紡錘體的完整性決定了染色體分裂的正確性。在有絲分裂前期,中心體被復(fù)制形成兩個中心體,并逐漸分離,形成兩個紡錘體。紡錘體的微管從中心體發(fā)出,與染色體上的著絲粒(kinetochore)結(jié)合。著絲粒是一組復(fù)雜的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu),可以與微管的末端結(jié)合。當(dāng)纖維束的微管末端與著絲粒結(jié)合時,纖維束開始縮短,將染色體拉向兩端,實(shí)現(xiàn)染色體的精確分離。這一過程不僅確保了每個新細(xì)胞都能獲得正確數(shù)量的染色體,還保證了遺傳信息的穩(wěn)定傳遞。紡錘體形態(tài)的變化反映了細(xì)胞分裂的不同階段。美國核移植紡錘體觀測儀
紡錘體是如何形成的(1)
紡錘體是動植物細(xì)胞分裂期形成的與染色體正常分離直接相關(guān)的分裂器,紡錘體的裝配在有絲分裂的前期完成。動物細(xì)胞紡錘體由星體微管、極間微管、動粒微管及其結(jié)合蛋白構(gòu)成,因含有星體微管故稱有星紡錘體。無中心體的動物細(xì)胞和植物細(xì)胞也能形成紡錘體,因不含有星體微管而稱之為無星紡錘體。微管是由α、β微管蛋白異源二聚體及少量微管結(jié)合蛋白聚合而成的亞穩(wěn)定動態(tài)結(jié)構(gòu)。動物細(xì)胞的中心體由一對相互垂直的圓筒狀中心粒及中心體基質(zhì)構(gòu)成。它是紡錘體微管向外生長的**,又稱微管組織中心。在有絲分裂前間期的S期初期,中心體開始復(fù)制倍增,在G2期結(jié)束時完成。在細(xì)胞分裂期前期,間期復(fù)制倍增的兩個中心體分離,每一個中心體形成放射狀排列的微管,稱為星體,每個中心體是它自身星體的**。在有絲分裂細(xì)胞周期的分裂期,微管通過持續(xù)增加和丟失組成微管的微管蛋白亞基來實(shí)現(xiàn)微管的聚合和解聚,微管始終處于生長和縮短的更替中。在分裂前期,紡錘體微管由游離的微管蛋白組裝而成,介導(dǎo)染色體的運(yùn)動;分裂末期,紡錘體微管解聚,又組裝形成細(xì)胞質(zhì)微管網(wǎng)絡(luò)。紡錘體微管包括動粒微管、極間微管和星體微管. 非侵入式成像紡錘體揭示卵母細(xì)胞關(guān)鍵結(jié)構(gòu)紡錘體在細(xì)胞分裂后期通過微管切割機(jī)制實(shí)現(xiàn)染色體分離。
哺乳動物卵母細(xì)胞的紡錘體由微管組成,這些微管結(jié)構(gòu)精細(xì)且高度動態(tài),對溫度、滲透壓和機(jī)械力等外界因素極為敏感。在冷凍過程中,紡錘體容易因冰晶形成、滲透壓變化或機(jī)械損傷而遭到破壞,導(dǎo)致染色體分離異常,進(jìn)而影響卵母細(xì)胞的發(fā)育潛力和受精后的胚胎質(zhì)量。選擇合適的冷凍保護(hù)劑是減少紡錘體損傷的關(guān)鍵。然而,不同濃度的冷凍保護(hù)劑對紡錘體的影響各異,且不同哺乳動物種類之間也存在差異。因此,需要通過大量實(shí)驗來優(yōu)化冷凍保護(hù)劑的配方,以大限度地保護(hù)紡錘體的完整性。
