精子檢測是通過一系列檢測方法來評估男性生育能力的指標(biāo)之一。而檢測方法的選擇直接影響到檢測的準(zhǔn)確性和結(jié)果的可靠性。目前,常用的檢測方法有手動計(jì)數(shù)法、顯微鏡計(jì)數(shù)法、電子顯微鏡計(jì)數(shù)法、精子運(yùn)動軌跡分析法等。手動計(jì)數(shù)法是通過顯微鏡手動計(jì)算精液中精子數(shù)量的方法,該方法簡單易行,但因操作者技能不同,容易出現(xiàn)誤差。顯微鏡計(jì)數(shù)法是通過顯微鏡觀察精液中精子數(shù)量的方法,該方法比手動計(jì)數(shù)法更加準(zhǔn)確,但需要專業(yè)的技能和經(jīng)驗(yàn)。電子顯微鏡計(jì)數(shù)法是通過電子顯微鏡觀察精液中精子數(shù)量的方法,該方法非常準(zhǔn)確,但需要昂貴的設(shè)備。精子運(yùn)動軌跡分析法是通過計(jì)算機(jī)分析精子運(yùn)動軌跡來判斷精子活力和數(shù)量的方法,該方法不僅準(zhǔn)確性,而且可以直觀地顯示精子的運(yùn)動狀態(tài),但需要較為復(fù)雜的技術(shù)。除了以上常見的檢測方法,還有一些新興的檢測方法,如流式細(xì)胞術(shù)、全自動分析系統(tǒng)等。這些檢測方法雖然在檢測精子數(shù)量、活力等方面具有一定優(yōu)勢,但由于技術(shù)上的限制和設(shè)備的昂貴,目前還沒有得到廣泛應(yīng)用。在選擇檢測方法時,需要考慮檢測的目的、檢測的準(zhǔn)確性和結(jié)果的可靠性等因素。同時,需要選擇正規(guī)的醫(yī)療機(jī)構(gòu)進(jìn)行檢測,避免因設(shè)備不足或技術(shù)不過關(guān)等因素導(dǎo)致檢測結(jié)果出現(xiàn)誤差。通過計(jì)算機(jī)圖像處理功能對顯微鏡下放大的精子圖像進(jìn)行識別和跟蹤計(jì)算,從而得出精子動靜態(tài)各項(xiàng)參數(shù)。南京人精子分析DCL
CASA系統(tǒng)雖然有諸多優(yōu)點(diǎn),但是很多因素都會影響到CASA儀器的使用及準(zhǔn)確性。CASA系統(tǒng)進(jìn)行**分析應(yīng)注意以下幾點(diǎn):3.1標(biāo)本的采集與制作(1)采集前禁欲2?7天,禁欲時間過長、過短對**質(zhì)量都有一定影響。(2)容器要清潔。(3)特殊情況下,*可使用專門為采集**設(shè)計(jì)的無毒性避孕套,普通的乳膠避孕套因含有損害精子活力的物質(zhì)不可使用。(4)注意保溫(20?37℃),并于30分鐘內(nèi)送檢驗(yàn)科。(5)標(biāo)本置于37℃水浴.精子運(yùn)動參數(shù)具有溫度敏感性,因此要求計(jì)數(shù)池應(yīng)于分析儀恒溫板上預(yù)溫。(6)密切注意**液化的情況,確保液化時間準(zhǔn)確,因**樣本隨放置時間的延長,精子活動力及活動率有減少的趨勢。標(biāo)本液化后取混勻樣本**1滴滴在樣品池中間,然后進(jìn)行分析。(7)檢測精子活動力,標(biāo)本密度應(yīng)控制在2×106/ml到50×106/ml之間。具有高密度(如高于50×106/ml)精子的標(biāo)本,通常會增加碰撞的頻率,并可能由此出現(xiàn)錯誤的結(jié)果。在這種情況下,建議用同源精漿稀釋標(biāo)本。北京瀕危物種精子分析高準(zhǔn)確率?精子分析可以分析參數(shù)有,曲線速率(VCL)?:精子頭沿其實(shí)際曲線運(yùn)動的時均速率。
精子分析儀工作原理
