妊娠期間胎盤(pán)可釋放外泌體到全身循環(huán)系統(tǒng)，參與妊娠期間母胎界面的免疫調(diào)節(jié)、子宮螺旋動(dòng)脈重塑和胎盤(pán)屏障的形成等重要事件調(diào)控，在正常妊娠過(guò)程維持中發(fā)揮重要作用。而很多妊娠并發(fā)癥，如子癇前期等胎盤(pán)功能紊亂相關(guān)疾病的發(fā)生，很可能與胎盤(pán)來(lái)源外泌體異常密切相關(guān)。目前外泌體分離方法主要包括：多步差速離心、蔗糖密度梯度離心、試劑盒沉淀、免疫磁珠分選、色譜法、過(guò)濾離心等方法。其中，多步差速離心是制備外泌體的經(jīng)典方法，該方法是根據(jù)外泌體的沉降系數(shù)差速離心將其分離出來(lái)，然而妊娠期母血清中除含有胎盤(pán)組織釋放的外泌體，還包括許多其他種類(lèi)細(xì)胞釋放的外泌體，如樹(shù)突狀細(xì)胞、淋巴細(xì)胞等，且血清中可能還存在一些大小類(lèi)似的物質(zhì)混雜其中，這些因素都會(huì)影響胎盤(pán)來(lái)源外泌體的分離純化。外泌體可以直接進(jìn)入受體細(xì)胞影響細(xì)胞功能。細(xì)胞外泌體原液的特點(diǎn)

外泌體中存在著某些特定的蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和多糖,基于抗原–抗體特異性識(shí)別和結(jié)合作用原理,可將外泌體從其他組分中分離出來(lái)。四次跨膜蛋白家族、脂膜、膜聯(lián)蛋白、上皮細(xì)胞黏附分子或肝素等都可以作為抗原,而捕獲外泌體的抗體可以附著在平板、磁珠、二氧化硅、樹(shù)脂、膜親和過(guò)濾器、纖維素濾膜、聚酰氨基胺樹(shù)狀聚合物表面和微流控器件上。常用方法有酶聯(lián)免疫吸附法和磁珠法等。酶聯(lián)免疫吸附法使用聚苯乙烯微孔板作為抗體附著介質(zhì),其結(jié)果用吸光度值表示,該方法可以快速分析已知表面生物標(biāo)志物的表達(dá),也可以瞬時(shí)讀出外泌體的產(chǎn)量和特異性。磁珠法多使用共價(jià)包覆鏈霉親和素的磁珠,與樣品一起孵育后可通過(guò)磁泳將被結(jié)合的外泌體從樣品組分中分離出來(lái)。鑒于微米級(jí)磁珠可賦予更大的接觸面積,該方法不jin具有高度特異性,還具有比超速離心更高的外泌體產(chǎn)率。湖南外泌體Dil有報(bào)導(dǎo)指出，外泌體內(nèi)miRNA參與促進(jìn)血管新生、抗癥性和促進(jìn)膠原蛋白沉淀等一系列過(guò)程。

在當(dāng)代準(zhǔn)確醫(yī)療的大趨勢(shì)下，外泌體的發(fā)現(xiàn)和研究為肺病的早期診斷和醫(yī)治提供了嶄新的方向。外泌體在液體活檢中的巨大潛力可以為肺病患者的早期發(fā)現(xiàn)和早期診療提供可靠依據(jù)。根據(jù)種瘤來(lái)源的外泌體在肺病的發(fā)發(fā)展和侵襲轉(zhuǎn)移過(guò)程中的作用及相關(guān)機(jī)制的研究，臨床醫(yī)療人員可以針對(duì)不同的患者制定合適的醫(yī)治方案，以達(dá)到改善肺病患者生存率，延長(zhǎng)肺病患者生存時(shí)間的目的。但是，針對(duì)外泌體的研究還存在諸多的問(wèn)題有待廣大研究者解決，如：外泌體的純化及標(biāo)記方法、如何尋找外泌體的靶基因、外泌體的作用機(jī)制及信號(hào)通路等?？偠灾?，外泌體的研究有著廣闊的前景，基于外泌體與肺病的研究，有望研發(fā)出能夠應(yīng)用于肺病臨床診斷和醫(yī)治的有效措施，造福更多的患者。

