4.吸光度測(cè)定的重復(fù)性 波長(zhǎng)選擇同(3),在酶標(biāo)板的一排加注空白溶液,第二排加入濃度為200rig/ml的重鉻酸鉀溶液,重復(fù)測(cè)定5次。記錄每次測(cè)定的第二排吸光度值,取第二排任一孔吸光度值與各次對(duì)應(yīng)孔吸光度值。按下式計(jì)算重復(fù)性: 5.酶標(biāo)儀的線性 選用540nm波長(zhǎng),將標(biāo)稱值0.5,1.0A中性濾光片分別放入專業(yè)測(cè)試板樣本位置中,以空氣為參比,各重復(fù)測(cè)定3次;然后將以上兩片中性濾光片疊加后置于專業(yè)測(cè)試板的同一孔位中,重復(fù)測(cè)定3次。 6.測(cè)定速度的檢定 選用492nm波長(zhǎng),放入96孔酶標(biāo)板進(jìn)行測(cè)定,用秒表計(jì)測(cè)儀器打印出全部數(shù)據(jù)的時(shí)間。 酶標(biāo)儀除了在選購(gòu)時(shí),應(yīng)盡可能自檢外,在使用中也應(yīng)定期檢定,以保證酶標(biāo)儀測(cè)定的有效性上海穩(wěn)贏機(jī)電設(shè)備的酶標(biāo)儀用于醫(yī)學(xué)、生物學(xué)、免疫學(xué)等領(lǐng)域的研究和實(shí)驗(yàn)中。北京設(shè)備酶標(biāo)儀銷售電話
規(guī)格性能 播報(bào) 1.光學(xué)系統(tǒng) 光柵光路系統(tǒng),包括內(nèi)建的參比檢測(cè)通道,確保任何測(cè)量情況下獲得一致的結(jié)果。 2.光路 長(zhǎng)壽命閃爍氙燈光源,光柵單色光發(fā)生器,200 ~1000 nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)全波長(zhǎng)掃描,1nm步進(jìn) 3.檢測(cè)模式 在微孔板檢測(cè)模式和比色杯檢測(cè)模式下均可進(jìn)行全波長(zhǎng)范圍光譜掃描,對(duì)樣品和空白同時(shí)掃描。 4.光譜掃描速度 10s,200~1000nm,1nm步進(jìn) 5.樣品前處理 無需衍生處理,即可直接測(cè)定DNA、RNA和蛋白的吸光值。 6.光程校準(zhǔn) 使用微孔板檢測(cè)時(shí)可直接讀出OD值和濃度,對(duì)于水相溶液可使用光程校正 7.樣品容器 可使用96&384孔板,或標(biāo)準(zhǔn)杯/微量杯 8.帶寬 帶寬2.4nm 9.讀數(shù)范圍 0 ~ 4 OD 10.線性范圍 @450nm:0 ~ 2.5 Abs,±2%安徽新型酶標(biāo)儀解決方案酶標(biāo)儀進(jìn)行清潔工作或需開蓋查看和更換零件,一定要先切斷電源才可以進(jìn)行。
酶標(biāo)儀和普通的光電比色計(jì)有以下幾點(diǎn)差異: (1)盛裝待測(cè)比色液的容器不再使用比色皿,而是使用塑料微孔板.微孔板常用透明的聚乙烯材料制成,對(duì)抗原抗體有較強(qiáng)的吸附作用,故用它作為固相載體。 (2)由于盛樣本的塑料微孔板是多排多孔的,光線只能垂直穿過,因此酶標(biāo)儀的光束都是垂直通過待測(cè)溶液和微孔板的,光束既可是從上到下,也可以是從下到上穿過比色液。 (3)酶標(biāo)儀通常不僅用A,有時(shí)也使用光密度OD來表示吸光度.酶標(biāo)儀可分為單通道和多通道2種類型,單通道又有自動(dòng)和手動(dòng)2種之分.自動(dòng)型的儀器有X,Y方向的機(jī)械驅(qū)動(dòng)機(jī)構(gòu),可將微孔板L的小孔一個(gè)個(gè)依次送入光束下面測(cè)試,手動(dòng)型則靠手工移動(dòng)微孔板來進(jìn)行測(cè)量。 在單通道酶標(biāo)儀的基礎(chǔ)上又發(fā)展了多通道酶標(biāo)儀,此類酶標(biāo)儀一般都是自動(dòng)化型的。它設(shè)有多個(gè)光束和多個(gè)光電檢測(cè)器,如 12個(gè)通道的儀器設(shè)有 12條光束或 12個(gè)光源,12個(gè)檢測(cè)器和12個(gè)放大器,在X方向的機(jī)械驅(qū)動(dòng)裝置的作用下,樣品12個(gè)為一排被檢測(cè).多通道酶標(biāo)儀的檢測(cè)速度快,但其結(jié)構(gòu)較復(fù)雜價(jià)格也較高。
