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腹膜透析液外泌體lncRNA芯片

來源: 發(fā)布時間:2023-11-07

在利用外泌體運輸PTX進行抗中流的研究中,由于間充質干細胞可以歸巢(homing)至中流細胞微環(huán)境并且可以不通過基因操作即可對PTX運輸,因此Pessina等采用間充質干細胞SR4987作為分泌外泌體的母代細胞,而后將SR4987與PTX共混,使SR4987分泌的外泌體含有PTX,再利用超速離心法將載有PTX的外泌體分離出來,研究其對體外人胰腺ai細胞株的影響。結果表明外泌體可以有效的運載PTX并不破壞其功能,小泡(主要指外泌體)溶液的蛋白質濃度在0.047~0.095mg/mL之間時可以誘導中流細胞凋亡50%,這種抑制效果與純PTX對體外ai細胞的抑制效果相當。通過壓制或去除這些外泌體,有希望壓制疾病發(fā)生。腹膜透析液外泌體lncRNA芯片

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外泌體基礎醫(yī)學和臨床應用的探索和深入研究對如何準確及高純度提取外泌體,并完整保存提出了更高的技術要求。外泌體可通過差速超速離心在不同離心力下沉淀樣品中不同的雜質組分,并在100000×g~200000×g的轉速下獲取較純的外泌體。差速超速離心技術被認為是外泌體分離的“金標準”,也是目前常用的外泌體分離和濃縮方法。該方法可通過結合0.22μm或0.45μm孔徑濾膜進行超濾來提高產物純度減少外泌體的聚集,其分離效率容易受到加速度、轉子類型、旋轉半徑、沉降路徑長度以及樣品黏度等多種因素影響。上海外泌體lncRNA測序隨著外泌體的功能逐漸被發(fā)現,近年來,應用這些功能的醫(yī)治法也在被開發(fā)出來。

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外泌體是新型治理劑,惡性瘤細胞往往能夠通過分泌大量外泌體抑制宿主固有免疫。對外泌體的質譜研究發(fā)現,惡性瘤細胞的外泌體含有大量活化型的表皮生長因子受體(epidermalgrowthfactorreceptor,EGFR),可以抑制宿主細胞α型干擾素(IFN-α)的產生。這就解釋了為什么部分瘤患者固有免疫低下,也為晚期病癥患者的治理提供一個新的策略和理論依據。除了瘤,外泌體在其他疾病如心血管疾病等的診斷和治理的相關臨床試驗也在世界范圍內開展中。

外泌體不只可作為疾病診斷的生物標志,而且可作為天然的藥物傳遞載體。外泌體能夠負載的治理物質包括小分子化合物、蛋白質、寡核苷酸等,且在體液中寬泛分布且具有定向歸巢能力。外泌體獨特的生物兼容性、高穩(wěn)定性、瘤靶向性使其在未來瘤治理中有很大的利用價值。外泌體能夠裝載的治理物質包括小分子化合物、蛋白質、寡核苷酸等。作為小分子化合物載體,外泌體裝載姜黃素、紫杉醇、阿霉素等主要是用于抗瘤研究;已經發(fā)現外泌體可遞送多種蛋白質,例如酶,細胞骨架蛋白質和跨膜蛋白質;外泌體作為核酸分子的藥物載體主要用于基因治理,外泌體天然的可以攜帶遺傳(例如miRNA,siRNA)到靶細胞中,從而在生物學和致病過程中誘導遺傳修飾。外泌體膜蛋白可以與靶細胞膜蛋白結合,進而喚醒靶細胞細胞內的信號通路。

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除了siRNA和miRNA,mRNA也可以作為“貨物”被外泌體運輸。研究表明,在移植了人肺中流的小鼠模型的血液和唾液中分離出來的外泌體含有中流細胞特異性的mRNA,而被愛潑斯坦-巴爾病毒(EBV)感ran的細胞分泌的外泌體中也含有EBV的潛伏期mRNA。因而,外泌體的這種運載mRNA的能力引起了中流研究者們的注意。近期,Saydam等率先報道了利用多泡體(含外泌體)負載mRNA/蛋白進行中流zhiliao的研究。研究者們利用脂質體2000或病毒載體對HEK-293細胞進行轉染,使其分泌的多泡體含有mRNA/蛋白(CD-UPRTEGFP,其中CD:胞嘧啶脫氨酶;UPRT:尿嘧啶磷酸核糖轉移酶;EGFP:增強型綠色熒光蛋白)。將此多泡體注射至小鼠的神經鞘瘤處,并輔助注射5氟尿嘧啶(5-FC),神經鞘瘤的增長被明顯抑制。不同肝臟疾病中,細胞分泌的外泌體所攜帶的核酸和蛋白組分之間存在差異。上海外泌體lncRNA測序

外泌體被認為是疾病的生物標志物和預后因子,具有重要的臨床診斷和治理意義。腹膜透析液外泌體lncRNA芯片

外泌體作為藥物遞送載體較以往的合成系統(tǒng)具有多方面的優(yōu)勢,比如:人工遞送載體具有更低的免疫原性,其含有的磷脂雙分子層可與靶細胞細胞膜融合,從而避廉價核巨噬細胞系統(tǒng)的吞噬作用。Srivastava等開發(fā)了一種基于外泌體-金奈米粒子(Exo-GNP)的藥物遞送系統(tǒng)—“nanosomes”用于肺病的醫(yī)治,研究表明該系統(tǒng)與單用多柔比星醫(yī)治相比,前者的多柔比星釋放量增加、攝取率提高、化療毒性降低且化療效果增強。此外,還有研究發(fā)現,使用外泌體運載紫杉醇(PTX)可顯著提高病細胞對PTX的吸收,將PTX加載至外泌體中顯著增加了藥物細胞毒性,Exo-PTX能顯著壓制肺病的發(fā)展。腹膜透析液外泌體lncRNA芯片