以灰度識別CASA為例,采用高分辨率的攝影技術(shù)與顯微鏡結(jié)合,**標(biāo)本液化后吸入計(jì)數(shù),通過顯微鏡放大后,用圖像采集系統(tǒng)獲取精子動、靜態(tài)圖像后輸入計(jì)算機(jī)。根據(jù)設(shè)定的精子大小和灰度、精子運(yùn)動移位及運(yùn)動參數(shù),對采集圖像進(jìn)行精子密度、活動力、活動率、運(yùn)動特征等幾十項(xiàng)檢驗(yàn)項(xiàng)目動態(tài)分析,由計(jì)算機(jī)處理后,打印出“**分析檢查報告以及精子動態(tài)特征分布圖”。一次能對1000個精子進(jìn)行動態(tài)檢測分析,2-3分鐘即可完成檢測 [1]。
優(yōu)點(diǎn):
操作簡便,用量少,檢測速度快,重復(fù)性優(yōu)于人工檢測,并且能夠快速、準(zhǔn)確的測定精子密度、活力、精子分級等,還可提供精子運(yùn)動狀態(tài)的多種參數(shù)等。
缺點(diǎn):
影響分析結(jié)果的因素較多,除**本身性質(zhì)所含的固有誤差外,不同的精子計(jì)數(shù)池的相對準(zhǔn)確性和精確性可產(chǎn)生明顯不一致的效果。
方法:使用兩種已知濃度的質(zhì)控乳膠珠溶液,1份濃度為(35±5)×106/ml,另1份濃度為(18.0±2.5)×106/ml,評價4種計(jì)數(shù)方法的準(zhǔn)確性和精確性,并比較4種方法計(jì)數(shù)精液的結(jié)果。結(jié)果:計(jì)數(shù)乳膠珠時,CellVU計(jì)數(shù)池的結(jié)果**接近已知濃度,分別為(39.70±4.76)、(19.09±2.02)×106/ml,變異系數(shù)(CV)值分別為12.80%和10.58%;血細(xì)胞計(jì)數(shù)池和Makler計(jì)數(shù)池結(jié)果均高于已知濃度,前者為(44.84±4.86)×106/ml、(21.04±1.87)×106/ml,CV值分別為10.81%和8.89%,后者為(52.36±7.78)×106/ml、(24.54±3.67)×106/ml,CV值分別為14.86%和14.96%;CASA系統(tǒng)結(jié)果低于已知濃度,為(28.53±2.06)、(14.62±0.95)×106/ml,但CV值比較低,分別為7.22%和6.50%。計(jì)數(shù)精液時,CellVU計(jì)數(shù)池與CASA系統(tǒng)結(jié)果差異無***性(P=0.71),分別為(45.28±34.52)、(41.96±31.93)×106/ml,血細(xì)胞計(jì)數(shù)池和Makler計(jì)數(shù)池結(jié)果差異無***性(P=0.14),分別為(76.98±59.90)、(63.89±53.84)×106/ml,CellVU計(jì)數(shù)池、CASA系統(tǒng)與血細(xì)胞計(jì)數(shù)池、Makler計(jì)數(shù)池結(jié)果間差異***(P<0.05或P<0.01)。結(jié)論:計(jì)數(shù)精液時,CASA系統(tǒng)與CellVU計(jì)數(shù)結(jié)果差異無***性。各實(shí)驗(yàn)室可選擇合適的手工或CASA計(jì)數(shù)方法。HAMILTON THORNE精子分析儀可分析參數(shù),鞭打頻率(BCF)?:精子曲線路徑跨越其平均路徑的平均頻率。