對卵子進(jìn)行評估:胚胎學(xué)家指出:有紡錘體出現(xiàn)的卵母細(xì)胞有較高的受精率和胚胎發(fā)育率,也就是說紡錘體的存在與否,可以用來評價卵母細(xì)胞胞漿的成熟度。因此胚胎學(xué)家有三次通過紡錘體對我們的卵子進(jìn)行評估的機(jī)會: (1)胚胎學(xué)家可以利用偏振光顯微鏡對卵子的紡錘體進(jìn)行觀察,通過定量分析數(shù)據(jù)對卵子進(jìn)行分級,挑選出正常分裂的卵子,也就是出現(xiàn)紡錘體的卵子,進(jìn)而提高試管嬰兒的受精率。 (2)胚胎學(xué)家還可以通過紡錘體來確定體外培養(yǎng)成熟卵子(IVM)的成熟期,進(jìn)而為體外成熟卵子進(jìn)行評估,***提高試管嬰兒的受精率和胚胎發(fā)育率。 (3)由于紡錘體對環(huán)境溫度的改變非常敏感。溫度降至25℃時,只需要10分鐘的時間,就會紡錘體造成不可逆的損傷。所以冷凍復(fù)蘇過程中溫度改變很有可能對卵母細(xì)胞紡錘體和染色體造成損傷。因此胚胎學(xué)家可以應(yīng)用紡錘體成像幫助選擇復(fù)蘇后具有正常紡錘體的卵母細(xì)胞,進(jìn)而可以提高受精率、卵裂率和臨床妊娠率。
綜上所述,通過***細(xì)胞的紡錘體成像技術(shù)可以避免輔助生殖技術(shù)對卵母細(xì)胞紡錘體的損傷,有助于選擇具有正常紡錘體的卵母細(xì)胞,有利于提高受精率、卵裂率和臨床妊娠率,利用更科學(xué)的方式,將讓求子路的終點(diǎn)不再那么遙遠(yuǎn)。 紡錘體的形成與消失是細(xì)胞周期中高度動態(tài)的過程。
胞質(zhì)膜
在動物細(xì)胞的細(xì)胞分裂結(jié)束時,母細(xì)胞在一個被稱為“胞質(zhì)分裂”的過程中分裂成兩個子細(xì)胞和分區(qū)隔離的染色體。有絲分裂紡錘體控制胞質(zhì)膜上的“胞質(zhì)分裂”事件,但連接這兩個宏觀結(jié)構(gòu)的機(jī)制一直不清楚。Mark Petronczki及其同事提供了一個結(jié)構(gòu)和功能分析結(jié)果,他們發(fā)現(xiàn)**紡錘體蛋白(紡錘體中間區(qū)域和中間體中的一個蛋白復(fù)合物)是有絲分裂紡錘體與胞質(zhì)膜間所缺失的聯(lián)系環(huán)節(jié),這個聯(lián)系環(huán)節(jié)確?!鞍|(zhì)分裂”過程的***結(jié)果。本文作者還發(fā)現(xiàn),**紡錘體蛋白的MgcRac***亞單元中的一個區(qū)域為一個“系繩”,它連接到胞質(zhì)膜中的磷酸肌醇脂質(zhì)上。 [4] 紡錘體微管網(wǎng)絡(luò)的復(fù)雜性確保了細(xì)胞分裂的精確性和高效性。北京偏光成像紡錘體卵細(xì)胞評價
紡錘體微管網(wǎng)絡(luò)的動態(tài)變化揭示了細(xì)胞分裂過程中分子層面的奧秘。美國核移植紡錘體觀測儀
冷凍與解凍過程中涉及多個環(huán)節(jié),包括溫度控制、時間控制、冷凍保護(hù)劑的添加與去除等。這些環(huán)節(jié)中的任何一步操作不當(dāng)都可能導(dǎo)致紡錘體損傷。因此,需要不斷優(yōu)化冷凍與解凍技術(shù),以減少對紡錘體的不良影響。近年來,研究者們通過不斷嘗試和優(yōu)化冷凍保護(hù)劑的配方,取得了進(jìn)展。例如,甘油、二甲基亞砜(DMSO)等滲透性保護(hù)劑被用于哺乳動物卵母細(xì)胞的冷凍保存中,它們能夠迅速降低細(xì)胞內(nèi)水分含量,減少冰晶形成。同時,一些非滲透性保護(hù)劑如蔗糖、海藻糖等也被發(fā)現(xiàn)對紡錘體具有一定的保護(hù)作用。美國核移植紡錘體觀測儀