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干細(xì)胞外泌體提取試劑盒產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)

來源: 發(fā)布時(shí)間:2023-11-29

Knepper等通過對(duì)透射電鏡得到的200個(gè)囊泡進(jìn)行粒徑分析,結(jié)果表明尿液中外泌體的粒徑分布約為35~40nm,磷脂雙分子層厚度約為直徑的1/5~1/10。透射電鏡結(jié)合免疫金標(biāo)記法能夠得到外泌體表面特征分子的信息,有助于揭示外泌體的產(chǎn)生機(jī)制與來源。動(dòng)態(tài)光散射(dynamiclightscattering,DLS)和納米顆粒跟蹤分析(nanoparticletrackinganaly[1]sis,NTA)都是利用光學(xué)手段獲得囊泡粒徑分布的方法。兩者的不同之處在于動(dòng)態(tài)光散射通過檢測(cè)散射光的強(qiáng)度計(jì)算得到顆粒粒徑,而納米顆粒跟蹤分析通過追蹤單個(gè)粒子的運(yùn)動(dòng)軌跡計(jì)算得到樣品濃度、粒徑分布等信息。不同肝臟疾病中,細(xì)胞分泌的外泌體所攜帶的核酸和蛋白組分之間存在差異。干細(xì)胞外泌體提取試劑盒產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)

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在外泌體中引入藥物的方式包括體內(nèi)裝載和體外裝載兩種。體內(nèi)藥物裝載可以通過傳統(tǒng)方法(如病毒轉(zhuǎn)染、脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染或電穿孔等)轉(zhuǎn)染來源細(xì)胞,編碼感興趣的RNA或蛋白質(zhì),也可以使藥物與來源細(xì)胞共混,使細(xì)胞分泌產(chǎn)生含有目標(biāo)生物分子的外泌體。體外藥物裝載則首先需要得到純化的外泌體,然后將感興趣的藥物通過電穿孔或脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染等方法裝入純化的外泌體。外泌體內(nèi)可裝載的藥物包括小分子化學(xué)藥物、蛋白質(zhì)和多肽、核酸藥物、天然產(chǎn)物等。湖南外泌體質(zhì)譜外泌體并作為癥狀早期診斷技術(shù),應(yīng)用于與癥狀進(jìn)展相關(guān)的研究。

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外泌體(exosomes)是一類由細(xì)胞分泌到胞外的囊泡。與其他兩種胞外囊泡(微囊泡和凋亡小體)相比,外泌體在產(chǎn)生方式、尺寸、密度和內(nèi)容物等方面存在明顯差異。不同于微囊泡“出芽”的形成方式,外泌體主要通過胞吐過程釋放至細(xì)胞外:首先細(xì)胞膜向內(nèi)凹陷形成早期核內(nèi)體(earlyendosomes),早期核內(nèi)體進(jìn)一步內(nèi)陷形成多泡體(multivesicularbodies,MVBs),其中一部分多泡體與溶酶體(lysosome)融合,進(jìn)而降解;另一部分與細(xì)胞膜融合,將其內(nèi)部所包含的囊泡釋放至胞外,即為外泌體。外泌體具有獨(dú)特的物理化學(xué)性質(zhì),其直徑為30~200nm,密度為1.13~1.19g/mL,組成包括細(xì)胞來源相關(guān)的脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、RNA、DNA等物質(zhì),在其表面連接有大量的糖鏈,如甘露糖、聚乳糖胺和α2,6-唾液酸等。