Hamilton Thorne IVOS是一套整合了光學(xué)觀察系統(tǒng)的精子動力分析儀。如今,IVOS 已成為快速、準(zhǔn)確、穩(wěn)定可靠的進(jìn)行精子分析的代名詞。儀器特點(diǎn):新款內(nèi)建CD Writer!內(nèi)部整合光學(xué)系統(tǒng)自動化,內(nèi)置樣品臺可用于多種樣品分析 儀器操作簡單提供滿足需求的分析結(jié)果實(shí)時質(zhì)量控制分析結(jié)果列表內(nèi)部整合的光學(xué)系統(tǒng)IVOS是***一套內(nèi)置光學(xué)系統(tǒng)的精子動力分析儀。與其它同類產(chǎn)品相比,IVOS并不采用顯微鏡持續(xù)照明方式,而是采用閃光拍攝方法。這種拍攝方法能夠消除由于精子運(yùn)動而造成的位置模糊。通過60禎/秒的拍攝速度,能夠得到準(zhǔn)確可靠的精子速度和運(yùn)動參數(shù)分析結(jié)果。IVOS可在以下三種模式下分析精子樣品:相差,明場和多波長熒光模式。自動化內(nèi)置加熱平臺作為整合光學(xué)系統(tǒng)的一部分,由計(jì)算機(jī)控制的IVOS樣品平臺可在分析時提供準(zhǔn)確的溫度控制和位置定位。樣品臺的溫度可在室溫到40°C范圍內(nèi)調(diào)節(jié),穩(wěn)定度為0.5°C。分析區(qū)域的選擇可選用自動或手動方式。樣品臺的溫度和位置可實(shí)時顯示在視頻窗口中。IVOS 還允許用戶自己進(jìn)行分析室設(shè)定,控制分析樣品量。Hamilton Thorne精子分析儀的操作簡單易懂,用戶無需具備專業(yè)知識也能夠輕松上手使用。北京水生動物精子分析W.H.O 4
WHO第6版明確提出:使用CASA系統(tǒng)須遵循適當(dāng)?shù)某绦虿襟E,才能獲得可靠和可重復(fù)的結(jié)果。南京人精子分析DCL
通過結(jié)果的生物學(xué)意義對結(jié)果質(zhì)量進(jìn)行評估?當(dāng)所有具生物學(xué)意義的參數(shù)在測試中表現(xiàn)出較小的可變性時則方法學(xué)可變性亦較低方法學(xué)可變性低則結(jié)果質(zhì)量就高。CASA系統(tǒng)獲得的數(shù)值與直觀評估獲得的數(shù)值進(jìn)行分析和比較在精子數(shù)量和綜合運(yùn)動性上具有較好的相關(guān)性而·131·中國優(yōu)生與遺傳雜志2002第10卷第6期DOI:10.13404/j.cnki.cjbhh.2002.06.091在前向運(yùn)動精子百分率上的相關(guān)性較低]。Holt等報道了在常規(guī)實(shí)驗(yàn)條件下采用五種不同的CASA系統(tǒng)對**參數(shù)值進(jìn)行比較,其結(jié)果為:采用同一個測定池由不同的操作者測定**參數(shù);變異系數(shù)(CV)是29%?活動精子比率的CV為24%?平均路徑速度(VAP)的CV為43?85%。作者們指出該分析結(jié)果不應(yīng)看作是不同CASA系統(tǒng)間的工作情況的比較?實(shí)際上它揭示了操作者的錯誤是差異的主要來源。目前有待于尋找進(jìn)一步的標(biāo)準(zhǔn)來評估CASA變量的結(jié)果質(zhì)量。精子***的生物學(xué)功能是使卵細(xì)胞授精?因此用夫婦中的授精結(jié)果來考察精子運(yùn)動性是合理的?只有在該基礎(chǔ)上能夠確定活動性參數(shù)的重要性。輔助生殖技術(shù)(授精I(xiàn)VF)的發(fā)展使檢測精子質(zhì)量與各參數(shù)間的關(guān)系的比較成為可能;同樣可以驗(yàn)證CASA測定結(jié)果與精子真實(shí)質(zhì)量間的相關(guān)性有利于CASA結(jié)果質(zhì)量的提高。南京人精子分析DCL