方法:使用兩種已知濃度的質(zhì)控乳膠珠溶液,1份濃度為(35±5)×106/ml,另1份濃度為(18.0±2.5)×106/ml,評(píng)價(jià)4種計(jì)數(shù)方法的準(zhǔn)確性和精確性,并比較4種方法計(jì)數(shù)精液的結(jié)果。結(jié)果:計(jì)數(shù)乳膠珠時(shí),CellVU計(jì)數(shù)池的結(jié)果**接近已知濃度,分別為(39.70±4.76)、(19.09±2.02)×106/ml,變異系數(shù)(CV)值分別為12.80%和10.58%;血細(xì)胞計(jì)數(shù)池和Makler計(jì)數(shù)池結(jié)果均高于已知濃度,前者為(44.84±4.86)×106/ml、(21.04±1.87)×106/ml,CV值分別為10.81%和8.89%,后者為(52.36±7.78)×106/ml、(24.54±3.67)×106/ml,CV值分別為14.86%和14.96%;CASA系統(tǒng)結(jié)果低于已知濃度,為(28.53±2.06)、(14.62±0.95)×106/ml,但CV值比較低,分別為7.22%和6.50%。計(jì)數(shù)精液時(shí),CellVU計(jì)數(shù)池與CASA系統(tǒng)結(jié)果差異無***性(P=0.71),分別為(45.28±34.52)、(41.96±31.93)×106/ml,血細(xì)胞計(jì)數(shù)池和Makler計(jì)數(shù)池結(jié)果差異無***性(P=0.14),分別為(76.98±59.90)、(63.89±53.84)×106/ml,CellVU計(jì)數(shù)池、CASA系統(tǒng)與血細(xì)胞計(jì)數(shù)池、Makler計(jì)數(shù)池結(jié)果間差異***(P<0.05或P<0.01)。結(jié)論:計(jì)數(shù)精液時(shí),CASA系統(tǒng)與CellVU計(jì)數(shù)結(jié)果差異無***性。各實(shí)驗(yàn)室可選擇合適的手工或CASA計(jì)數(shù)方法。Hamilton Thorne精子分析儀具有快速、高效、智能化的特點(diǎn)，能夠滿足用戶對(duì)精子分析的多方面需求。美國綿羊精子分析W.H.O 5

檢查具備條件

受檢者，經(jīng)歷一段經(jīng)常排精過程后，禁房事5－7天（上次排精到取標(biāo)本間隔時(shí)間至少不得少于100小時(shí)）； [1]備大口有蓋清潔干燥容器一個(gè)，以**方式獲取精液，一次全部射入容器，蓋上蓋，記錄標(biāo)本離體時(shí)間； 貼身保溫，30分鐘內(nèi)送到化驗(yàn)室，并向檢驗(yàn)員提供標(biāo)本取出時(shí)間。 精液常規(guī)觀察：精液總?cè)萘浚ê辽?，精子活?dòng)情況，精子密度（個(gè)/毫升），精液液化時(shí)間（標(biāo)本取出到精液液化的時(shí)間），不動(dòng)精子（個(gè)/高倍視野）等。見不動(dòng)精子，須染色方可區(qū)分：不活動(dòng)的精子、死精子、未成熟精子等。找不到精子必須離心后檢驗(yàn)，仍然找不到精子；方可報(bào)告無精。經(jīng)三次取樣化驗(yàn)，結(jié)果仍然找不到精子方可確認(rèn)無精子癥。 香港馬精子分析VAPHamilton Thorne自動(dòng)精子分析儀具有高精度、高效率和自動(dòng)化的優(yōu)點(diǎn)。

