血清保存方法1.如何保存血清?血清應(yīng)該在-20℃保存。如果一次無法用完一瓶,應(yīng)該無菌分裝后冷凍保存。注意避免反復(fù)凍融。2.為什么儲存在冰箱中的血清會出現(xiàn)沉淀?有些胎牛血清產(chǎn)品沒有預(yù)老化,儲存在2-8℃時,血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。這應(yīng)該不會影響血清的質(zhì)量。推薦在-20℃儲存胎牛血清,避免反復(fù)凍融。凍融方法正確解凍方法:將血清首先置于冰箱2-8℃中12-24小時,使之緩慢部分溶解,然后再放在室溫下使之全溶。注意:溶解過程中要每隔一段時間緩慢地搖動血清使之混勻。切記:避免37℃水浴。它們的效果十分重要,細胞需求它們組成核酸和蛋白質(zhì),缺少要導(dǎo)致細胞成長不良乃至死亡。貴州牛血清批發(fā)商
可以起到營養(yǎng)物質(zhì)的作用,動物在代謝的進程中所需的養(yǎng)分包含水、無機鹽、維生素、糖類、脂肪、氨基酸和纖維素等。這些成分動物血清都能夠供給給體外培育的動物細胞,但這些養(yǎng)分物質(zhì)(除水以外)的含量在動物血清中所占的份額很少,并且首要的養(yǎng)分物質(zhì)在動物細胞培育基的制造中現(xiàn)已增加了。所以,從這些視點看動物細胞培育參加的動物血清雖然能起到為培育的動物細胞供給養(yǎng)分物質(zhì)的效果,但這并不是首要的效果。細胞貼壁鋪展在塑料培育基質(zhì)上所需因子來歷是動物細胞培育的一個很重要的用途就是用取自燒傷患者皮膚的健康細胞進行培育,能夠獲得許多本身的皮膚細胞,為大面積燒傷的患者移植。人工皮膚的制備需求培育的細胞貼附在薄膜上構(gòu)成皮膚組織,血清就為這個進程供給所需因子。廣州牛血清廠家直銷血清分離質(zhì)量的好壞,直接影響到監(jiān)測結(jié)果,所以掌握畜禽的采集血分離血清的方法尤為重要。
1989年左右,也有國外學(xué)者建議用豬血清取代牛血清,用于培養(yǎng)制造非洲豬瘟病毒的細胞(見《動物檢疫》1991年01期《豬血清中的牛血清白蛋白抗體引起非洲豬瘟血清學(xué)診斷的假陽性反應(yīng)》),原因是牛血清中的白蛋白會干擾非洲豬瘟抗體的檢測,造成假陽性反應(yīng)。其他動物源血清兔血清:兔血清通常從六個月或更小的動物身上收集,可用于與BSA結(jié)合用作免疫細胞化學(xué)[1]和免疫組織化學(xué)中的封閉血清。山羊血清:多用做封閉液,也有一些研究人員發(fā)現(xiàn),質(zhì)量的山羊血清可用于某些細胞的培養(yǎng)。雞血清:從屠宰供人類食用的健康雞中收集的。有研究用于血清維生素B12的放射性同位素稀釋測定
豬血清(貨號:C2500-0100/0500/1000)豬血清在染色體研究中表現(xiàn)非常出色,可用于淋巴細胞培養(yǎng),疫苗生產(chǎn)(生產(chǎn)支原體)中和脂質(zhì)體包裹的腺相關(guān)病毒(AAV),用于誘導(dǎo)大鼠肝纖維化,作為酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)中的標(biāo)準(zhǔn)陰性參考。//兔血清(貨號:C2520-0100/0500)正常兔血清可作為免疫分析的阻斷劑和對照。在免疫組織化學(xué)和免疫細胞化學(xué)方面,各種研究均采用20%或1:200稀釋兔血清作為阻斷劑。//羊血清(貨號:C2530-0010/0100/0500)用于生物醫(yī)學(xué)研究的大多數(shù)細胞系和原代培養(yǎng)物上,F(xiàn)BS的合適替代物,病毒分離和鑒定,病毒學(xué)研究。用作魚類細胞培養(yǎng)的有效NBCS替代物??沙晒Φ卮嫣ヅQ逶谏L培養(yǎng)基中長期用于環(huán)孢蘑菇的體外繁殖。//雞血清(貨號:C2550-0100/0500)適用于單抗研制、規(guī)模化培養(yǎng)的疫苗生產(chǎn)、生物醫(yī)學(xué)研究和診斷試劑生產(chǎn)。//驢血清(貨號:C2540-0010/0100/0500)適用于單抗研制、免疫組化、規(guī)?;囵B(yǎng)的疫苗生產(chǎn)、生物醫(yī)學(xué)研究和診斷試劑生產(chǎn)。碳水化合物,脂肪,生長因子,礦物質(zhì)及微量元素。
瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法:-20℃至-70℃低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室溫,待全部溶解后再分裝.在溶解過程中需不斷輕輕搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生.切勿直接將血清從-20℃進入37℃解凍,這樣因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝集而出現(xiàn)沉淀.一般廠商提供的血清為無菌,無需再過濾除菌.如發(fā)現(xiàn)血清有懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)液內(nèi)一起過濾,切勿直接過濾血清.血清中的沉淀物絮狀物:主要是血清中的脂蛋白變性及解凍后血清中纖維蛋白造成,這些絮狀物不會影響血清本身的質(zhì)量.可用離心3000rpm,5分鐘去除,也可不用處理.顯微鏡下"小黑點":經(jīng)過熱處理過的血清,沉淀物的形成會明顯增多.有些沉淀物在顯微鏡下觀察象"小黑點",常誤認為血清受污染.一般情況下,此小黑點不會影響細胞生長,但如果懷疑血清質(zhì)量,則應(yīng)立即停止使用,更換另一批號的血清.切勿將血清在37℃放置太久,否則血清會變得渾濁,同時血清中的有效成分會破壞而影響血清質(zhì)量.夏天在常溫下即可,冬天要在20-30℃下靜置30-45分鐘。河南豬血清購買
注意:不要以過濾的方式去除這些絮狀沉淀物,因為這可能阻塞濾膜。貴州牛血清批發(fā)商
如何進行血清滅活處理?血清請先按上述「血清應(yīng)如何融解」中的操作步驟融化和混勻,熱滅活時請將血清置于56℃水浴30分鐘。為盡量減少熱滅活對血清品質(zhì)的影響,一次滅活的血清體積不宜過大。比較好準(zhǔn)備同樣的容器裝相等體積的水(與血清相同溫度),滅活時將裝有血清和水的容器同時放入56℃水浴,在裝水的容器中放置溫度計,加熱過程中不時輕輕旋轉(zhuǎn)混勻血清,當(dāng)溫度計顯示達到56℃左右,開始計時。56℃水浴后,建議馬上轉(zhuǎn)移到冰上降溫。貴州牛血清批發(fā)商
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