微孔檢測(cè)與成像技術(shù)的結(jié)合 隨著人類對(duì)生命科學(xué)領(lǐng)域研究的重視,使得更多的檢測(cè)技術(shù)和檢測(cè)儀器向生命分析領(lǐng)域傾斜。熒光成像技術(shù)或共聚焦(Confocal)與微孔檢測(cè)結(jié)合,為生命科學(xué),尤其是細(xì)胞研究創(chuàng)造了技術(shù)平臺(tái)。微孔板檢測(cè)和成像技術(shù)的結(jié)合,為酶標(biāo)儀賦予了整體成像、高內(nèi)涵成像等新的復(fù)合功能。 酶標(biāo)儀的分類與發(fā)展 酶標(biāo)儀主要有兩種分類方法,按照濾光(單色)方式的不同,可分為:濾光片式酶標(biāo)儀、光柵式酶標(biāo)儀,帝肯、美谷等廠家還推出了“濾片+光柵”模式酶標(biāo)儀;按功能劃分,可分為單功能酶標(biāo)儀和多功能酶標(biāo)儀。這兩大類型的劃分是存在一定的交叉性。另外根據(jù)通道的個(gè)數(shù),可以將酶標(biāo)儀分為單通道和多通道兩種類型,單通道又有自動(dòng)和手動(dòng)兩種之分。上海穩(wěn)贏機(jī)電設(shè)備的酶標(biāo)儀是一種高效、準(zhǔn)確的生物檢測(cè)儀器。浙江質(zhì)量酶標(biāo)儀價(jià)格多少
4.吸光度測(cè)定的重復(fù)性 波長(zhǎng)選擇同(3),在酶標(biāo)板的一排加注空白溶液,第二排加入濃度為200rig/ml的重鉻酸鉀溶液,重復(fù)測(cè)定5次。記錄每次測(cè)定的第二排吸光度值,取第二排任一孔吸光度值與各次對(duì)應(yīng)孔吸光度值。按下式計(jì)算重復(fù)性: 5.酶標(biāo)儀的線性 選用540nm波長(zhǎng),將標(biāo)稱值0.5,1.0A中性濾光片分別放入專業(yè)測(cè)試板樣本位置中,以空氣為參比,各重復(fù)測(cè)定3次;然后將以上兩片中性濾光片疊加后置于專業(yè)測(cè)試板的同一孔位中,重復(fù)測(cè)定3次。 6.測(cè)定速度的檢定 選用492nm波長(zhǎng),放入96孔酶標(biāo)板進(jìn)行測(cè)定,用秒表計(jì)測(cè)儀器打印出全部數(shù)據(jù)的時(shí)間。 酶標(biāo)儀除了在選購(gòu)時(shí),應(yīng)盡可能自檢外,在使用中也應(yīng)定期檢定,以保證酶標(biāo)儀測(cè)定的有效性江西多功能酶標(biāo)儀性能上海穩(wěn)贏機(jī)電設(shè)備的全自動(dòng)酶標(biāo)儀可以同時(shí)處理多個(gè)樣品,部分提高了實(shí)驗(yàn)效率。
標(biāo)記的多樣化與多功能酶標(biāo)儀應(yīng)運(yùn)而生 標(biāo)記物的多樣化,是免疫技術(shù)的發(fā)展和進(jìn)步的一個(gè)方面。免疫檢測(cè)標(biāo)記物由本初的放射同位素,發(fā)展為安全無(wú)污染的辣根過(guò)氧化物酶(HRP)和磷酸酯酶,并進(jìn)一步擴(kuò)展到熒光素、稀土元素(目前主要是Eu)、上轉(zhuǎn)換等;底物溶液也對(duì)應(yīng)的由酶催化下產(chǎn)生顏色效應(yīng)的底物發(fā)展為產(chǎn)生光子或熒光信號(hào),獲得更加靈敏和穩(wěn)定的信號(hào)和更寬的線性范圍,并相應(yīng)產(chǎn)生了更多檢測(cè)模式。 多種檢測(cè)模式整合在單臺(tái)儀器上,多功能酶標(biāo)儀就運(yùn)用而生了,可實(shí)現(xiàn)對(duì)吸光度、時(shí)間分辨熒光(TRF)、化學(xué)發(fā)光(Lum)及非標(biāo)記檢測(cè)技術(shù)熒光偏振(FP) 、熒光強(qiáng)度(FI,F(xiàn)RET)等兩種或多種模式的檢測(cè)。此外,應(yīng)用于分子互作的BRET/NANO-BIT(生物發(fā)光共振能量轉(zhuǎn)移技術(shù))、熒光共振能量轉(zhuǎn)移技術(shù)(TR-FRET)和ALPHA等,近些年也被應(yīng)用于多功能酶標(biāo)儀中。而且多功能酶標(biāo)儀不限于微孔板檢測(cè),還可內(nèi)置比色皿插槽。因此,酶標(biāo)儀目前已成為一個(gè)廣義的定義。
