常規(guī)細胞培養(yǎng)需要添加血清來維持細胞的增殖能力,盡管血清可以滿足一般細胞培養(yǎng)需求,但在進行營養(yǎng)成分優(yōu)化和標記特定成分進行研究的實驗中,仍需要去除某些特定的成分,常用的去除方法有透析。透析是將血清循環(huán)通過中空纖維,并在血清中補充生理鹽水以維持滲透壓,移除分子量小于10,000Da的小分子,如氨基酸、葡萄糖、鹽離子和未結合的蛋白等。因此透析胎牛血清主要用于關注小分子濃度的特殊研究,包括:研究蛋白質(zhì)組學、同位素標記、細胞信號傳導和報告基因分析、報告基因細胞系的篩選等。血清分離質(zhì)量的好壞,直接影響到監(jiān)測結果,所以掌握畜禽的采集血分離血清的方法尤為重要。廣東豬血清
在進行營養(yǎng)成分優(yōu)化和標記特定成分進行研究的實驗中,需要去除某些特定的背景成分,常用的去除方法有碳吸附,使用活性碳和右旋糖苷去除血清中的親脂類(lipophilic)物質(zhì)?;钚蕴磕軌蚪Y合脂溶性分子,通過碳吸附可降低血清中許多***及生長因子的濃度,如雌二醇、皮質(zhì)醇、皮質(zhì)酮、孕酮、B類維生素、睪酮及T3、T4、前列腺素等。該血清適用于上述一些分子可能干擾實驗結果的實驗中,對于那些需要這些分子的細胞培養(yǎng),也可能降低細胞生長性能。適用于:培養(yǎng)干細胞、原代細胞、神經(jīng)細胞、人類細胞、人類骨髓細胞、白血病細胞、人類胚肺成纖維細胞、人類腦神經(jīng)細胞和瘤細胞等細胞。開封牛血清廠家直銷此沉淀可能包括磷酸鈣結晶,但不改變血清的性能,同樣血清熱滅活也會導致沉淀的形成。
瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法:-20℃至-70℃低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室溫,待全部溶解后再分裝.在溶解過程中需不斷輕輕搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生.切勿直接將血清從-20℃進入37℃解凍,這樣因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝集而出現(xiàn)沉淀.一般廠商提供的血清為無菌,無需再過濾除菌.如發(fā)現(xiàn)血清有懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)液內(nèi)一起過濾,切勿直接過濾血清.血清中的沉淀物絮狀物:主要是血清中的脂蛋白變性及解凍后血清中纖維蛋白造成,這些絮狀物不會影響血清本身的質(zhì)量.可用離心3000rpm,5分鐘去除,也可不用處理.顯微鏡下"小黑點":經(jīng)過熱處理過的血清,沉淀物的形成會明顯增多.有些沉淀物在顯微鏡下觀察象"小黑點",常誤認為血清受污染.一般情況下,此小黑點不會影響細胞生長,但如果懷疑血清質(zhì)量,則應立即停止使用,更換另一批號的血清.切勿將血清在37℃放置太久,否則血清會變得渾濁,同時血清中的有效成分會破壞而影響血清質(zhì)量.
