通過對28例前列腺ai癥患者和19例正常人尿液外泌體中的miRNA進行深度測序分析,發(fā)現兩種miRNA(miR-196a-5p和miR-501-3p)在前列腺ai患者組明顯下調,表明尿液外泌體中的特異性miRNA可能作為前列腺ai的新型生物標志物。Khurana等[100]將研究對象由miRNAs擴大至多種類型RNA,通過對慢性腎病患者尿液外泌體中各類RNA進行系統(tǒng)研究,在慢性腎病患者組中識別出30種明顯差異的lncRNAs,表明尿液外泌體中的lncRNAs具有作為慢性腎病早期診斷標志物的潛力。Skotland等的研究則表明尿液外泌體中的脂質能夠作為前列腺ai的新型標志物,3種脂質標志物結合使用能夠有效提高對前列腺ai的診斷靈敏度(93%)和特異性(100%)??茖W家也嘗試利用外泌體的壓制發(fā)病機制功能。內泌體 外泌體
干細胞外泌體的六大內在改善:細胞排毒:有效活化提高細胞能量加速細胞排毒、淡化色斑。細胞修復:加速細胞修復、促進微循環(huán)修復,修復痘坑痘印。增加彈性:重塑彈力纖維膠原纖維網狀纖維,恢復肌膚彈性,提亮皮膚。淡化皺紋、細紋:促進生成纖維細胞,增強皮膚產生蛋白能力,淡化皺紋、頸紋等。減緩衰老:調節(jié)機體組織間物質及信息傳遞速度,加強修復,減緩衰老。營養(yǎng)供給:針對肌膚脆弱敏感日夜修復,面部、眼周、肌底多效保護,不斷給皮膚補充充足的營養(yǎng),喚醒肌膚細胞,有助于后續(xù)產品營養(yǎng)更好的吸收。臨床診斷級別外泌體外泌體被包裹在堅硬的雙層膜中,雙層膜保護外泌體的內容物,使外泌體能夠在組織中長距離移動。
間充質干細胞存在于骨髓、脂肪、臍血、牙髓、滑膜液等部位,是一種能夠自我更新的多功能干細胞。間充質干細胞通過旁分泌的形式發(fā)揮其生理功能,而外泌體作為一種細胞間傳遞信息的介質,在間充質干細胞的功能行使中發(fā)揮了重要作用。研究發(fā)現間充質干細胞來源的外泌體能夠修復組織損傷、抑制中流生長和調節(jié)免疫響應,具有zhiliao心肌梗死、自身免疫疾病、阿爾茲海默癥等疾病的潛力。另外,也有研究顯示間充質干細胞來源的外泌體會促進某些中流生長。
為獲得外泌體的大小、濃度、形態(tài)及蛋白質組成等信息,可以通過電鏡、動態(tài)光散射、納米顆粒跟蹤分析儀、蛋白質免疫印跡、酶聯免疫吸附法、流式細胞儀等對外泌體進行表征。通過電鏡可獲得外泌體的形態(tài)信息,不同類型的顯微鏡由于操作環(huán)境不同,得到的外泌體形態(tài)存在差異。例如,在掃描電鏡、透射電鏡和原子力顯微鏡中,外泌體呈現囊泡獨有的茶托形,可能由于樣品在固定或染色過程中極度脫水,導致外泌體塌陷所致。與之相反,在冷凍電鏡中外泌體呈現圓形,由于不會脫水變性,所得的外泌體形態(tài)可能更加接近囊泡的真實狀態(tài)。另外,由于透射電鏡和原子力顯微鏡具有較高分辨率,也能夠提供外泌體磷脂雙分子層厚度、粒徑分布等信息。外泌體給后續(xù)實驗產生了許多障礙。
外泌體富含蛋白質、脂質和核酸分子,這些分子具有來源細胞的特異性,所以通過分析中流細胞所釋放的外泌體分子特征就可部分反映其來源細胞表型及其生物學作用?,F已發(fā)現多種中流外泌體來源的蛋白類分子標志物。例如,乳腺ai、結腸ai和胰腺ai中均可檢測到磷脂酰肌醇蛋白聚糖1(glypican1,GPC1)的表達,且與乳腺ai和結腸ai相比,GPC1對胰腺ai的早期診斷尤具價值。前列腺ai患者血漿外泌體中凋亡抑制蛋白的表達增高則提示與中流進展相關。隨著蛋白組學技術的發(fā)展,研究發(fā)現中流患者血液外泌體來源的蛋白標志物其診斷特異性和敏感性分別可達到95%和90%。人體內多種細胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體,包括干細胞、免疫細胞、內皮細胞、及平滑肌細胞等。腦脊液外泌體
在從體液中提取外泌體后,體液可長期穩(wěn)定保存。內泌體 外泌體
利用蛋白質免疫印跡和酶聯免疫吸附分析技術可以對外泌體標志性蛋白質進行定性定量分析。其中蛋白免疫印跡是外泌體的經典表征手段之一,操作時往往需要細胞裂解液作為陰性對照。常用的外泌體標志性蛋白質包括四跨膜蛋白質CD63、CD81、CD9、中流易感基因101蛋白(TSG101)、水通道蛋白2(AQP2,尿液中)和凋亡誘導因子6相互作用蛋白(Alix)等,內參蛋白質可以是肌動蛋白(βActin)或甘油醛-3-磷酸脫氫酶,陰性對照蛋白可以是阻抑素(PHB,線粒體標志蛋白)或鈣聯結蛋白Calnexin。在酶聯免疫吸附析法中,外泌體裂解液通過固載有抗體的固相基質,隨后與檢測抗體共孵育。兩種方法均存在操作繁瑣、耗時長的問題,相比較而言,酶聯免疫吸附分析法比蛋白質免疫印跡法更加快速,適用于高通量分析。內泌體 外泌體