為什么要熱滅活丨血清?加熱可以滅活補(bǔ)體系統(tǒng)。煥活的補(bǔ)體參與溶解細(xì)胞事件,刺激平滑肌收縮,細(xì)胞和血小板釋放組胺,煥活淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞,在免疫學(xué)研究,培養(yǎng)ES細(xì)胞,昆蟲細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞時(shí),推薦使用熱滅活丨血清。有必要做熱滅活嗎?實(shí)驗(yàn)顯示,經(jīng)過(guò)正確處理的熱滅活丨血清,對(duì)大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要的。經(jīng)此處理過(guò)的血清對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)只有微小的促進(jìn),或完全沒(méi)有任何作用,甚至通常因?yàn)楦邷靥幚碛绊懥搜宓馁|(zhì)量,而造成細(xì)胞生長(zhǎng)速率的降低。而經(jīng)過(guò)熱處理的血清,沉淀物的形成會(huì)明顯的增多,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察,像是“小黑點(diǎn)”,常常會(huì)讓研究者誤以為是血清遭受污染,而把血清放在37℃環(huán)境中,又會(huì)使此沉淀物更增多,使研究者誤認(rèn)為是微生物的分裂擴(kuò)增。云海生物致力于為客戶提供優(yōu)良的產(chǎn)品和專業(yè)的服務(wù),我們的專業(yè)團(tuán)隊(duì)將竭誠(chéng)為您解答疑問(wèn)。四川羊血清廠家
血清的使用1、血清的熱滅活:進(jìn)行熱滅活的目的是,利用較高的溫度使補(bǔ)體失活。由于胎牛血清會(huì)嚴(yán)格控制采集血時(shí)間為5-8月齡的胎牛,此時(shí)還未形成完整的補(bǔ)體系統(tǒng),因此,合格的胎牛血清,是不需要滅活的。但是實(shí)驗(yàn)中如果需要新生牛血清、小牛血清、豬血清或馬血清這些血清時(shí),則需要根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求而定。根據(jù)血清廠家多年來(lái)總結(jié)的經(jīng)驗(yàn),常規(guī)解凍后,40℃水浴加熱20分鐘即可,能夠盡可能地保留營(yíng)養(yǎng)成分。2、細(xì)胞培養(yǎng)的應(yīng)用:對(duì)于新的細(xì)胞系或從無(wú)血清培養(yǎng)轉(zhuǎn)變到胎牛血清培養(yǎng)的細(xì)胞系,需要進(jìn)行適應(yīng)期。在初始適應(yīng)期,可以將血清濃度逐漸降低,直到細(xì)胞適應(yīng)無(wú)血清培養(yǎng)為止。3、關(guān)注血清的批次:相同品牌的胎牛血清,在蛋白質(zhì)含量等方面,可能會(huì)存在批次差異,因此在同一實(shí)驗(yàn)中好使用來(lái)自同一批次的血清,以減少變異性。如果不得不使用不同批次的胎牛血清,請(qǐng)進(jìn)行驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)以確保結(jié)果的可重復(fù)性。海淀區(qū)羊血清培養(yǎng)基選擇云海生物的雞血清,就是選擇了高質(zhì)量與穩(wěn)定性,為您的實(shí)驗(yàn)提供可靠保障。
為什么要熱滅活的血清是否有必要做熱滅活?●熱滅活加熱可以滅活補(bǔ)體系統(tǒng)。煥活的補(bǔ)體參與溶解細(xì)胞事件,刺激平滑肌收縮,細(xì)胞和血小板釋放組胺,煥活淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。在免疫學(xué)研究,培養(yǎng)ES細(xì)胞,昆蟲細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞時(shí),推薦使用熱滅活胎牛血清?!袷欠裼斜匾鰺釡缁顚?shí)驗(yàn)顯示,經(jīng)過(guò)正確處理的熱滅活胎牛血清,對(duì)大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要的。經(jīng)此處理過(guò)的胎牛血清對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)只有微小的促進(jìn),或完全沒(méi)有任何作用,甚至通常因?yàn)楦邷靥幚碛绊懥颂ヅQ宓馁|(zhì)量,而造成細(xì)胞生長(zhǎng)速率的降低。而經(jīng)過(guò)熱處理的胎牛血清,沉淀物的形成會(huì)明顯的增多,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察,像是“小黑點(diǎn)”,常常會(huì)讓研究者誤以為是胎牛血清遭受污染,而把胎牛血清放在37℃環(huán)境中,又會(huì)使此沉淀物更增多,使研究者誤認(rèn)為是微生物的分裂擴(kuò)增。因此我們建議您,若非必須,您可以不需要做熱處理這一步。如此一來(lái),不但節(jié)省您寶貴的時(shí)間,更確保胎牛血清的質(zhì)量。