抗血清的采集與保存家兔是很常用以產(chǎn)生抗體的動物,因此這里主要討論兔血的收集。羊等較大動物以頸靜脈、動脈取血,鼠等小動物取血可參閱有關資料。取兔血有兩種方法,一是耳緣靜脈或耳動脈放血,一是頸動脈入血,也可心臟采集血。取動脈或靜脈放血時,將免放入一個特造的木匣或籠內(nèi),耳露于箱(籠) 外,也可由另一人捉住兔身。剪去耳緣的毛,用少許二甲苯涂抹耳廓,30s后,耳血管擴張、充血。用手輕拉耳尖,以單面剃須刀或尖的手術刀片,快速切開動脈或靜脈,血液即流出,每次可收集30~40ml。然后用棉球壓迫止血,凝血后洗去二甲苯。二星期后,可在另一耳放血。此法可反復多次放血。頸動脈放血時,將免仰臥,固定于兔臺,剪去頸部的毛,切開皮膚,暴露頸動脈,插管,放血。放血過程中要嚴格按無菌要求進行。收集的血液置于室溫下1h左右,凝固后,置4°C下,過夜 (切勿冰凍) 析出血清,離心,4000rpm,10min。在無菌條件,吸出血清,分裝 (0.05~0.2ml) ,貯于-40°C以下冰箱,或凍干后貯存于4。C冰箱保存。所有指標試劑盒均經(jīng)過近乎苛刻的質(zhì)檢標準。對不合格產(chǎn)品執(zhí)行零容忍--山東云海生物。
1989年左右,也有國外學者建議用豬血清取代牛血清,用于培養(yǎng)制造非洲豬瘟病毒的細胞(見《動物檢疫》1991年01期《豬血清中的牛血清白蛋白抗體引起非洲豬瘟血清學診斷的假陽性反應》),原因是牛血清中的白蛋白會干擾非洲豬瘟抗體的檢測,造成假陽性反應。其他動物源血清兔血清:兔血清通常從六個月或更小的動物身上收集,可用于與BSA結合用作免疫細胞化學[1]和免疫組織化學中的封閉血清。山羊血清:多用做封閉液,也有一些研究人員發(fā)現(xiàn),質(zhì)量的山羊血清可用于某些細胞的培養(yǎng)。雞血清:從屠宰供人類食用的健康雞中收集的。有研究用于血清維生素B12的放射性同位素稀釋測定 至于某一株細胞適應什么樣的血清濃度,還需要根據(jù)細胞特性、實驗目的做測試和調(diào)校。云南羊血清購買
所有的血清可能保留一些纖維蛋白原。廣東豬血清
2.取血方式不同胎牛血清:母牛懷孕3-8個月時,采用剖腹心臟密閉穿刺取血新生牛血清、小牛血清、供體牛血清:分別是取自新生牛(小牛)、成牛的血3.血清成分不同胎牛血清還未接觸外界,血清中所含的抗體、補體等對細胞有害的成分比較少;促細胞生長因子、促附因子、及其他活性物質(zhì)等組分也不同于其他幾類血清4.用途不同某些細胞的培養(yǎng)必須使用胎牛血清才行,如:干細胞、淋巴細胞、神經(jīng)細胞、星狀膠質(zhì)細胞等;而有些細胞需要小牛血清就可以,如:腫瘤細胞等。使用濃度也不同,一般在10%-15%,有特殊要求的濃度在20%廣東豬血清
山東云海生物科技有限公司一直專注于公司的主要產(chǎn)品為豬、雞、馬、羊、牛等動物血清,牛血清白蛋白、脫纖維牛、抗凝牛、羊全血。主要特點:原料充足、質(zhì)量可靠、無支原體、無特異性抗體、促細胞生長性能優(yōu)良。基于我們的專有動物血清技術,以及有關生命科學研究與應用的其他技術和專業(yè)知識,以我國動物疫苗生產(chǎn)行業(yè)需求為導向,通過科學的研究和試驗使得產(chǎn)品與同類進口產(chǎn)品相比性價比更高。未來,我們將一如既往地加大對研發(fā)的投入,為疫苗、抗體蛋白、診斷試劑、等行業(yè)及科研市場的發(fā)展提供質(zhì)優(yōu)的原料和高效的服務。,是一家精細化學品的企業(yè),擁有自己**的技術體系。一批專業(yè)的技術團隊,是實現(xiàn)企業(yè)戰(zhàn)略目標的基礎,是企業(yè)持續(xù)發(fā)展的動力。誠實、守信是對企業(yè)的經(jīng)營要求,也是我們做人的基本準則。公司致力于打造***的豬血清,雞血清,馬血清,牛血清。公司力求給客戶提供全數(shù)良好服務,我們相信誠實正直、開拓進取地為公司發(fā)展做正確的事情,將為公司和個人帶來共同的利益和進步。經(jīng)過幾年的發(fā)展,已成為豬血清,雞血清,馬血清,牛血清行業(yè)出名企業(yè)。