為什么要熱滅活丨血清?有必要熱滅活嗎?加熱可以滅活丨血清中的補(bǔ)體系統(tǒng),使補(bǔ)體去活化。通常未滅活的補(bǔ)體能夠刺激平滑肌收縮、肥大細(xì)胞和血小板組胺的釋放、煥活淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞,同時(shí)還能夠參與溶解細(xì)胞的過(guò)程。諸多研究表明大多數(shù)細(xì)胞的培養(yǎng)無(wú)須進(jìn)行血清的熱滅活;而在免疫學(xué)研究和ES細(xì)胞、昆蟲細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞的培養(yǎng)過(guò)程中,推薦使用熱滅活丨血清。實(shí)驗(yàn)顯示,經(jīng)正確熱滅活處理的血清,對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)只有微小的促進(jìn)或完全沒(méi)有促進(jìn)作用,而通常因?yàn)楦邷靥幚碛绊懥搜宓馁|(zhì)量,造成細(xì)胞生長(zhǎng)速率降低。并且熱處理過(guò)的血清,沉淀物明顯增多,倒置顯微鏡下觀察呈“小黑點(diǎn)”,往往會(huì)使研究者誤以為是血清受到了污染,而把血清放于37℃中,沉淀物又會(huì)更增多,有會(huì)使研究者誤認(rèn)為是微生物的分裂增殖。因此我們建議若非必須,可以不進(jìn)行熱處理,既節(jié)省時(shí)間又確保質(zhì)量。在動(dòng)物血清中存在豐厚的無(wú)機(jī)鹽,還具有許多緩沖物質(zhì),在培育基的酸堿度發(fā)生變化時(shí)起到緩沖效果。重慶動(dòng)物血清生產(chǎn)廠
不管是國(guó)產(chǎn)還是進(jìn)口血清,都是不測(cè)的(無(wú)四環(huán)素胎牛血去除外)。國(guó)外,的使用很嚴(yán)格,用量也很少,每頭奶牛的產(chǎn)品包括血清都可以溯源的,因此可以做到胎牛血清中不含或含量極低;國(guó)內(nèi),的濫用已成了普遍現(xiàn)象,血清中殘留很高,對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)極為不利,這是國(guó)產(chǎn)血清質(zhì)量差的根本原因。血源市場(chǎng)上的血清血源主要分為中國(guó)、北美、南美和澳洲。1、國(guó)產(chǎn)血清質(zhì)量差,這是公認(rèn)的,主要原因并不是生產(chǎn)廠家的責(zé)任,而是天然環(huán)境差和的大量使用。國(guó)內(nèi)環(huán)境污染嚴(yán)重,同時(shí)飼養(yǎng)過(guò)程中極其濫用,有毒有害物質(zhì)會(huì)大量殘留在血清中,比較終不利于細(xì)胞的生長(zhǎng)。2、南美血清,來(lái)源很多,如Bioind的巴拿馬、Gibco的烏拉圭、巴西等,這些血清由于采集血的不可控性,質(zhì)量參差不齊,當(dāng)然,相對(duì)于國(guó)內(nèi)血清來(lái)說(shuō)好的多。另外,國(guó)內(nèi)銷售的南美血清大多顏色鮮紅,如Sera Pro、Bioind、Gibco、Hylone等品牌,但阿根廷的血清例外,這可能和各國(guó)的采集血、生產(chǎn)工藝有關(guān)。寧波牛血清價(jià)格動(dòng)物不同,分離出的血清也會(huì)有所不同。
為什么儲(chǔ)存在冰箱中的胎牛血清會(huì)出現(xiàn)沉淀?儲(chǔ)存在2-8℃時(shí),血清中的各種蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)和脂蛋白可能聚集而形成沉淀或可見的混濁物。這些沉淀的產(chǎn)生不會(huì)影響血清的質(zhì)量。推薦在-20℃儲(chǔ)存胎牛血清,避免反復(fù)凍融。如何避免沉淀物的產(chǎn)生?我們建議您在使用血清的時(shí)候,注意下列操作:?解凍血清時(shí),請(qǐng)按照上述逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫),若血清解凍時(shí)溫度變化太大(如-20℃至37℃),實(shí)驗(yàn)顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。?