酶標(biāo)儀的前世今生 酶標(biāo)儀問世之初,是酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)ELISA的常規(guī)檢測(cè)儀器。發(fā)展到如今,凡是與光信號(hào)相關(guān)的實(shí)驗(yàn)、需要高通量、需要節(jié)省試劑的實(shí)驗(yàn),且可以轉(zhuǎn)移到微孔板中的液體物質(zhì),都可以考慮使用微孔板檢測(cè)儀(酶標(biāo)儀)進(jìn)行信號(hào)檢測(cè)。因此,人們沿用早期“ELISA Plate Reader”的酶標(biāo)儀俗稱,其實(shí)現(xiàn)在已經(jīng)突破了ELISA的范疇,更常用的英文名稱是“Microplate Reader”,譯為“微孔板讀板機(jī)(儀)”。 早期的酶標(biāo)儀本質(zhì)是一臺(tái)分光光度計(jì),用比色法對(duì)96孔微孔板中微量體積液體的吸光值(Absorbances,Abs)進(jìn)行檢測(cè)。檢測(cè)時(shí),光源燈發(fā)出的光波經(jīng)過濾光片或單色器變成一束單色光,進(jìn)入塑料微孔板中的待測(cè)樣本,一部分光被樣本吸收,另一部分則透過樣本照射到光電檢測(cè)器上,光電檢測(cè)器將不同待測(cè)樣本的強(qiáng)弱不同的光信號(hào)轉(zhuǎn)換成相應(yīng)電信號(hào),再經(jīng)前置放大、對(duì)數(shù)放大、模數(shù)轉(zhuǎn)換等信號(hào)處理后送入微處理器進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和計(jì)算,由顯示器和打印機(jī)顯示結(jié)果。微處理機(jī)還通過控制電路控制機(jī)械驅(qū)動(dòng)結(jié)構(gòu)x和y方向的運(yùn)動(dòng)來移動(dòng)微孔板,從而實(shí)現(xiàn)自動(dòng)進(jìn)樣檢測(cè)過程。其中,光吸收檢測(cè)技術(shù)原理符合朗伯比爾定律。全自動(dòng)酶標(biāo)儀的數(shù)據(jù)分析系統(tǒng)可以自動(dòng)計(jì)算、分析樣品的數(shù)據(jù),并生成圖表、報(bào)告等結(jié)果。
選購(gòu)指南 酶標(biāo)儀(MicroplateReader)是對(duì)酶聯(lián)免疫檢測(cè)(EIA)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行讀取和分析的專業(yè)儀器。酶聯(lián)免疫反應(yīng)通過偶聯(lián)在抗原或抗體上的酶催化顯色底物進(jìn)行的,反應(yīng)結(jié)果以顏色顯示,通過顯色的深淺即吸光度值的大小就可以判斷標(biāo)本中待測(cè)抗體或抗原的濃度。 國(guó)內(nèi)許多計(jì)生站系統(tǒng)開展了酶免檢測(cè)項(xiàng)目,如:乙肝五項(xiàng)、優(yōu)生優(yōu)育系列檢測(cè)等。過去多數(shù)采用目測(cè)方法,報(bào)出的結(jié)果缺乏科學(xué)的依據(jù)。例如:某弓形蟲檢測(cè)試劑盒中,臨界值規(guī)定為:陰性對(duì)照品的OD值×2.5,通過目測(cè)無法判斷標(biāo)本孔的反應(yīng)顏色是否超過臨界值。肉眼進(jìn)行兩孔之間的顏色比較可能還行,但比較一孔的顏色是否超過另一孔顏色的2.5倍就不可能。使用前要認(rèn)真閱讀說明書,了解酶標(biāo)儀的操作規(guī)程和注意事項(xiàng)。江西校驗(yàn)酶標(biāo)儀操作
酶標(biāo)儀在技術(shù)質(zhì)量監(jiān)督局、動(dòng)植物檢驗(yàn)檢疫以及食品飼料行業(yè)等眾多行業(yè)。北京設(shè)備酶標(biāo)儀銷售電話
按照濾光方式分類 濾光片式酶標(biāo)儀內(nèi)置濾光片,根據(jù)試驗(yàn)所需選擇濾光片來獲得不同的波長(zhǎng)。光源發(fā)出的全波譜光經(jīng)濾光片后,大部分被過濾,只剩下濾光片本身允許的波長(zhǎng)通過。對(duì)ELISA來說,檢測(cè)波長(zhǎng)范圍是400~750 nm(固定波長(zhǎng):405,450,490,630 nm)可見光范圍,即可滿足顯色測(cè)定需求?!皢尾ㄩL(zhǎng)”只使用對(duì)顯色較大吸收的波長(zhǎng)測(cè)定,目前基本已淘汰?!半p波長(zhǎng)”除了對(duì)較大吸收波長(zhǎng)進(jìn)行測(cè)定外,同時(shí)用對(duì)特異顯色不敏感的波長(zhǎng)進(jìn)行校準(zhǔn),OD值為二者之差。選擇什么波長(zhǎng)主要根據(jù)底物溶液顏色和pH值,比如鄰苯二胺OPD-過氧化氫H2O2或四甲基聯(lián)苯胺TMB-H2O2較大吸收波長(zhǎng)不同,前者的吸收波長(zhǎng)為492 nm,后者為450 nm。對(duì)于多功能酶標(biāo)儀來說,檢測(cè)波長(zhǎng)范圍覆蓋紫外區(qū)、可見光區(qū)、近紅外等,需要5~6個(gè)濾光片。濾光片式酶標(biāo)儀獲得的波長(zhǎng)都是固定的,不能獲得任意所需波長(zhǎng),而且更換濾光片價(jià)格昂貴。北京設(shè)備酶標(biāo)儀銷售電話