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生醫(yī)實驗室數(shù)字ELISA極速

來源: 發(fā)布時間:2024-12-19

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每個生物實驗室都用得起的單分子免疫檢測

從TNF-α數(shù)字ELISA測定的檢測限為~150aM(2.5fg/mL),相當于全血中的~600aM(10fg/mL);市場上可用的ELISA對TNF-α的比較高靈敏度在血清中的LOD為21fM(0.34pg/mL)(補充圖3)。兩種方法的目標蛋白零濃度尖峰均為為這些實驗提供有用的陰性對照:25%的血清含有多種蛋白質(zhì)的微摩爾濃度,在這些高蛋白質(zhì)背景之上可以檢測到非常低濃度的目標蛋白。我們還開發(fā)了一個證明用于顯示低濃度核酸可以檢測到的DNA的主要數(shù)字分析方法,而無需復制目標


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芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA  具有超敏的優(yōu)點:
檢測方法為陣列成像。陣列成像涉及對陣列中的每個孔進行檢測以確定是否存在微球并判斷微球是否具有酶活性。為此,開發(fā)了一種圖像分析軟件,該軟件首先創(chuàng)建一個陣列的“掩?!?,以定義孔定位和邊界進行檢測。然后將孔掩模應(yīng)用于陣列的熒光圖像,以確定孔內(nèi)微球和酶的存在。對于陣列的熒光圖像,當進行多重檢測時,會生成微球群體或微球亞群的熒光強度直方圖。直方圖中的峰值自動識別并用于確定微球群體。生醫(yī)實驗室數(shù)字ELISA極速芯棄疾JX-8B單分子小型化ELISA檢測產(chǎn)品,每個醫(yī)學實驗室都能用的單分子檢測;

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單分子酶檢測到的比較低酶分子數(shù)假設(shè)蛋白質(zhì)檢測分析的更終靈敏度為背景信號可能由非特異性相互作用產(chǎn)生。為了評估內(nèi)在敏感性,我們通過將400,000個帶有生物素的珠子與不同濃度的酶綴合物鏈霉親和素-阝-半乳糖苷酶(S阝G)混合,創(chuàng)建了具有明確酶與珠子比例的珠子群體。為了方便起見,生物素化珠子是通過將生物素化DNA與功能化的珠子雜交提供的?;パaDNA。[我們注意到,該實驗不應(yīng)被視為敏感的DNA檢測;該檢測的敏感性受到非特異性相互作用的限制,如補充圖2所示,這些相互作用發(fā)生在酶綴合物和表面結(jié)合的DNA之間。

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為了證明檢測極低濃度的可能診斷價值使用數(shù)字ELISA檢測血液中的蛋白質(zhì),對接受治理性前列腺切除術(shù)(RP)的患者血清樣本中的PSA進行了測量。PSA是前列腺病的血清生物標志物病癥既用作篩查工具,也用于監(jiān)測住院患者的復發(fā)接受治理性前列腺切除術(shù)28。治理性前列腺切除術(shù)后,絕大多數(shù)PSA被消除,水平低于標準商用檢測方法的檢測限(3pM或0.1ng/mL)。定期監(jiān)測這些患者的PSA恢復情況可以檢測前列腺病的復發(fā),但術(shù)后幾年內(nèi)生化復發(fā)可能不會被發(fā)現(xiàn)。 芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA,微量檢測,使用微量樣本就能測試;

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通過SiMoA對酶標記物進行數(shù)字檢測的線性動態(tài)范圍由區(qū)分“開啟”和“關(guān)閉”孔的能力決定。在酶與珠子的比例較低(小于約1:10)時,泊松統(tǒng)計表明,只有統(tǒng)計學上有效果的群體珠子是指含有零和一個酶的珠子。只要足夠多的珠子被檢測,單個酶就可以被檢測到,并且活性珠子的數(shù)量會超過泊松分布計數(shù)活性微球的噪聲。在酶與微球的高比率(大于約(1:10),活性珠子的比例變得更高,泊松統(tǒng)計表明有大量含有多種酶的微球。為了定量檢測到的酶的數(shù)量并保持含有多種酶的微球亞群中的線性對于酶,我們使用泊松統(tǒng)計法將活性珠子的數(shù)量轉(zhuǎn)換為檢測到的酶的數(shù)量 7)數(shù)字化高敏ELISA芯片,低成本、便捷、快速進行微量樣本的檢測;代理數(shù)字ELISA特點

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