解血清時(shí),請(qǐng)隨時(shí)輕輕地將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。?請(qǐng)勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清會(huì)變得混濁,同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會(huì)因此受到損害,影響血清的質(zhì)量。?血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,無(wú)需做此步驟。?若必須做血清的熱滅活,請(qǐng)遵守56℃、30分鐘的原則,并且隨時(shí)搖晃均勻。溫度過(guò)高,時(shí)間過(guò)久或搖晃不均勻,都會(huì)造成沉淀物的增多。
內(nèi)含量越低,級(jí)別越高,以胎牛血清為例:血清中內(nèi)含量≤10EU/ml時(shí),此血清為特級(jí)胎牛血清;血清中內(nèi)含量﹥10EU/ml,≤25EU/ml時(shí),此血清為優(yōu)級(jí)胎牛血清;血清中內(nèi)含量≥25EU/ml時(shí),此血清為標(biāo)準(zhǔn)級(jí)胎牛血清;不同廠家,不同批次的血清,內(nèi)數(shù)值也可能有較大差異,因此很多血清廠家在名稱上已不注明級(jí)別。但使用者仍可通過(guò)檢測(cè)報(bào)告,自行甄別挑選,*胎牛血清,是由胎牛血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物,含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長(zhǎng)因子、、無(wú)機(jī)物等,其中大部分是已知的,小部分不清楚,這些物質(zhì)對(duì)促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)或抑制生長(zhǎng)活性是達(dá)到生理平衡的。其中不含細(xì)胞、纖維蛋白和凝血因子。*胎牛血清在細(xì)胞培養(yǎng)方面通常優(yōu)于其他類型的血清。由于胎牛從未接觸過(guò)外界,與新生牛和小牛血清相比,抗體含量明顯降低,抗體與培養(yǎng)細(xì)胞發(fā)生交叉反應(yīng)的風(fēng)險(xiǎn)也較低,是理想的細(xì)胞生長(zhǎng)補(bǔ)充劑。*為避免不同供體間的個(gè)體差異,能夠更好保證實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的連續(xù)性和穩(wěn)定,應(yīng)使用同批次血清作用是提供基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、和各種生長(zhǎng)因子、結(jié)合蛋白、促接觸和生長(zhǎng)因子。
馬血清的作用:1.提供基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì):氨基酸、維生素、無(wú)機(jī)物、脂類物質(zhì)、核酸衍生物等,是細(xì)胞生長(zhǎng)需要的物質(zhì)。2.提供和各種生長(zhǎng)因子:胰島素、腎上腺皮質(zhì)()、類固醇(雌二醇、睪酮、孕酮)等。生長(zhǎng)因子如成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子、表皮生長(zhǎng)因子、血小板生長(zhǎng)因子等。3.提供結(jié)合蛋白:結(jié)合蛋白作用是攜帶重要的低分子量物質(zhì),如白蛋白攜帶維生素、脂肪、以及等,轉(zhuǎn)鐵蛋白攜帶鐵。結(jié)合蛋白在細(xì)胞代謝過(guò)程中起重要作用。4.提供促接觸和伸展因子使細(xì)胞貼壁免受機(jī)械損傷。5.對(duì)培養(yǎng)中的細(xì)胞起到某些保護(hù)作用:有一些細(xì)胞,如內(nèi)皮細(xì)胞、骨髓樣細(xì)胞可以釋放蛋白酶,血清中含有抗蛋白酶成分,起到中和作用。這種作用是偶然發(fā)現(xiàn)的,現(xiàn)在則有目的的使用血清來(lái)終止胰蛋白酶的消化作用。因?yàn)橐鹊鞍酌敢呀?jīng)被用于貼壁細(xì)胞的消化傳代。血清蛋白形成了血清的粘度,可以保護(hù)細(xì)胞免受機(jī)械損傷,特別是在懸浮培養(yǎng)攪拌時(shí),粘度起到重要作用。動(dòng)物血清供應(yīng)細(xì)胞生計(jì)和增殖所必需的生長(zhǎng)調(diào)理因子。南通雞血清訂購(gòu)
