xì)胞分泌的直徑約40-100nm的微小膜泡,多種細(xì)胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體。一開始被當(dāng)做細(xì)胞排泄物,但是近幾年,研究發(fā)現(xiàn)外泌體可謂是小身體大作用。種瘤發(fā)生轉(zhuǎn)移后,如何靶向呈遞藥物一直是種瘤醫(yī)治中的一個巨大挑戰(zhàn)。發(fā)表于NanoLett的一項研究中,研究人員利用外泌體制備藥物的遞送系統(tǒng)(LD-MDS),并取得成功。在這項研究中,研究人員將相關(guān)藥物錨定在活巨噬細(xì)胞膜上,細(xì)胞自身相關(guān)蛋白酶響應(yīng)開啟并將藥物轉(zhuǎn)載進(jìn)入外泌體,順利遞送至肺轉(zhuǎn)移灶并且轉(zhuǎn)化為納米囊泡和次級納米囊泡,促進(jìn)轉(zhuǎn)移性4T1病細(xì)胞的有效內(nèi)化和細(xì)胞死亡。之后,受損的4T1病細(xì)胞可以釋放次級納米囊泡和游離藥物分子,再破壞鄰近的病細(xì)胞。研究顯示,LD-MDS對體內(nèi)直徑小于100μm的肺轉(zhuǎn)移病灶顯示出優(yōu)異的靶向效率,并顯著壓制肺轉(zhuǎn)移。

細(xì)胞分泌到細(xì)胞外環(huán)境中分別稱為外泌體和微泡的細(xì)胞外膜泡是內(nèi)源性和質(zhì)膜起源的不同類型的膜囊泡。這些細(xì)胞外囊泡(EVs)表示了細(xì)胞間通訊的一個重要模式,作為膜和細(xì)胞溶質(zhì)蛋白、脂質(zhì)和RNA細(xì)胞之間傳遞的載體。泌體是細(xì)胞內(nèi)源性的小囊泡,由大多數(shù)細(xì)胞分泌。在抗原呈遞細(xì)胞中的外泌體發(fā)揮作用的報道后,人們對外泌體的興趣增強,并且觀察到它們可以在體內(nèi)刺激免疫應(yīng)答。在過去幾年中,有幾個實驗室報道了各種細(xì)胞類型的外泌體分泌,并討論了其潛在的生物學(xué)功能。然而,我們對于EV形成的分子機制知識的缺乏以及缺乏干擾貨物包裝或囊泡釋放的方法仍然妨礙了其在體內(nèi)生理相關(guān)性的探索。這篇綜述專注于EV的特性和目前提出的形成、定位和功能的機制。外泌體提純方法中,超速離心法和聚合物沉淀法(市售試劑盒)混入多種雜質(zhì)。

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外泌體(Exosome)介導(dǎo)瘤血管的形成和轉(zhuǎn)移。外泌體(Exosome)能將自身的細(xì)胞因子IL-8和VEGF釋放到細(xì)胞外,作用于內(nèi)皮細(xì)胞膜表面受體,導(dǎo)致瘤血管快速形成并較終通過發(fā)生EMT過程促進(jìn)瘤的遷移。瘤細(xì)胞來源的外泌體(Exosome)中含有血管生長素、血管內(nèi)皮生長因子等,這些細(xì)胞因子以不同的作用方式促進(jìn)瘤血管的形成,如VEGF通過喚醒磷酸酯酶C和第二信使的形成,誘導(dǎo)纖維蛋白溶解酶原活化物的表達(dá),使得基底膜降解,從而促進(jìn)瘤細(xì)胞的遷移。有望在外泌體和微囊泡生理功能的分析研究上起重大貢獻(xiàn)。羊水提取試劑盒成分

細(xì)胞表面受體表達(dá)不同,外泌體對受體細(xì)胞的影響可能不同,可能誘導(dǎo)細(xì)胞存活,也可能誘導(dǎo)凋亡或免疫調(diào)節(jié)等。細(xì)胞外泌體提取試劑盒報價

外泌體作為細(xì)胞外囊泡的一個亞群,直徑集中于30~150nm。目前,基于粒徑大小分離外泌體的方法有超濾法、尺寸排除色譜法、靜水過濾透析法和非對稱場流分離法等。超濾法利用不同孔徑的濾膜,對樣品進(jìn)行選擇性分離以獲得外泌體,一般分為壓力超濾和離心超濾。其中離心超濾效果更好,不jin能減輕力對外泌體的破壞,而且可通過增大離心力和延長離心時間提高外泌體產(chǎn)物濃度。但離心力過大或離心時間過長均有可能導(dǎo)致超濾膜或外泌體破裂。此外,超濾法可以和切向流過濾法、微控流法、超速離心法或凝膠過濾色譜法等方法結(jié)合進(jìn)一步提高分離效率。細(xì)胞外泌體提取試劑盒報價

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