酶標(biāo)儀的發(fā)展歷程 酶標(biāo)儀的前世今生 1966年,美國(guó)的Nakane和Pierce及法國(guó)的Avrameas和Uriel同時(shí)報(bào)道了以新的標(biāo)記物——辣根過(guò)氧化酶(HRP)替代熒光素,定位組織中抗原的酶免疫組織化學(xué)技術(shù)(EIH)。1971年,Engvall和Perlmann在酶免疫組織化學(xué)的基礎(chǔ)上,又發(fā)展出一種酶標(biāo)固相免疫測(cè)定技術(shù),即酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA),成為繼放射免疫分析技術(shù)、熒光免疫之后的第三大標(biāo)記免疫分析技術(shù)。70年代中期,隨著雜交瘤技術(shù)的發(fā)展,發(fā)明了單克隆抗體制備技術(shù),將其應(yīng)用于酶免疫測(cè)定中,提高了其靈敏度和特異性,使一步法雙抗體夾心法等酶免疫測(cè)定方法相繼出現(xiàn)。 酶免疫分析技術(shù)是將酶催化的放大作用與抗原、抗體特異性反應(yīng)相結(jié)合的一種微量分析技術(shù)。酶標(biāo)記抗體或抗原后,既不影響抗體或抗原的免疫反應(yīng)特異性,也不改變酶本身的催化活性,在相應(yīng)的反應(yīng)底物參與下,標(biāo)記的酶水解底物或顯色,或使供氫體由無(wú)色的還原型轉(zhuǎn)變?yōu)橛猩难趸停溆猩a(chǎn)物可以通過(guò)肉眼、分光光度計(jì)或顯微鏡觀察或測(cè)定。上海穩(wěn)贏機(jī)電設(shè)備的全自動(dòng)酶標(biāo)儀可以自動(dòng)計(jì)算、分析樣品的數(shù)據(jù),并生成圖表、報(bào)告等結(jié)果。浙江本地酶標(biāo)儀共同合作
全自動(dòng)酶標(biāo)儀的優(yōu)點(diǎn)全自動(dòng)酶標(biāo)儀具有以下優(yōu)點(diǎn):高精度:全自動(dòng)酶標(biāo)儀采用先進(jìn)的測(cè)試技術(shù),能夠準(zhǔn)確地測(cè)量樣品的吸光度,從而得到準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。高效率:全自動(dòng)酶標(biāo)儀可以同時(shí)處理多個(gè)樣品,提高了實(shí)驗(yàn)效率。自動(dòng)化:全自動(dòng)酶標(biāo)儀的各個(gè)系統(tǒng)都可以自動(dòng)運(yùn)行,減少了人為操作帶來(lái)的誤差,提高了實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性。智能化:全自動(dòng)酶標(biāo)儀具有先進(jìn)的數(shù)據(jù)分析系統(tǒng),可以自動(dòng)計(jì)算、分析樣品的數(shù)據(jù),并生成圖表、報(bào)告等結(jié)果,使用戶可以更方便地進(jìn)行數(shù)據(jù)整理和分析。安全性:全自動(dòng)酶標(biāo)儀的設(shè)計(jì)和使用符合實(shí)驗(yàn)室安全規(guī)范,能夠保證實(shí)驗(yàn)過(guò)程的安全性。江西放心選酶標(biāo)儀設(shè)備全自動(dòng)酶標(biāo)儀的數(shù)據(jù)分析系統(tǒng)可以自動(dòng)計(jì)算、分析樣品的數(shù)據(jù),并生成圖表、報(bào)告等結(jié)果。
酶標(biāo)儀應(yīng)用在臨床檢驗(yàn)、生物學(xué)研究、農(nóng)業(yè)科學(xué)、食品和環(huán)境科學(xué)中,由于大量的酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒的應(yīng)用,使得酶標(biāo)儀在生殖保健領(lǐng)域中應(yīng)用越來(lái)越常見(jiàn),同時(shí)促進(jìn)了生殖健康技術(shù)水平提高。 國(guó)內(nèi)多家檢測(cè)機(jī)構(gòu),如衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心和計(jì)劃生育系統(tǒng)等多次強(qiáng)調(diào)酶標(biāo)儀的重要性,并要求酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑應(yīng)使用酶標(biāo)儀判讀,酶免試劑的質(zhì)控也應(yīng)使用酶標(biāo)儀,并提供酶標(biāo)儀測(cè)定的原始數(shù)據(jù),而各廠家的試劑盒說(shuō)明書(shū)沒(méi)有是讓用目測(cè)的。同時(shí)酶免檢測(cè)的項(xiàng)目往往是一些實(shí)質(zhì)性的交叉?zhèn)魅竞筒∽儯ㄈ纾焊窝住?yōu)生優(yōu)育等),判讀更要求嚴(yán)謹(jǐn),由誤診引起的糾紛很難處理。另外,住院手術(shù)病人術(shù)前的丙肝EIA試劑檢測(cè)是避免因輸血引起交叉?zhèn)魅疽l(fā)的醫(yī)療事故糾紛的必要手段,正逐漸被許多單位所采用。
