組份與比例不同胎牛血清和新生牛血清兩者所含的促細胞生長因子、促貼附因子、及其他活性物質(zhì)等組份與比例不同。03用途與用法不同某些細胞必需胎牛血清才能生長,而有些細胞只需小牛血清即可,使用濃度不同,一般在5%-10%,有特殊要求的濃度在20%。血清保存和使用須注意:血清應(yīng)保存在-5℃至-20℃,若存放在4℃不可超過一個月。解凍血清時,應(yīng)先將血清至于2-8℃冰箱,并經(jīng)常搖勻使之溶解,然后至室溫放置使之升溫,一定不可將冷凍的血清直接放入37℃水浴或者溫箱中,如放在37℃解凍,顏色加深,粘稠度也會增加,血清在解凍和熱滅活后,應(yīng)按用量分裝并于-20℃保存,避免反復(fù)凍融??梢允寡宸蛛x快,分離血清多不易受外界溫度的影響。上海豬血清生產(chǎn)廠
1989年左右,也有國外學(xué)者建議用豬血清取代牛血清,用于培養(yǎng)制造非洲豬瘟病毒的細胞(見《動物檢疫》1991年01期《豬血清中的牛血清白蛋白抗體引起非洲豬瘟血清學(xué)診斷的假陽性反應(yīng)》),原因是牛血清中的白蛋白會干擾非洲豬瘟抗體的檢測,造成假陽性反應(yīng)。其他動物源血清兔血清:兔血清通常從六個月或更小的動物身上收集,可用于與BSA結(jié)合用作免疫細胞化學(xué)[1]和免疫組織化學(xué)中的封閉血清。山羊血清:多用做封閉液,也有一些研究人員發(fā)現(xiàn),質(zhì)量的山羊血清可用于某些細胞的培養(yǎng)。雞血清:從屠宰供人類食用的健康雞中收集的。有研究用于血清維生素B12的放射性同位素稀釋測定 聊城胎牛血清購買血清長時間儲存在2-8℃時。
主要作用提供基本營養(yǎng)物質(zhì):氨基酸、維生素、無機物、脂類物質(zhì)、核酸衍生物等,是細胞生長必須的物質(zhì)?!裉峁┖透鞣N生長因子:胰島素、腎上腺皮質(zhì)(氫化可的松、)、類固醇(雌二醇、睪酮、孕酮)等。生長因子如成纖維細胞生長因子、表皮生長因子、血小板生長因子等。提供結(jié)合蛋白:結(jié)合蛋白作用是攜帶重要的低分子量物質(zhì),如白蛋白攜帶維生素、脂肪、以及等,轉(zhuǎn)鐵蛋白攜帶鐵。結(jié)合蛋白在細胞代謝過程中起重要作用。提供促接觸和伸展因子使細胞貼壁免受機械損傷。對培養(yǎng)中的細胞起到某些保護作用:有一些細胞,如內(nèi)皮細胞、骨髓樣細胞可以釋放蛋白酶,血清中含有抗蛋白酶成分,起到中和作用。這種作用是偶然發(fā)現(xiàn)的,則有目的的使用血清來終止胰蛋白酶的消化作用。因為胰蛋白酶已經(jīng)被廣用于貼壁細胞的消化傳代。血清蛋白形成了血清的粘度,可以保護細胞免受機械損傷,特別是在懸浮培養(yǎng)攪拌時,粘度起到重要作用。血清還含有一些微量元素和離子,他們在代謝中起重要作用,如SeO3,硒等
避免產(chǎn)生沉淀物1、解凍血清時,請按照所建議的逐步解凍法(-2℃至4℃至室溫),若血清解凍時改變的溫度太大(如-20℃至37℃,實驗顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。2、解凍血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生3、請勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會因此受到損害,而影響血清的質(zhì)量。4、血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。5、若必須做血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時搖晃均勻。溫度過高,時間過久或搖晃不均勻,都會造成沉淀物的增多。血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),該如何處理?欲去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝至無菌離心管內(nèi),以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。但不建議以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因為它可能會阻塞過濾膜。物種來源相同的血清,根據(jù)采集血時間、血源品質(zhì)也會分出不同的類別。
當(dāng)科技變得越來越先進的時候,就給人們做實驗研究帶來很大的幫助?,F(xiàn)在做細胞研究的人是由很多的,就有一部分人是做動物細胞研究,不過因為動物細胞相對較復(fù)雜,研究起來就很困難,對功能也不是很了解,動物在代謝的進程中所需的養(yǎng)分包含水、無機鹽、維生素、糖類、脂肪、氨基酸和纖維素等。這些成分動物血清都能夠供給給體外培育的動物細胞,但這些養(yǎng)分物質(zhì)(除水以外)的含量在動物血清中所占的份額很少,并且首要的養(yǎng)分物質(zhì)在動物細胞培育基的制造中現(xiàn)已增加了。所以,從這些視點看動物細胞培育參加的動物血清雖然能起到為培育的動物細胞供給養(yǎng)分物質(zhì)的效果,但這并不是首要的效果。動物細胞的代謝離不開調(diào)理。在動物體內(nèi)有兩種調(diào)理方法來保持動物代謝的穩(wěn)定,而細胞本身的代謝調(diào)理中調(diào)理的效果很關(guān)鍵。血清中供給了適量且份額適中的各式各樣的激從來確保動物細胞離體后的正常代謝。將血清從冷凍箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融。聊城胎牛血清購買
如果在37℃或更高的溫度解凍血清,血清中會出現(xiàn)沉淀。上海豬血清生產(chǎn)廠
低IgG血清(貨號:C2730-0100/0500)IgG是胎牛血清中發(fā)現(xiàn)的比較常見的抗體,低IgG血清主要通過A-Sepharose處理,使血清能夠保留原有的生物活性,同時降低血清的IgG含量,低于5μg/ml。低IgG胎牛血清適用于培養(yǎng)雜交瘤細胞。因此,低IgG胎牛血清有利于單克隆抗體的純化,用于研究抗體和病毒反應(yīng)、細胞表面抗原表位。//四環(huán)素血清(貨號:C2720-0100/0500)普通胎牛血清中一般會含有四環(huán)素(Tet),當(dāng)使用非常敏感的Tet-誘導(dǎo)的基因表達系統(tǒng)時,研究人員往往會遇到非預(yù)期的基因表達的問題,為了確保精確地基因表達,建議使用四環(huán)素調(diào)控系統(tǒng)胎牛血清,應(yīng)用于使用敏感四環(huán)素誘導(dǎo)表達系統(tǒng)的細胞培養(yǎng)(Tet-on,Tet-off),以及其它對四環(huán)素敏感的實驗中。上海豬血清生產(chǎn)廠
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