精子計(jì)數(shù)是在顯微鏡下計(jì)算一次排出的精液中精子的數(shù)量將精子計(jì)數(shù)值乘以精液量就可得出一次**的量。

精液液化后將樣本按一定比例稀釋和固定后，滴于血細(xì)胞計(jì)數(shù)板上，在顯微鏡下計(jì)數(shù)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)區(qū)內(nèi)的所有精子數(shù)并換算為每m1內(nèi)所含精子數(shù)。此外還可用電子細(xì)胞計(jì)數(shù)儀經(jīng)調(diào)整閾值設(shè)置后計(jì)數(shù)精子數(shù)量。

將已經(jīng)液化的精液標(biāo)本均勻混合，用白細(xì)胞計(jì)數(shù)吸管吸精液至0.5刻度，再吸稀釋液至11刻度，振蕩三分鐘，然后置于血球計(jì)數(shù)板內(nèi)，計(jì)數(shù)二大格（每格面積1平方毫米）之精子數(shù)，在尾數(shù)后加5個(gè)“0”即得每毫升精液內(nèi)精子數(shù)。例如計(jì)數(shù)為1280個(gè)，則每毫升精子應(yīng)為128,000,000。精液稀釋液之配制：重碳酸鈉5克、福爾馬林1毫升、蒸餾水加至100毫升。稀釋液內(nèi)重碳酸鈉有消化粘液的作用，福爾馬林有使精子制動(dòng)的作用。如精液之稠度過(guò)高而不易吸取時(shí)，可以精液1毫升混勻于稀釋液19毫升內(nèi)，稀釋后進(jìn)行計(jì)數(shù)。如精子的數(shù)目極少，亦可改為稀釋10倍計(jì)數(shù)。每次排精75%的精子是從附睪尾部所貯存的，還有25%是由輸精管道的其他部分來(lái)的，因此單憑一次排精的精子計(jì)數(shù)來(lái)衡量睪丸生精機(jī)能是不***的。只有在排精后間隔4-5天以后多次精液檢查，才能比較正確地從這些精子計(jì)數(shù)來(lái)反映睪丸的生精機(jī)能。 CASA系統(tǒng)操作簡(jiǎn)便，檢測(cè)速度快，且重復(fù)性優(yōu)于人工檢測(cè)。南京密度精子分析DCL

定量測(cè)定是醫(yī)學(xué)發(fā)展的重要保證。WHO1980年出版了男科實(shí)驗(yàn)室手冊(cè)***版及以后版本［1］?對(duì)有關(guān)男科的實(shí)驗(yàn)進(jìn)行了詳細(xì)的闡述。對(duì)計(jì)算機(jī)輔助精子分析進(jìn)行質(zhì)量管理包括：計(jì)算機(jī)本身的軟硬件、CASA分析結(jié)果、工作人員的具體操作幾方面。CASA參數(shù)包括精子數(shù)量和各種活動(dòng)力變量?其質(zhì)量包括所測(cè)得數(shù)據(jù)的可靠性、精確度、如何避免差錯(cuò)和數(shù)據(jù)的正確性及確認(rèn)?以及分析中的標(biāo)準(zhǔn)［2］。

CASA質(zhì)量管理關(guān)系到男科實(shí)驗(yàn)室中**分析的質(zhì)量?具有以下特點(diǎn)：⑴在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部質(zhì)量和醫(yī)生處置質(zhì)量方面?優(yōu)于其它測(cè)定精子運(yùn)動(dòng)的方法；⑵CASA結(jié)果及結(jié)果質(zhì)量的評(píng)估較困難；⑶WHO標(biāo)準(zhǔn)是醫(yī)生處置質(zhì)量保證的基礎(chǔ)；⑷今后應(yīng)加強(qiáng)操作人員的培訓(xùn)。 南京密度精子分析DCL男性精液檢測(cè)主要依賴計(jì)算機(jī)輔助精子分析儀(computer assistant semen analyses，CASA)。

