已經(jīng)有許多關(guān)于外泌體作用的報(bào)導(dǎo),根據(jù)這些現(xiàn)象實(shí)驗(yàn)中,從體液和培養(yǎng)上清中高純度提取的高純度外泌體,在活內(nèi)是否真的能發(fā)生作用尚未能確定。確認(rèn)外泌體生理作用的單獨(dú)方法就是明確外泌體的釋放機(jī)制,通過(guò)促進(jìn)或壓制釋放機(jī)制,分析會(huì)引起何種生理作用,這是進(jìn)一步研究的發(fā)展方向。甚至活內(nèi)的外泌體動(dòng)態(tài)(哪個(gè)外泌體遷移至何處)也會(huì)成為今后需要努力研究的重要課題。實(shí)際上,用PS親和法提取的人白血病細(xì)胞釋放的外泌體,其純度與超離心法和PEG沉淀法提取外泌體做比較,PS親和法提取的外泌體,其蛋白特異性檢測(cè)可高出10~100倍以上,幾乎沒有混入外泌體以外的蛋白,回收量高,操作重復(fù)性好。外泌體的復(fù)雜性,為疾病檢測(cè)和監(jiān)測(cè)提供了一個(gè)多指標(biāo)的診斷窗口。廣州植物外泌體
人體內(nèi)多種細(xì)胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體,包括干細(xì)胞、免疫細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、血小板及平滑肌細(xì)胞等。外泌體被包裹在堅(jiān)硬的雙層膜中。雙層膜保護(hù)外泌體的內(nèi)容物,使外泌體能夠在組織中長(zhǎng)距離移動(dòng)。干細(xì)胞外泌體因在上皮組織的增殖、遷移、再生、炎癥和瘢痕控制等方面的作用,有望成為“無(wú)細(xì)胞的細(xì)胞治理”工具。干細(xì)胞來(lái)源的外泌體可通過(guò)囊泡,將干細(xì)胞的精華部分——mRNA、miRNA、IncRNA及蛋白質(zhì)等生物活性物質(zhì),打包運(yùn)出干細(xì)胞體外。通過(guò)“細(xì)胞間高速公路”來(lái)“快遞”到人體各個(gè)組織內(nèi)。血清外泌體miRNA芯片外泌體可以作為藥物治理的遞送系統(tǒng)。
血清和血漿為常規(guī)檢測(cè)樣本,具有微創(chuàng)取樣的優(yōu)點(diǎn),是診斷疾病的理想樣本。血液中外泌體能夠作為胰腺ai、胃ai、肺ai和阿爾茲海默等疾病的早期診斷和療效評(píng)價(jià)提供潛在標(biāo)志物。血液外泌體來(lái)源的疾病標(biāo)志物主要包括蛋白質(zhì)和miRNA兩類。Melo等發(fā)現(xiàn)利用胰腺ai細(xì)胞外泌體表面的磷脂酰肌醇聚糖-1(GPC1)能夠?qū)崿F(xiàn)胰腺ai早期診斷,利用該方法對(duì)血清中包含GPC1的外泌體進(jìn)行檢測(cè),能夠高特異性(100%)、高靈敏度(100%)地區(qū)分胰腺ai患者(246例)和正常人(20例)以及慢性胰腺炎患者(37例)。
外泌體運(yùn)輸?shù)幕蝾愃幬镆部梢允莔iRNA,miRNA是一類非編碼的內(nèi)源性RNA,主要用于調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄后的基因表達(dá)。miRNA主要通過(guò)與mRNA的未翻譯的區(qū)域(UTRs)結(jié)合起到抑制基因表達(dá)和降解mRNA的作用。與siRNA不同,miRNA抑制mRNA的表達(dá)不需要完美的堿基配對(duì),因此每種miRNA可以抑制多種蛋白質(zhì)的表達(dá),而每種siRNA只針對(duì)一種蛋白質(zhì)。miRNA的運(yùn)載也存在著種種挑戰(zhàn):miRNA體內(nèi)穩(wěn)定性差、生物分布不理想、易被體內(nèi)酶降解以及容易引起副反應(yīng)等。越來(lái)越多的研究表明外泌體也是體內(nèi)運(yùn)載miRNA的優(yōu)良載體,并且利用外泌體運(yùn)輸miRNA的zhiliao方法已經(jīng)在許多疾病模型中得以應(yīng)用。外泌體又存在檢測(cè)時(shí)需使用大量外泌體和難以檢測(cè)到低表達(dá)水平的標(biāo)記蛋白。
外泌體(exosome)是一種由活細(xì)胞分泌的,直徑約為40~160nm的具有雙層膜結(jié)構(gòu)的生物活性囊泡。它攜帶了分泌細(xì)胞包含的生物活性物質(zhì),如DNA、miRNAs、mRNA、長(zhǎng)鏈非編碼RNA(LncRNA)、酶、蛋白質(zhì)和細(xì)胞代謝物等。外泌體在細(xì)胞間通信中扮演著十分重要的角色。目前對(duì)于外泌體的研究涉及包括瘤的發(fā)生和發(fā)展、侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制、瘤診斷標(biāo)志物以及藥物傳遞系統(tǒng)等諸多方面。外泌體是一個(gè)高度異質(zhì)性的群體,具有獨(dú)特的誘導(dǎo)復(fù)雜生物學(xué)反應(yīng)的能力。外泌體的異質(zhì)性可以根據(jù)其大小、含量(載物)、對(duì)受體細(xì)胞的功能影響以及細(xì)胞來(lái)源來(lái)區(qū)分。這些特征的不同組合導(dǎo)致了外泌體的復(fù)雜異質(zhì)性。各種細(xì)胞粘著分子在外泌體膜表面表達(dá),由其決定外泌體被運(yùn)輸往哪一種細(xì)胞。外泌體膜的主要成分是什么
利用外泌體將siRNA和抗藥劑等運(yùn)輸?shù)侥繕?biāo)細(xì)胞中。廣州植物外泌體
外泌體在各種疾病的診斷和治理中的應(yīng)用研究火熱。外泌體的復(fù)雜性,為疾病檢測(cè)和監(jiān)測(cè)提供了一個(gè)多指標(biāo)的診斷窗口。此外,能夠向病變細(xì)胞輸送功能性物質(zhì)的特性使外泌體有潛力作為基因和藥物遞送的載體。有研究總結(jié)了從外泌體中篩選的生物標(biāo)志物,可用于疾病的診斷、預(yù)后及治理。外泌體在生物液體中寬泛分布,包括血液、尿液、唾液、胸腹水、腦脊液、膽汁、乳汁以及淚液等,其復(fù)雜的內(nèi)容物被認(rèn)為是疾病診斷的無(wú)創(chuàng)或微創(chuàng)生物標(biāo)志物,具有檢測(cè)包括病癥在內(nèi)的許多病理狀況的潛力,可以用于對(duì)心血管疾病和病癥等多種疾病的診斷和監(jiān)測(cè)。廣州植物外泌體