外泌體作為疾病診斷標(biāo)志物的潛在應(yīng)用依賴于基于外泌體的藥物遞送系統(tǒng)的技術(shù)突破，要將其用于臨床治理，外泌體的大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)面臨很大的挑戰(zhàn)。外泌體（exosome）是細(xì)胞分泌囊泡（extracellularvesicles）的一種亞型，存在于生物體液中，并參與多種生理和病理過(guò)程。外泌體被認(rèn)為是細(xì)胞間通信的一種新機(jī)制，允許細(xì)胞交換蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和遺傳物質(zhì)。過(guò)去，細(xì)胞分泌的外泌體一度被認(rèn)為只是參與廢物排泄；現(xiàn)在，隨著高通量蛋白質(zhì)組學(xué)和基因組學(xué)的發(fā)展，外泌體被寬泛認(rèn)為是生物體內(nèi)細(xì)胞間短距離和長(zhǎng)距離交流的高度保守的途徑，這種細(xì)胞間通信對(duì)于正常細(xì)胞和瘤細(xì)胞都是非常重要的。PS親和法提取的外泌體，其蛋白特異性檢測(cè)可高出10~100倍以上。

外泌體的生物發(fā)生途徑主要包括三個(gè)關(guān)鍵的檢查點(diǎn)：ILV的形成，阻止MVEs的降解以及MVEs和細(xì)胞膜的融合，這三個(gè)檢查點(diǎn)都包含在內(nèi)體相關(guān)的囊泡運(yùn)輸過(guò)程中。RABGTPase定位到特定膜結(jié)構(gòu)的表面，通過(guò)招募效應(yīng)因子來(lái)調(diào)節(jié)相應(yīng)膜結(jié)構(gòu)的囊泡運(yùn)輸，例如，在內(nèi)體溶酶體運(yùn)輸網(wǎng)絡(luò)中，RAB5調(diào)節(jié)早期內(nèi)體的形成及相互融合；內(nèi)體膜上RAB5到RAB7的轉(zhuǎn)換調(diào)節(jié)早期向晚期內(nèi)體的轉(zhuǎn)變；RAB7調(diào)節(jié)晚期內(nèi)體/MVEs與溶酶體的融合來(lái)降解ILVs；RAB27調(diào)節(jié)MVEs與細(xì)胞膜的對(duì)接和融合來(lái)釋放ILVs形成外泌體。內(nèi)吞的膜蛋白，特別是受體酪氨酸激酶家族的表皮生長(zhǎng)因子受體，定位到內(nèi)體和MVEs，通過(guò)MVEs和溶酶體融合來(lái)進(jìn)入溶酶體降解，此過(guò)程受多種RABGTPases和ESCRT復(fù)合體的調(diào)控。外泌體復(fù)雜的內(nèi)容物被認(rèn)為是疾病診斷的無(wú)創(chuàng)或微創(chuàng)生物標(biāo)志物。湖南外泌體Dil

外泌體觀察到它們可以在體內(nèi)刺激免疫應(yīng)答。細(xì)胞外泌體原液的特點(diǎn)

外泌體（exosome）是一種由活細(xì)胞分泌的，直徑約為40～160nm的具有雙層膜結(jié)構(gòu)的生物活性囊泡。它攜帶了分泌細(xì)胞包含的生物活性物質(zhì)，如DNA、miRNAs、mRNA、長(zhǎng)鏈非編碼RNA（LncRNA）、酶、蛋白質(zhì)和細(xì)胞代謝物等。外泌體在細(xì)胞間通信中扮演著十分重要的角色。目前對(duì)于外泌體的研究涉及包括瘤的發(fā)生和發(fā)展、侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制、瘤診斷標(biāo)志物以及藥物傳遞系統(tǒng)等諸多方面。外泌體是一個(gè)高度異質(zhì)性的群體，具有獨(dú)特的誘導(dǎo)復(fù)雜生物學(xué)反應(yīng)的能力。外泌體的異質(zhì)性可以根據(jù)其大小、含量(載物)、對(duì)受體細(xì)胞的功能影響以及細(xì)胞來(lái)源來(lái)區(qū)分。這些特征的不同組合導(dǎo)致了外泌體的復(fù)雜異質(zhì)性。細(xì)胞外泌體原液的特點(diǎn)