CASA，即計(jì)算機(jī)輔助精子分析，是一種利用技術(shù)手段對(duì)精子活力、濃度和形態(tài)進(jìn)行精確評(píng)估的方法。WHO第五版指南強(qiáng)調(diào)，相比人工檢測(cè)，CASA提供更準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)和精子動(dòng)力學(xué)參數(shù)，如前向運(yùn)動(dòng)和超活化運(yùn)動(dòng)，以及獲能精子特征參數(shù)。研究顯示，CASA檢測(cè)的精子參數(shù)與體內(nèi)外受精成功率和受孕時(shí)間有***關(guān)聯(lián)。使用CASA分析儀，通常通過(guò)相差顯微鏡識(shí)別活動(dòng)精子，適用于精子動(dòng)力學(xué)分析。但要確保可靠結(jié)果，操作者需注意標(biāo)本制備、幀頻率、精子濃度等因素。每份樣本至少需要分析200個(gè)活動(dòng)精子的運(yùn)動(dòng)軌跡，更多精子樣本有助于分類和變異性的分析。國(guó)內(nèi)已有自主研發(fā)的精子分析儀，通常進(jìn)行兩次分析，每次至少200個(gè)精子，結(jié)果通過(guò)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析得出。CASA在評(píng)估精子濃度時(shí)，需精確測(cè)量精子體積，確保**完全液化并充分混勻。計(jì)數(shù)板的精確性和計(jì)數(shù)一致性是關(guān)鍵，每次檢測(cè)需滿足5個(gè)視野和200條以上精子的比較低要求。對(duì)于高濃度**，可能需要稀釋以減少誤差。形態(tài)分析方面，CASA能夠定量評(píng)估精子頭部、中段和主段，尾部缺陷可通過(guò)活力評(píng)估。對(duì)于碎片過(guò)多或黏稠的**，可能需要洗滌以減少背景干擾。CASA中涉及一系列術(shù)語(yǔ)，如VCL（曲線速度）、VSL（直線速度）等，它們反映了精子運(yùn)動(dòng)的不同特性。

七、精子形態(tài)檢查[正常參考值]畸形精子：＜10%-15%； 凝集精子：＜10%；未成熟精細(xì)胞：＜1%。[臨床意義]1．精索靜脈曲張病人的畸形精子增多，提示精子在不成熟時(shí)已進(jìn)入精液，或靜脈回流不暢造成陰囊內(nèi)溫度過(guò)高和睪丸組織缺氧，或血液帶有毒性代謝產(chǎn)物從腎或腎上腺靜脈逆流至睪丸，上述原因均有損于精子形態(tài)。2. 精液中凝集精子增多，提示生殖道***或免疫功能異常。3. 睪丸曲細(xì)精管生精功能受到藥物或其他因素影響或傷害時(shí)，精液中可出現(xiàn)較多病理性未成熟精細(xì)胞。

八、精液細(xì)胞檢查[正常參考值]白細(xì)胞(WBC)：＜5個(gè)/HP(高倍鏡視野)；紅細(xì)胞(RBC)：0-偶見(jiàn)/HP。[臨床意義]1．精液中白細(xì)胞增多，常見(jiàn)于精囊炎、前列腺炎及結(jié)核等。2．精液中紅細(xì)胞增多，常見(jiàn)于精囊結(jié)核、前列腺*等。3. 精液中若查到*細(xì)胞，對(duì)生殖系*有診斷意義。 HAMILTON THORNE精子分析儀可分析參數(shù)，鞭打頻率（BCF）?：精子曲線路徑跨越其平均路徑的平均頻率。

