去脂胎牛血清(貨號(hào)：C3840-0050/0100/0500/0050X10)去脂胎牛血清通過固體基質(zhì)脫脂作用去除內(nèi)源性脂類、甘油三酯和膽固醇，含量只為標(biāo)準(zhǔn)胎牛血清的1/3。去脂胎牛血清在細(xì)胞培養(yǎng)中用量較多，其含有豐富的細(xì)胞生長必須的營養(yǎng)成分，常用于動(dòng)物細(xì)胞的體外培養(yǎng)，具有極為重要的功能。提供對(duì)維持細(xì)胞指數(shù)生長的，基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物以及主要的低分子營養(yǎng)物。提供結(jié)合蛋白，能識(shí)別維生素、脂類、金屬和其他等，能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱源質(zhì)結(jié)合，起到作用。是細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基上所需因子來源。起酸堿緩沖液作用。提供蛋白酶抑制劑，使在細(xì)胞傳代時(shí)剩余胰蛋白酶失活，保護(hù)細(xì)胞不受傷害。去脂胎牛血清可用于蛋白激酶CK2-α’與腺樣囊性肺轉(zhuǎn)移相關(guān)性研究：細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，要保證細(xì)胞可以順利生長和增殖，需添加10%～20%的血清，動(dòng)物血清還可起到酸堿度緩沖液的作用。云南雞血清廠家

抗血清的采集與保存家兔是很常用以產(chǎn)生抗體的動(dòng)物，因此這里主要討論兔血的收集。羊等較大動(dòng)物以頸靜脈、動(dòng)脈取血，鼠等小動(dòng)物取血可參閱有關(guān)資料。取兔血有兩種方法，一是耳緣靜脈或耳動(dòng)脈放血，一是頸動(dòng)脈入血，也可心臟采集血。取動(dòng)脈或靜脈放血時(shí)，將免放入一個(gè)特造的木匣或籠內(nèi)，耳露于箱(籠) 外，也可由另一人捉住兔身。剪去耳緣的毛，用少許二甲苯涂抹耳廓，30s后，耳血管擴(kuò)張、充血。用手輕拉耳尖，以單面剃須刀或尖的手術(shù)刀片,快速切開動(dòng)脈或靜脈，血液即流出，每次可收集30~40ml。然后用棉球壓迫止血，凝血后洗去二甲苯。二星期后，可在另一耳放血。此法可反復(fù)多次放血。頸動(dòng)脈放血時(shí)，將免仰臥，固定于兔臺(tái)，剪去頸部的毛，切開皮膚，暴露頸動(dòng)脈，插管，放血。放血過程中要嚴(yán)格按無菌要求進(jìn)行。收集的血液置于室溫下1h左右，凝固后，置4°C下，過夜 (切勿冰凍) 析出血清，離心，4000rpm，10min。在無菌條件，吸出血清，分裝 (0.05~0.2ml) ，貯于-40°C以下冰箱，或凍干后貯存于4。C冰箱保存。南京牛血清批發(fā)此沉淀可能包括磷酸鈣結(jié)晶，但不改變血清的性能，同樣血清熱滅活也會(huì)導(dǎo)致沉淀的形成。

配制方法:按比例將羊毛脂與石蠟油置容器內(nèi)，用超聲波使之混勻，高壓滅菌，置4°C下保存?zhèn)溆?。免疫前取等容積完全或不完全佐劑與免疫原溶液混合，用振蕩器混勻成乳狀，也可以在免疫前取需要量佐劑置乳缽中研磨，均勻后再邊磨邊滴加入等容積抗原液其中加卡介苗3~4mg/ml或不加加完后再繼續(xù)研磨成乳劑，潤十水水上10min內(nèi)完全不擴(kuò)散為止。為避免損失抗原，亦可用一注射器裝抗原液，另一注射器裝佐劑，二者以聚乙烯塑料管連接，然后二者來回反復(fù)抽吸，約數(shù)十分鐘后即能完全乳化。檢查合格后即以其中一注射器作注射用。免疫方法抗原劑量，頭次劑量為300~500ug，加強(qiáng)免疫的劑量約為頭次劑量為1/4左右。每2~3周加強(qiáng)免疫一次。加強(qiáng)免疫時(shí)用不完全佐劑，頭次免疫時(shí)皮下注射百日咳疫苗0.5ml,加強(qiáng)免疫時(shí)不必注射百日咳疫苗。在第2次加強(qiáng)免疫后2周，從耳緣靜脈取2~3ml血，制備血清，檢測抗體效價(jià)。如未達(dá)到預(yù)期效價(jià)，需再進(jìn)行加強(qiáng)免疫，直到滿意時(shí)為止。當(dāng)抗體效價(jià)達(dá)到預(yù)期水平時(shí)，即可放血制備抗血清。

