測定精子密度和精子總數(shù)的方法主要包括顯微鏡計數(shù)和全自動分析。1.顯微鏡計數(shù):這是傳統(tǒng)的測定方法,需要收集精液,通常是使用量杯。收集后,應(yīng)在實驗室中盡快進行計數(shù)。應(yīng)在光學(xué)顯微鏡下將精子進行分類,這一步非常重要,因為完整的精子才能被計數(shù)。然后,將剩余的精液樣本通過自然沉降或離心的方法讓精子下沉,通過顯微鏡觀察并計數(shù)。這種方法需要一定的經(jīng)驗和技巧,而且受到許多因素的影響,如精子的活動性、濃度、形態(tài)等。2.全自動分析:隨著科技的發(fā)展,現(xiàn)在有全自動的精子分析儀,可以快速準(zhǔn)確地測定精子密度和總數(shù)。這種方法通過激光技術(shù)進行,可以測量大量精子,包括前向運動的精子。這些儀器通??梢蕴峁└_的結(jié)果,并且減少了人為錯誤。在進行精子計數(shù)前,男性應(yīng)避免長時間禁欲,因為這可能會影響精子的數(shù)量和質(zhì)量。同時,健康的飲食和生活方式也有助于提高精子的數(shù)量和質(zhì)量。CASA系統(tǒng)通過計算機分析精子運動參數(shù),能夠提供精確的量化數(shù)據(jù),優(yōu)于人工檢測方法。香港Hamilton Thorne精子分析VSL
CASA系統(tǒng)也可用于精子形態(tài)學(xué)評估。CASA系統(tǒng)可用來定量分析精子頭部形態(tài)學(xué)、中段甚至主段的形態(tài),可以把精子頭部和中段分類為正常或者不正常,還可以給出頭部和中段尺度、頭部橢圓率和勻稱性的均數(shù)、標(biāo)準(zhǔn)差和中位數(shù),以及對染色的精子頂體區(qū)進行測量[3]。
與人工操作相比,自動化系統(tǒng)更具客觀性,精確度和重復(fù)性的潛力[4]。精確度和重復(fù)性不低于7%[5],這優(yōu)于有經(jīng)驗的技術(shù)人員的手工評估。兩個研究已經(jīng)提示在CASA結(jié)果與生育力之間存在***聯(lián)系。Coetzee等發(fā)現(xiàn)自動分析的正常精子形態(tài)的結(jié)果是預(yù)示體外受精率和妊娠率的有意義指標(biāo)[6]。Garrett等發(fā)現(xiàn)**中能與透明帶結(jié)合的、具有某些頭部形態(tài)特征的精子所占的百分比(Z%),和直線速度(VSL)的精子的百分比,與大樣本的低生育力夫婦的自然妊娠率是有***且**的關(guān)系。Z%和VSL與生育力間的關(guān)系顯示是連續(xù)的,而且沒有顯示臨界值;高于臨界值,妊娠率也不會進一步增加[7]。 廣州精子分析高準(zhǔn)確率全自動精子分析儀在臨床Z療中展現(xiàn)了明顯的優(yōu)勢。
CASA系統(tǒng)雖然有諸多優(yōu)點,但是很多因素都會影響到CASA儀器的使用及準(zhǔn)確性。CASA系統(tǒng)進行**分析應(yīng)注意以下幾點:3.1標(biāo)本的采集與制作(1)采集前禁欲2?7天,禁欲時間過長、過短對**質(zhì)量都有一定影響。(2)容器要清潔。(3)特殊情況下,*可使用專門為采集**設(shè)計的無毒性避孕套,普通的乳膠避孕套因含有損害精子活力的物質(zhì)不可使用。(4)注意保溫(20?37℃),并于30分鐘內(nèi)送檢驗科。(5)標(biāo)本置于37℃水浴.精子運動參數(shù)具有溫度敏感性,因此要求計數(shù)池應(yīng)于分析儀恒溫板上預(yù)溫。(6)密切注意**液化的情況,確保液化時間準(zhǔn)確,因**樣本隨放置時間的延長,精子活動力及活動率有減少的趨勢。標(biāo)本液化后取混勻樣本**1滴滴在樣品池中間,然后進行分析。(7)檢測精子活動力,標(biāo)本密度應(yīng)控制在2×106/ml到50×106/ml之間。具有高密度(如高于50×106/ml)精子的標(biāo)本,通常會增加碰撞的頻率,并可能由此出現(xiàn)錯誤的結(jié)果。在這種情況下,建議用同源精漿稀釋標(biāo)本。