胃病作為一種常見的惡性瘤,在亞洲具有較高的發(fā)病率.胃病的臨床診斷方法與結(jié)腸病相同,主要依靠?jī)?nèi)窺鏡,早期胃病的癥狀并不明顯,且臨床常用的瘤標(biāo)志物對(duì)胃病患者特異性與敏感性均較差,因此,胃病往往發(fā)現(xiàn)于晚期,并伴有不同程度的轉(zhuǎn)移。研究者發(fā)現(xiàn)胃病細(xì)胞高表達(dá)CD97并可經(jīng)外泌體分泌的方式調(diào)節(jié)瘤細(xì)胞的MAPK信號(hào)通路,促進(jìn)瘤細(xì)胞的增殖與侵襲。外泌體中CD97的檢測(cè)成或許能成為一種有潛在價(jià)值的胃病診療工具。胃病細(xì)胞能選擇性地將let-7包裝到外泌體中,并釋放至周圍環(huán)境中,促進(jìn)胃病的惡性進(jìn)展。胃病細(xì)胞外泌體可作用于抗瘤的T細(xì)胞,抑制AKT的活性。外泌體與免疫細(xì)胞之間的相互作用揭示了瘤抑制免疫功能的潛在機(jī)制。在另一項(xiàng)被認(rèn)為有潛在胃病診斷價(jià)值的lnRNA的研究中,通過對(duì)胃病患者、胃上皮異型增生與健康人的比較發(fā)現(xiàn),LINC00152在胃病患者的血液中可被檢測(cè)到高表達(dá),且手術(shù)前后有明顯變化。血清LINC00152主要存在于外泌體中,在外泌體的保護(hù)下,可以穩(wěn)定保存,血清外泌體LINC00152具有胃病標(biāo)志物的潛能。隨著EV研究倍受世界矚目,各國啟動(dòng)了大型研究項(xiàng)目。

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除了siRNA和miRNA,mRNA也可以作為“貨物”被外泌體運(yùn)輸。研究表明,在移植了人肺中流的小鼠模型的血液和唾液中分離出來的外泌體含有中流細(xì)胞特異性的mRNA,而被愛潑斯坦-巴爾病毒(EBV)感ran的細(xì)胞分泌的外泌體中也含有EBV的潛伏期mRNA。因而,外泌體的這種運(yùn)載mRNA的能力引起了中流研究者們的注意。近期,Saydam等率先報(bào)道了利用多泡體(含外泌體)負(fù)載mRNA/蛋白進(jìn)行中流zhiliao的研究。研究者們利用脂質(zhì)體2000或病毒載體對(duì)HEK-293細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染,使其分泌的多泡體含有mRNA/蛋白(CD-UPRTEGFP,其中CD:胞嘧啶脫氨酶;UPRT:尿嘧啶磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶;EGFP:增強(qiáng)型綠色熒光蛋白)。將此多泡體注射至小鼠的神經(jīng)鞘瘤處,并輔助注射5氟尿嘧啶(5-FC),神經(jīng)鞘瘤的增長(zhǎng)被明顯抑制。建立記錄各論文實(shí)驗(yàn)條件的數(shù)據(jù)庫也可作為規(guī)避混亂的方法之一。腹水外泌體熒光標(biāo)記

幾乎沒有混入外泌體以外的蛋白,回收量高,操作重復(fù)性好。干細(xì)胞外泌體提取試劑盒產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)

外泌體(Exosome)是一種直徑為30-100nm的納米級(jí)脂質(zhì)包裹體結(jié)構(gòu),內(nèi)部包裹了蛋白、mRNA和microRNA等物質(zhì)。外泌體由細(xì)胞分泌釋放出來,在血液等體液內(nèi)傳播,較后又可被其他細(xì)胞吞噬,是細(xì)胞間通訊的重要介質(zhì)。源自于間充質(zhì)干細(xì)胞內(nèi)分泌的外泌體,富含一百多種胞外基質(zhì)蛋白,mRNA信使核糖核酸和多重生長(zhǎng)因子。在臨床上,干細(xì)胞外泌體主要治理燒傷、燙傷、皮膚潰瘍,再生健康皮膚;在護(hù)膚方面,主要是對(duì)外傷受損、衰老中毒皮膚進(jìn)行修復(fù),比較全的調(diào)理皮膚、改善膚質(zhì),令肌膚恢復(fù)年輕、健康的狀態(tài)。干細(xì)胞外泌體提取試劑盒產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)

標(biāo)簽: 外泌體提取試劑盒