放射免疫法以不同稀釋度的抗血清與質(zhì)量標(biāo)記抗原混合，孵育24h后，測定其結(jié)合率。通常以結(jié)合率為50%的血清稀度和為效價(jià)。如某抗血清的結(jié)合率為50%時(shí)的稀釋度為1:15000,則該血清的效價(jià)就是1:15000?？寡宓男r(jià)，除由抗血清本身的性質(zhì)決定外，還受標(biāo)記抗原的質(zhì)量、孵育時(shí)間，所用稀釋液的成分及其pH等因素的影響，在工作中必須引起注意。(2)雙向擴(kuò)散法利用大分子抗原和抗體在瓊脂平板上擴(kuò)散，兩者在相交處產(chǎn)生沉淀線，以觀察和判斷抗血清中是否有抗體及其濃度。球脂板的制備:100mlpH7.1的磷酸鹽緩沖液加到15g的瓊脂內(nèi)，于水浴中加溫?cái)嚢?，使瓊脂完全溶解，趁熱用紗布過濾，待溶液冷卻到65°C左右時(shí)，加入疊氮鈉(NaN3)，使其在溶液中的濃度為0.1%。用移液管把瓊脂放在干凈平皿或玻片上，約3mm厚，待其冷卻，完全凝固后，用打孔器打孔。中間孔內(nèi)加適量抗原(容量為50ul)周圍各孔內(nèi)分別加入50ul1:2、1:4、1:8、1:16、1:32及不稀釋的抗血清，37°下孵育24h，觀察有無沉淀線產(chǎn)生，以判斷血清的稀釋度。在一些情況下，中和毒性物質(zhì)維護(hù)細(xì)胞不受損害。

按物種分類馬血清10%馬血清可代替FBS用于支持SRBC的體外抗體應(yīng)答, 常與牛血清結(jié)合或單獨(dú)作為哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的補(bǔ)充培養(yǎng)基。豬血清豬血清在染色體研究中表現(xiàn)非常出色，可用于淋巴細(xì)胞培養(yǎng), 疫苗生產(chǎn)（生產(chǎn)支原體）, 中和脂質(zhì)體包裹的腺相關(guān)病毒（AAV）, 用于誘導(dǎo)大鼠肝纖維化, 作為酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）中的標(biāo)準(zhǔn)陰性參考。兔血清正常兔血清可作為免疫分析的阻斷劑和對(duì)照。在免疫組織化學(xué)和免疫細(xì)胞化學(xué)方面，各種研究均采用20%或1:200稀釋兔血清作為阻斷劑。包括售前的標(biāo)本收集，使用過程中不明白的地方，實(shí)驗(yàn)結(jié)束后的數(shù)據(jù)分析--云海生物。天津豬血清廠家直銷

有些時(shí)候，根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求，還要對(duì)血清進(jìn)行一些特殊的加工。云南雞血清廠家

用于免疫的動(dòng)物作免疫用的動(dòng)物有哺乳類和禽類，主要為羊、馬、家兔、猴、豬、豚鼠、雞等，實(shí)驗(yàn)室常用者為家兔、山羊和豚鼠等。動(dòng)物種類的選擇主要根據(jù)抗原的生物學(xué)特性和所要獲得抗血清數(shù)量，如一般制備抗r-免疫球蛋白抗血清，多用家兔和山羊，因動(dòng)物反應(yīng)良好，而且能夠提供足夠數(shù)量的血清，用于免疫的動(dòng)物應(yīng)適齡，健壯，無感染性疾患，比較好為///雄性，此外還需十分注意動(dòng)物的飼養(yǎng)，以消除動(dòng)物的個(gè)體差異以及在免疫過程中死亡的影響。若用兔，最好用純種新西蘭兔，一組三只，兔的體重以2~3kg為宜。二、免疫途徑免疫途徑有多種多樣，如靜脈內(nèi)、腹腔內(nèi)、肌肉內(nèi)、皮內(nèi)、皮下、淋巴結(jié)內(nèi)注射等，一般常用皮下或背部多點(diǎn)皮內(nèi)注射，每點(diǎn)注射0.1ml左右。途徑的選擇決定于抗原的生物學(xué)特性和理化特性，如、酶、等生物學(xué)活性抗原，一般不宜采用靜脈注射。云南雞血清廠家

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