男科實驗室中通常所指的質(zhì)量包含三個方面:實驗室內(nèi)部質(zhì)量、醫(yī)生處置的質(zhì)量以及結(jié)果的質(zhì)量[3]。1.實驗室內(nèi)部質(zhì)量與**分析有關(guān)的實驗室內(nèi)部質(zhì)量主要是工作人員的素質(zhì)和所采用儀器的質(zhì)量。工作人員應(yīng)經(jīng)過特殊的培訓(xùn)?儀器必須處于正常狀態(tài)、確保準(zhǔn)確的結(jié)果?操作應(yīng)符合規(guī)程[4]。CASA系統(tǒng)本身的質(zhì)量難于評定。硬件?如顯微鏡、影像攝影機和計算機經(jīng)檢查便可確定其可靠性。但軟件并非如此?軟件中存在不確定的因素?算法是軟件中**重要的部分?通常制造者保守這些秘密;因此?有關(guān)軟件的數(shù)學(xué)上、信息性的、統(tǒng)計學(xué)的或生物測量方面的檢查實驗室難于進行。該設(shè)備的設(shè)計緊湊,占用空間小,適合不同規(guī)模的實驗室使用。
CASA精子運動速度和運動軌跡特征主要參數(shù)有:①軌跡速度(VCL):也稱曲線速度,即精子頭部沿其實際行走曲線的運動速度。②平均路徑速度(VAP):精子頭沿其空間平均軌跡的運動速度,這種平均軌跡是計算機將精子運動的實際軌跡平均后計算出來的,可因不同型號的儀器而有所改變。③直線運動速度(VSL):也稱前向運動速度,即精子頭部直線移動距離的速度。④直線性(LIN):也稱線性度,為精子運動曲線的直線分離度,即VSL/VCL。⑤精子側(cè)擺幅度(ALH):精子頭實際運動軌跡對平均路徑的側(cè)擺幅度,可以是平均值,也可以是最大值。不同型號的CASA系統(tǒng)由于計算方法不一致,因此相互之間不可直接比較。⑥前向性(STR):也稱直線性,計算公式為VSL/VAP,亦即精子運動平均路徑的直線分離度。⑦擺動性(WOB):精子頭沿其實際運動軌跡的空間平均路徑擺動的尺度,計算公式為VAP/VCL。⑧鞭打頻率(BCF):也稱擺動頻率,即精子頭部跨越其平均路徑的頻率。⑨平均移動角度(MAD):精子頭部沿其運動軌跡瞬間轉(zhuǎn)折角度的時間平均值。⑩運動精子密度:每毫升精液中VAP>0μm/s的精子數(shù)。Hamilton Thorne精子分析儀具有快速、高效、智能化的特點,能夠滿足用戶對精子分析的多方面需求。美國狗精子分析精確溫度控制
CASA系統(tǒng)減少了人為因素對檢測結(jié)果的影響,提高了檢測的客觀性和可重復(fù)性?。香港Hamilton Thorne精子分析VSL
精子分析儀使用方法
儀器的使用方法因型號、廠家差異不盡相同,操作人員上崗前必須經(jīng)過嚴格培訓(xùn),了解工作原理、操作規(guī)程、校正方法等,使用前必須仔細閱讀說明書。一般儀器都會經(jīng)歷如下操作步驟 [1]:開機接通電源,打開計算機輔助**分析系統(tǒng)。1.輸入患者信息及**理學(xué)檢查結(jié)果。2.加樣取液化的**1滴,滴入精子計數(shù)板的計數(shù)池中,置顯微鏡操作平臺上,點擊“活動顯示”菜單,調(diào)節(jié)好顯微鏡焦距,顯示器上即可顯示待測標(biāo)本的精子運動圖像。3.分析點擊“計算分析”菜單,系統(tǒng)進入自動分析狀態(tài),圖像顯示區(qū)出現(xiàn)精子分割圖像并進行分析。4.打印報告分析結(jié)束后,可根據(jù)需要打印出分析結(jié)果。 香港Hamilton Thorne精子分析VSL