供應(yīng)蛋白酶克制劑,維護(hù)細(xì)胞免受死細(xì)胞開釋的蛋白酶的損害。重慶動(dòng)物血清生產(chǎn)廠
關(guān)于熱滅活胎牛血清不推薦熱滅活。熱滅活一般是指在做免疫相關(guān)的試驗(yàn)中,通過(guò)加熱滅活掉血清中的補(bǔ)體,以避免對(duì)免疫試驗(yàn)的影響。在胎牛血清中,由于胎齡原因,尚未形成完整的補(bǔ)體系統(tǒng),因此,胎牛血清不會(huì)真正干預(yù)免疫試驗(yàn)。故不需滅活。并且,熱滅活反而可能導(dǎo)致胎牛血清中部分重要的生長(zhǎng)因子的活性衰減,進(jìn)而影響細(xì)胞培養(yǎng)效果。若針對(duì)某些特殊試驗(yàn),對(duì)于胎牛血清一定要做熱滅活,國(guó)際上推薦熱滅活的方法:40℃水浴,20min。有下列情況者,對(duì)血清內(nèi)應(yīng)格外留意篩選:1.干細(xì)胞:干細(xì)胞對(duì)內(nèi)非常敏感,如果血清中內(nèi)≥3EU/ml時(shí),干細(xì)胞很容易死亡。選擇質(zhì)量血清非常重要2.免疫細(xì)胞時(shí):,過(guò)高的內(nèi)可誘導(dǎo)免疫細(xì)胞釋放炎癥因子,抑制小鼠紅細(xì)胞集落的形成等。3.基因敲除相關(guān)的細(xì)胞實(shí)驗(yàn),培養(yǎng)的細(xì)胞要盡可能保持其原始狀態(tài),任何引導(dǎo)細(xì)胞衰老或凋亡的試劑,都會(huì)讓后續(xù)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果“失之毫厘,謬以千里”。重慶動(dòng)物血清生產(chǎn)廠
山東云海生物科技有限公司成立于2015-03-09,同時(shí)啟動(dòng)了以云海生物為主的豬血清,雞血清,馬血清,牛血清產(chǎn)業(yè)布局。是具有一定實(shí)力的精細(xì)化學(xué)品企業(yè)之一,主要提供豬血清,雞血清,馬血清,牛血清等領(lǐng)域內(nèi)的產(chǎn)品或服務(wù)。隨著我們的業(yè)務(wù)不斷擴(kuò)展,從豬血清,雞血清,馬血清,牛血清等到眾多其他領(lǐng)域,已經(jīng)逐步成長(zhǎng)為一個(gè)獨(dú)特,且具有活力與創(chuàng)新的企業(yè)。山東云海生物科技有限公司業(yè)務(wù)范圍涉及公司的主要產(chǎn)品為豬、雞、馬、羊、牛等動(dòng)物血清,牛血清白蛋白、脫纖維牛、抗凝牛、羊全血。主要特點(diǎn):原料充足、質(zhì)量可靠、無(wú)支原體、無(wú)特異性抗體、促細(xì)胞生長(zhǎng)性能優(yōu)良?;谖覀兊膶S袆?dòng)物血清技術(shù),以及有關(guān)生命科學(xué)研究與應(yīng)用的其他技術(shù)和專業(yè)知識(shí),以我國(guó)動(dòng)物疫苗生產(chǎn)行業(yè)需求為導(dǎo)向,通過(guò)科學(xué)的研究和試驗(yàn)使得產(chǎn)品與同類進(jìn)口產(chǎn)品相比性價(jià)比更高。未來(lái),我們將一如既往地加大對(duì)研發(fā)的投入,為疫苗、抗體蛋白、診斷試劑、等行業(yè)及科研市場(chǎng)的發(fā)展提供質(zhì)優(yōu)的原料和高效的服務(wù)。等多個(gè)環(huán)節(jié),在國(guó)內(nèi)精細(xì)化學(xué)品行業(yè)擁有綜合優(yōu)勢(shì)。在豬血清,雞血清,馬血清,牛血清等領(lǐng)域完成了眾多可靠項(xiàng)目。