瘤釋放的外泌體可以通過削弱免疫效應細胞的反應和激發(fā)免疫抑制細胞的擴增,來營造一個免疫抑制的環(huán)境。瘤釋放的外泌體可以替代瘤細胞接受免疫系統(tǒng)的攻擊,從而幫助瘤細胞逃過免疫系統(tǒng)的識別。瘤釋放的外泌體可以引發(fā)炎癥,利用基質(zhì)浸潤細胞的反應營造出利于瘤生長的微環(huán)境。研究表明,在過去短短的5年里,對外泌體的研究已經(jīng)取得了比較好的的進展。如今,收集并分析瘤釋放的外泌體已經(jīng)成為液體活檢的一個重要研發(fā)方向。靶向瘤釋放外泌體的治理策略將對改善病癥患者的命運發(fā)揮出舉足輕重的影響。外泌體大小不均的原因可能是由于MVB的限制膜不均勻內(nèi)陷,導致流體和固體的總含量不同。杭州CD9外泌體慢病毒
外泌體的提取方法:超速離心法,這是外泌體提取比較常用的方法。超速離心法得到的外泌的體量比較多,但是純度不足,電鏡鑒定時發(fā)現(xiàn)外泌體聚集成塊,由于微泡和外泌體沒有非常統(tǒng)一的鑒定標準,也有一些研究認為此種方法得到的是微泡而不是外泌體。過濾離心法,這種操作簡單、省時,不會影響外泌體的生物活性,但同樣存在純度不足的問題。密度梯度離心法,用此種方法分離到的外泌體純度高,但是前期的準備工作繁雜,比較耗時,量少。江蘇外泌體PKH26從體液和培養(yǎng)上清中高純度提取的高純度外泌體,在活內(nèi)是否真的能發(fā)生作用尚未能確定。
雖然外泌體作為藥物載體具有生物兼容性、穩(wěn)定性和內(nèi)在靶向性等潛在優(yōu)勢,但是外泌體在藥物遞送中的應用研究才剛剛起步,尚有許多問題需解決:選擇何種細胞作為外泌體的供體:如DCs來源的外泌體可用于免疫治理,因其富含組織相容復合物(MHC)及T細胞共刺激分子,能在體內(nèi)喚醒T淋巴細胞,進而抑制瘤細胞增殖;骨髓來源的間充質(zhì)干細胞(MSCs)來源的外泌體對KRAS基因有抑制作用;γδT細胞、自然殺傷細胞(NK)、瘤細胞等均有研究報道可作為載藥級別外泌體的細胞來源。
瘤轉(zhuǎn)移是病癥致死的首要原因。長久以來,對瘤轉(zhuǎn)移機理的研究一直聚焦于瘤與機體之間的相互作用。然而在近年來,由于外泌體被發(fā)現(xiàn)可以作為包括瘤在內(nèi)細胞之間信息傳遞的一種新方式,瘤轉(zhuǎn)移研究領(lǐng)域再度變得火熱起來。我所(瘤轉(zhuǎn)移的預警和預防研究所)以謝曉東博士為首的外泌體研究小組一直致力于研究瘤轉(zhuǎn)移與外泌體之間的聯(lián)系,已取得一系列成果。外泌體是指包含了復雜RNA和蛋白質(zhì)的小膜泡(30-150nm),現(xiàn)今,其特指直徑在40-100nm的盤狀囊泡。多種細胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體。其主要來源于細胞內(nèi)內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體,經(jīng)多囊泡體外膜與細胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中。蛋白質(zhì)分子在外泌體信號傳遞過程中起到了非常重要的作用。
除運輸藥物進行疾病zhiliao之外,外泌體還能進行免疫zhiliao,外泌體免疫zhiliao和載藥zhiliao。進行免疫調(diào)節(jié)時,外泌體通常運載TGF-β1、粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)或MAGE抗原等物質(zhì)。在這些研究中,分泌外泌體的母代細胞往往選用具有很好抗原遞呈(antigenpresentation)能力的樹突細胞或者中流細胞。Cao等采用鼠B淋巴瘤細胞作為母代細胞,通過熱處理的方式使淋巴瘤細胞分泌的外泌體含有更多的熱休克蛋白(HSP60和HSP90)和其他一些刺激免疫的分子,如主要組織相容性復合物(MHC-I和MHC[1]II)以及CD40、CD86等,與未熱處理的鼠B淋巴瘤細胞分泌的外泌體相比,熱處理后分泌的外泌體可以增強對T細胞的激huo能力,從而增強這種基于外泌體的疫苗的抗中流能力。干細胞外泌體有減少細胞凋亡、促進血管生成、抑制纖維化等重要生物學功能,在調(diào)控組織再生方面有好的前景。浙江干細胞外泌體
高濃度集聚誘導細胞死亡的TNF-α,可使類風濕關(guān)節(jié)炎惡化。杭州CD9外泌體慢病毒
利用抗ai癥藥物進行中流zhiliao是抑制中流的一個重要方法,不過目前抗ai癥藥物的運載存在著種種挑戰(zhàn),主要體現(xiàn)在以下幾點:(1)抗ai癥藥物的疏水性;(2)抗ai癥藥物的毒性以及非靶向性;(3)易被人體清chu,體內(nèi)循環(huán)的半衰期很短等。采用外泌體運輸抗ai癥藥物,可以提高藥物體系的水溶性,降低藥物對人體的毒性以及避免被網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)捕捉從而延長其循環(huán)時間。近期,兩種抗ai癥藥物———紫杉醇(PTX)和阿霉素(DOX)已經(jīng)成功被載入外泌體中,并對其抗中流作用進行了研究。杭州CD9外泌體慢病毒