選購(gòu)指南 酶標(biāo)儀(MicroplateReader)是對(duì)酶聯(lián)免疫檢測(cè)(EIA)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行讀取和分析的專業(yè)儀器。酶聯(lián)免疫反應(yīng)通過(guò)偶聯(lián)在抗原或抗體上的酶催化顯色底物進(jìn)行的,反應(yīng)結(jié)果以顏色顯示,通過(guò)顯色的深淺即吸光度值的大小就可以判斷標(biāo)本中待測(cè)抗體或抗原的濃度。 國(guó)內(nèi)許多計(jì)生站系統(tǒng)開(kāi)展了酶免檢測(cè)項(xiàng)目,如:乙肝五項(xiàng)、優(yōu)生優(yōu)育系列檢測(cè)等。過(guò)去多數(shù)采用目測(cè)方法,報(bào)出的結(jié)果缺乏科學(xué)的依據(jù)。例如:某弓形蟲(chóng)檢測(cè)試劑盒中,臨界值規(guī)定為:陰性對(duì)照品的OD值×2.5,通過(guò)目測(cè)無(wú)法判斷標(biāo)本孔的反應(yīng)顏色是否超過(guò)臨界值。肉眼進(jìn)行兩孔之間的顏色比較可能還行,但比較一孔的顏色是否超過(guò)另一孔顏色的2.5倍就不可能。酶標(biāo)儀主要有兩種分類方法,按照濾光(單色)方式的不同,可分為:濾光片式酶標(biāo)儀、光柵式酶標(biāo)儀。
酶標(biāo)儀的前世今生 酶標(biāo)儀問(wèn)世之初,是酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)ELISA的常規(guī)檢測(cè)儀器。發(fā)展到如今,凡是與光信號(hào)相關(guān)的實(shí)驗(yàn)、需要高通量、需要節(jié)省試劑的實(shí)驗(yàn),且可以轉(zhuǎn)移到微孔板中的液體物質(zhì),都可以考慮使用微孔板檢測(cè)儀(酶標(biāo)儀)進(jìn)行信號(hào)檢測(cè)。因此,人們沿用早期“ELISA Plate Reader”的酶標(biāo)儀俗稱,其實(shí)現(xiàn)在已經(jīng)突破了ELISA的范疇,更常用的英文名稱是“Microplate Reader”,譯為“微孔板讀板機(jī)(儀)”。 早期的酶標(biāo)儀本質(zhì)是一臺(tái)分光光度計(jì),用比色法對(duì)96孔微孔板中微量體積液體的吸光值(Absorbances,Abs)進(jìn)行檢測(cè)。檢測(cè)時(shí),光源燈發(fā)出的光波經(jīng)過(guò)濾光片或單色器變成一束單色光,進(jìn)入塑料微孔板中的待測(cè)樣本,一部分光被樣本吸收,另一部分則透過(guò)樣本照射到光電檢測(cè)器上,光電檢測(cè)器將不同待測(cè)樣本的強(qiáng)弱不同的光信號(hào)轉(zhuǎn)換成相應(yīng)電信號(hào),再經(jīng)前置放大、對(duì)數(shù)放大、模數(shù)轉(zhuǎn)換等信號(hào)處理后送入微處理器進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和計(jì)算,由顯示器和打印機(jī)顯示結(jié)果。微處理機(jī)還通過(guò)控制電路控制機(jī)械驅(qū)動(dòng)結(jié)構(gòu)x和y方向的運(yùn)動(dòng)來(lái)移動(dòng)微孔板,從而實(shí)現(xiàn)自動(dòng)進(jìn)樣檢測(cè)過(guò)程。其中,光吸收檢測(cè)技術(shù)原理符合朗伯比爾定律。上海穩(wěn)贏機(jī)電設(shè)備有限公司的全自動(dòng)酶標(biāo)儀怎么樣?上海校驗(yàn)酶標(biāo)儀要多少錢
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全自動(dòng)酶標(biāo)儀 基于微孔板的測(cè)量檢測(cè)由樣品產(chǎn)生、由樣品轉(zhuǎn)換或通過(guò)樣品傳輸?shù)墓庑盘?hào)。信號(hào)由檢測(cè)器測(cè)量,通常是光電倍增管 (PMT)。 PMT 將光子轉(zhuǎn)化為電能,然后通過(guò)酶標(biāo)儀進(jìn)行量化。此過(guò)程的輸出是量化樣本的數(shù)字。 根據(jù)反應(yīng)過(guò)程中光信號(hào)變化的性質(zhì)以及檢測(cè)模式,樣品可能需要被特定波長(zhǎng)的光激發(fā)。這種光通常由寬帶氙氣閃光燈提供。為了通過(guò)特定波長(zhǎng)激發(fā)樣品,燈產(chǎn)生的光由特定的激發(fā)濾光片或單色器選擇。為了提高靈敏度和特異性,在發(fā)射/檢測(cè)端同樣采用過(guò)濾器或單色器。它們通常放置在樣品和檢測(cè)器之間。浙江質(zhì)量酶標(biāo)儀價(jià)格多少