標(biāo)記的多樣化與多功能酶標(biāo)儀應(yīng)運(yùn)而生 標(biāo)記物的多樣化,是免疫技術(shù)的發(fā)展和進(jìn)步的一個(gè)方面。免疫檢測(cè)標(biāo)記物由本初的放射同位素,發(fā)展為安全無(wú)污染的辣根過(guò)氧化物酶(HRP)和磷酸酯酶,并進(jìn)一步擴(kuò)展到熒光素、稀土元素(目前主要是Eu)、上轉(zhuǎn)換等;底物溶液也對(duì)應(yīng)的由酶催化下產(chǎn)生顏色效應(yīng)的底物發(fā)展為產(chǎn)生光子或熒光信號(hào),獲得更加靈敏和穩(wěn)定的信號(hào)和更寬的線性范圍,并相應(yīng)產(chǎn)生了更多檢測(cè)模式。 多種檢測(cè)模式整合在單臺(tái)儀器上,多功能酶標(biāo)儀就運(yùn)用而生了,可實(shí)現(xiàn)對(duì)吸光度、時(shí)間分辨熒光(TRF)、化學(xué)發(fā)光(Lum)及非標(biāo)記檢測(cè)技術(shù)熒光偏振(FP) 、熒光強(qiáng)度(FI,F(xiàn)RET)等兩種或多種模式的檢測(cè)。此外,應(yīng)用于分子互作的BRET/NANO-BIT(生物發(fā)光共振能量轉(zhuǎn)移技術(shù))、熒光共振能量轉(zhuǎn)移技術(shù)(TR-FRET)和ALPHA等,近些年也被應(yīng)用于多功能酶標(biāo)儀中。而且多功能酶標(biāo)儀不限于微孔板檢測(cè),還可內(nèi)置比色皿插槽。因此,酶標(biāo)儀目前已成為一個(gè)廣義的定義。上海穩(wěn)贏機(jī)電設(shè)備的酶標(biāo)儀是一種單通道自動(dòng)進(jìn)樣的酶標(biāo)儀工作原理圖。
中心定位 儀器會(huì)自動(dòng)對(duì)酶標(biāo)孔進(jìn)行中心定位,中心定位是要消除酶標(biāo)孔底的凸凹引起的厚薄不均帶來(lái)檢測(cè)的不準(zhǔn)確。在對(duì)每一個(gè)酶標(biāo)儀進(jìn)行檢測(cè)時(shí),儀器其實(shí)要進(jìn)行35個(gè)點(diǎn)的測(cè)量,選取偏中間的5個(gè)點(diǎn)的均值為本孔的OD值。 光源的參照通道 參照通道是用來(lái)校準(zhǔn)由于電壓不穩(wěn)或燈泡磨損帶來(lái)的影響。 用途和其它提示 用于ELISA試劑的測(cè)定,可用于各種實(shí)驗(yàn)室,包括臨床實(shí)驗(yàn)室。 質(zhì)量控制 質(zhì)量控制是試劑檢測(cè)的重要因素。請(qǐng)按照試劑說(shuō)明書(shū)的要求進(jìn)行質(zhì)量控制。 空白校正 有一些試劑盒的說(shuō)明書(shū)將空白孔設(shè)置為空氣,其它大多數(shù)空白孔的設(shè)置是用試劑來(lái)設(shè)置的,請(qǐng)按照試劑盒的說(shuō)明書(shū)要求進(jìn)行。購(gòu)買(mǎi)全自動(dòng)酶標(biāo)儀推薦廠家上海穩(wěn)贏機(jī)電設(shè)備。湖北品牌酶標(biāo)儀銷售電話
上海穩(wěn)贏機(jī)電設(shè)備的全自動(dòng)酶標(biāo)儀質(zhì)量怎么樣?浙江本地酶標(biāo)儀共同合作
三、通道差與孔間差檢測(cè) 方法及其表達(dá)方式:①通道差檢測(cè):取一只酶標(biāo)板小孔杯(杯底須光滑、透明、無(wú)劃痕、無(wú)污染)以酶標(biāo)板架作載體,分別加入三種不同濃度的甲基橙溶液200u*后置于8個(gè)通道的相應(yīng)位置,蒸餾水調(diào)零,采用雙波長(zhǎng)(測(cè)定波長(zhǎng)490nm,參比波長(zhǎng)630或650nm,以下均相同)連續(xù)測(cè)三次,觀察其不同通道之間測(cè)量結(jié)果的一致性可用極差值來(lái)表示其通道差。②孔間差的測(cè)量:選擇同一廠家、同一批號(hào)酶標(biāo)板條(8條共96孔)分別加入200ul甲基橙溶液(吸光度調(diào)0.065~0.070A)先后置于同一通道,蒸餾水調(diào)零,采用雙波長(zhǎng)檢測(cè),其誤差大小用±1.96s衡量。 四、零點(diǎn)飄移 方法:取八只小孔杯,分別置于八個(gè)通道的相應(yīng)位置,均加入200ul蒸餾水并調(diào)零,采用雙波長(zhǎng)或單波長(zhǎng)(490nm)每隔30min測(cè)定一次,觀察8個(gè)通道4h內(nèi)的吸光度變化。其與零點(diǎn)的差值即為零點(diǎn)飄移。浙江本地酶標(biāo)儀共同合作