1.基本檢查：是確定精液變量穩(wěn)定的常規(guī)方法，不僅是男科實(shí)驗(yàn)室，任何開(kāi)展精液檢查的實(shí)驗(yàn)室都能遵循。精子計(jì)數(shù)依然推薦使用改良Neubauer血細(xì)胞計(jì)數(shù)板的方法，但計(jì)數(shù)的方法有了改變。明確推薦了伊紅笨胺黑染色法作為精子存活率診斷的優(yōu)先方法，伊紅染色和低滲腫脹實(shí)驗(yàn)只作為備選方法。刪減了參考值下限的描述。對(duì)于精子活動(dòng)率大于40%的樣本沒(méi)有必要做存活率評(píng)估。與第5版手冊(cè)中淡粉色判讀為活精子不同，明確了只有精子頭為白色的精子為活精子、淡粉色為死精子。臨床數(shù)據(jù)表明，鑒別快速前向運(yùn)動(dòng)精子非常重要。因此，關(guān)于精子活力分級(jí)，第6版手冊(cè)建議恢復(fù)到快速前向運(yùn)動(dòng)、慢速前向運(yùn)動(dòng)、非前向運(yùn)動(dòng)和不活動(dòng)4個(gè)活力級(jí)別，但精子活動(dòng)率的參考值范圍卻依然是按前向運(yùn)動(dòng)(PR)、非前向運(yùn)動(dòng)(NP)、不活動(dòng)(IM)3個(gè)活力級(jí)別計(jì)算。第6版手冊(cè)強(qiáng)調(diào)，精子形態(tài)學(xué)評(píng)估的價(jià)值不僅在于其可用于判斷自然妊娠和輔助生殖技術(shù)(ART)結(jié)局的預(yù)后，還可以為男性生殖***包括睪丸和附睪功能判斷提供更多診斷信息。對(duì)于3%和5%的精子“正?！毙螒B(tài)率的判斷，則要求必須由訓(xùn)練有素的人員評(píng)估1500個(gè)精子來(lái)完成；對(duì)于無(wú)尾精子(只有頭部的精子)超過(guò)總精子數(shù)20%的精液，應(yīng)單獨(dú)計(jì)算并在報(bào)告中注明；精子分析系統(tǒng)較傳統(tǒng)的分析法比較，具有速度快、量比性好、準(zhǔn)確性高、為臨床和科研提供客觀的檢測(cè)依據(jù)。美國(guó)慢速運(yùn)動(dòng)精子分析WOB

精子分析儀的出現(xiàn)簡(jiǎn)化了檢驗(yàn)流程，提高了診斷的可靠性，對(duì)于提升男性生殖健康領(lǐng)域的Z療效果具有重要作用。南京密度精子分析DCL

美國(guó)Hamilton Thorne的TOX IVOS精子分析儀已經(jīng)被FDA和國(guó)內(nèi)外毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)室所使用。本試驗(yàn)研究目的對(duì)精子分析儀和血細(xì)胞計(jì)數(shù)板在大鼠附睪精子計(jì)數(shù)結(jié)果的比較驗(yàn)證。方法選取三批次雄性SD大鼠60只,每批20只,對(duì)三批次雄鼠的精子計(jì)數(shù)進(jìn)行比較。健康雄鼠通過(guò)戊巴比妥鈉麻醉實(shí)施安樂(lè)死后,取左側(cè)附睪尾稱重,將附睪尾部放入37℃預(yù)熱的含有M199培養(yǎng)液平皿中,剪碎附睪尾,放入培養(yǎng)箱中37℃孵育5 min,然后吸取1份精子懸液,用M199培養(yǎng)液進(jìn)行一定倍數(shù)的稀釋,混勻后,取1滴稀釋液,滴入精子分析儀**載玻片上,將載玻片放入TOX IVOS精子分析儀載物臺(tái),進(jìn)行精子計(jì)數(shù),同時(shí)吸取稀釋后的精子懸液滴入血細(xì)胞計(jì)數(shù)板內(nèi),通過(guò)光學(xué)顯微鏡進(jìn)行計(jì)數(shù),比較兩種計(jì)數(shù)方法的差異性。結(jié)果***批次雄鼠精子分析儀和血細(xì)胞計(jì)數(shù)器的精子計(jì)數(shù)結(jié)果分別為70.2±33.2,61.0±27.1;第二批次雄鼠精子分析儀和血細(xì)胞計(jì)數(shù)器的精子計(jì)數(shù)結(jié)果分別為128.8±116.8,114.6±86.9;第三批次雄鼠精子分析儀和血細(xì)胞計(jì)數(shù)器的精子計(jì)數(shù)結(jié)果分別為165.9±91.7,140.0±59.6。三個(gè)批次的精子分析儀和血細(xì)胞計(jì)數(shù)板的精子計(jì)數(shù)結(jié)果無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。結(jié)論精子分析儀是一種方便、可靠、快速、高效的研究工具,在生殖毒理學(xué)研究中具有重要的應(yīng)用價(jià)值。南京密度精子分析DCL