血清出現(xiàn)沉淀的問(wèn)題:血清非人工產(chǎn)品,有些東西沉淀出來(lái)系自然現(xiàn)象;纖維蛋白原、鹽析出,如磷酸鈣等;膽固醇和脂肪酸;蛋白析出。沉淀在下列情況下還會(huì)增加:熱滅活、37℃培養(yǎng)(常常由此引發(fā)歧異)、反復(fù)凍融、熔化中沒(méi)有搖勻、gamma照射、長(zhǎng)期存放在2-8°C。另外我們還發(fā)現(xiàn):血清加入到RPMI1640中時(shí),沉淀往往會(huì)發(fā)生或增加:pH升高時(shí),沉淀會(huì)增加;在培養(yǎng)板或培養(yǎng)皿中,因?yàn)榕囵B(yǎng)基的蒸發(fā)也會(huì)導(dǎo)致沉淀的增加。如何避免血清中產(chǎn)生沉淀“”按如下操作可避免沉淀的產(chǎn)生:(1)解凍血清時(shí),請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。(2)血清分裝凍存時(shí),須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一。(3)勿直接由-20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。(4)勿將血清置于37℃太久,否則血清會(huì)變得渾濁,同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成份也會(huì)因此受到破壞,從而影響血清的品質(zhì);(5)血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無(wú)須做此步驟。(6)若必須做血清的熱滅活,請(qǐng)遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時(shí)搖晃均勻。溫度過(guò)高,時(shí)間過(guò)久或搖晃不均勻,都會(huì)造成沉淀物的增多。云海生物提供的馬血清,源自健康馬匹,保證純凈無(wú)污染,為您的研究提供可靠支持。
胎牛血清功能及作用牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量很大的天然培養(yǎng)基,含有豐富的細(xì)胞生長(zhǎng)必需的營(yíng)養(yǎng)成分,常用于動(dòng)物細(xì)胞的體外培養(yǎng),具有極為重要的功能。1.提供對(duì)維持細(xì)胞指數(shù)生長(zhǎng),基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒(méi)有或量很少的營(yíng)養(yǎng)物,以及主要的低分子營(yíng)養(yǎng)物。2.提供結(jié)合蛋白,能識(shí)別維生素、脂類、金屬和其他等,能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。3.有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,起到作用。4.是細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來(lái)源。5.起酸堿度緩沖液作用。6.提供蛋白酶抑制劑,使在細(xì)胞傳代時(shí)使剩余胰蛋白酶失活,保護(hù)細(xì)胞不受傷害。血清,在血漿中除去纖維蛋白分離出的淡黃色透明液體或指纖維蛋白已被除去的血漿。其主要作用:1.血清提供:營(yíng)養(yǎng)和能量來(lái)源;生長(zhǎng)和粘附因子,肽和類固醇;載體蛋白。2.保護(hù)細(xì)胞:免受蛋白酶、毒性物質(zhì)、PH值波動(dòng)、機(jī)械剪切力、氧化及自由基的損傷。云海生物的雞血清,源自健康雞只,經(jīng)過(guò)嚴(yán)格篩選與提取,保證每一滴都純凈無(wú)比。湖南雞血清生產(chǎn)廠家
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兔血清:兔血清通常從六個(gè)月或更小的動(dòng)物身上收集,可用于與BSA結(jié)合用作免疫細(xì)胞化學(xué)[1]和免疫組織化學(xué)中的封閉血清[2]。山羊血清:多用做封閉液,也有一些研究人員發(fā)現(xiàn),高質(zhì)量的山羊血清可用于某些細(xì)胞的培養(yǎng)[3][4]。雞血清:從屠宰供人類食用的健康雞中收集的。有研究用于血清維生素B12的放射性同位素稀釋測(cè)定,精選內(nèi)更低批次(≤3EU/ml),原裝進(jìn)口。是細(xì)胞典藏等重大項(xiàng)目十幾年的穩(wěn)定供應(yīng)品牌。新批次在試用前,提供試用服務(wù),養(yǎng)細(xì)胞更放心。每個(gè)批次產(chǎn)量800-2000升,試用滿意的實(shí)驗(yàn)室批號(hào)優(yōu)先鎖定,保證大多數(shù)項(xiàng)目?jī)赡瓴恍钃Q批次,細(xì)胞試驗(yàn)數(shù)據(jù)穩(wěn)定。每年按廠家生產(chǎn)順序,會(huì)有多批次平行供應(yīng),每個(gè)實(shí)驗(yàn)室專屬批號(hào)管理,保證供貨穩(wěn)定。為Ausbian血清用戶提供申報(bào)支持,具有完整的檢測(cè)報(bào)告,為各類項(xiàng)目的申報(bào)提供支持。(同時(shí)為血清VIP用戶在支原體檢測(cè)、方法學(xué)驗(yàn)證等方面,提供更多延伸性技術(shù)幫助。)針對(duì)特殊科研項(xiàng)目,可提供3-5個(gè)平行批次,讓試驗(yàn)人有更多選擇空間。為Ausbian血清提供代儲(chǔ)存服務(wù),為儲(chǔ)存空間不足的實(shí)驗(yàn)室提供可靠的血清倉(cāng)儲(chǔ)保護(hù),按要求隨時(shí)發(fā)貨。四川羊血清廠家