Hamilton Thorne精子分析儀IVOS Ⅰ與IVOS Ⅱ一致性比對(duì)分析

根據(jù)質(zhì)量控制的要求,對(duì)新精子分析系統(tǒng)進(jìn)行性能驗(yàn)證后,應(yīng)與舊系統(tǒng)進(jìn)行一致性評(píng)價(jià),從而保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。方法:選用原有Hamilton Thorne精子分析儀IVOSⅠ為參比儀器,新購儀器IVOSⅡ?yàn)閷?shí)驗(yàn)儀器,對(duì)精子分析系統(tǒng)的主要參數(shù)(精子濃度、前向運(yùn)動(dòng)精子百分率、總活力)進(jìn)行分析比對(duì)。結(jié)果:兩臺(tái)儀器的方法內(nèi)和方法間離群值檢驗(yàn)、偏倚圖和散點(diǎn)圖的線性關(guān)系和離群值檢測(cè)所有參數(shù)均能符合比對(duì)要求,檢測(cè)結(jié)果具有相關(guān)性;對(duì)實(shí)驗(yàn)儀器的檢測(cè)結(jié)果適合范圍的檢驗(yàn),當(dāng)其精子濃度r=0.988,前向運(yùn)動(dòng)精子百分率r=0.975,總活力r=0.981,r均≥0.975,表明取值范圍合適;對(duì)預(yù)期偏倚(Bc)的接受性評(píng)價(jià)表明當(dāng)精子濃度在12×10~6/ml,允許總誤差(TEa)為6.67%;當(dāng)前向運(yùn)動(dòng)精子百分率<31%,TEa為2.34%,兩項(xiàng)檢測(cè)的Bc上限<1/2允許誤差(Ea),實(shí)驗(yàn)儀器經(jīng)比對(duì)分析顯示符合質(zhì)控要求。結(jié)論:通過比對(duì)分析,得出兩臺(tái)精子分析系統(tǒng)的主要參數(shù)(精子濃度、前向運(yùn)動(dòng)精子百分率、總活力)結(jié)果具有可比性,檢測(cè)結(jié)果一致,可同時(shí)用于臨床標(biāo)本的檢測(cè)。

精液顯微鏡檢查

(1)精子存活率：排精后30～60分鐘，正常精子存活率應(yīng)為80%～90%，精子存活率降低是導(dǎo)致不育的重要原因。(2)精子活動(dòng)力：指精子活動(dòng)狀態(tài)，也是指活動(dòng)精子的質(zhì)量。世界衛(wèi)生組織(WHO)推薦將精子活動(dòng)力分為4級(jí)：①精子活動(dòng)好，運(yùn)動(dòng)迅速，活潑有力，直線向前運(yùn)動(dòng)；②精子活動(dòng)較好，運(yùn)動(dòng)速度尚可，游動(dòng)方向不定，呈直線或非直線運(yùn)動(dòng)，帶有回旋；③精子運(yùn)動(dòng)不良，運(yùn)動(dòng)遲緩，原地打轉(zhuǎn)或抖動(dòng)，向前運(yùn)動(dòng)能力差；④死精子，精子完全不活動(dòng)。正常精子活動(dòng)力應(yīng)在③級(jí)以上，若＞40%的精子活動(dòng)不良(③、④)級(jí)，常是導(dǎo)致男性不育的重要原因。精子活動(dòng)力低，主要見于精索靜脈曲張、泌尿生殖系統(tǒng)非特異性***，應(yīng)用某些藥物如抗瘧藥、雄***等所致。 在男科和輔助生殖技術(shù)領(lǐng)域，精子質(zhì)量的評(píng)估是診斷和處理的重要環(huán)節(jié)。

人類精子冷凍保存和儲(chǔ)存：增加了冷凍樣本的安全性、精液冷凍保存方案、快速液氮熏蒸冷凍、冷凍精液的解凍、玻璃化冷凍等內(nèi)容，更具可操作性。本手冊(cè)對(duì)人類精子的冷凍保存提出了具體建議：將樣本分管分罐分開儲(chǔ)存；對(duì)使用的材料和留存標(biāo)本建立定期核驗(yàn)程序；所有儲(chǔ)罐都應(yīng)有液位監(jiān)控報(bào)警系統(tǒng)，以監(jiān)測(cè)溫度和液氮液位，傳感器應(yīng)連接警報(bào)器，可通過實(shí)驗(yàn)室人員的終端進(jìn)行提醒。新證據(jù)表明，玻璃化冷凍是冷凍保存精液的一種有價(jià)值的方法。該方法的原理是將小體積樣本與無污染液氮直接接觸并快速冷凍，可以防止冰晶的形成，并減少精子的滲透性損傷。在麥管玻璃化冷凍(無菌玻璃化冷凍)中，也可以使用封閉系統(tǒng)，不需要無菌的液氮。精子分析儀的出現(xiàn)簡化了檢驗(yàn)流程，提高了診斷的可靠性，對(duì)于提升男性生殖健康領(lǐng)域的Z療效果具有重要作用。香港馬精子分析ALH

計(jì)算機(jī)輔助精子分析（computer- assisted sperm analysis）是2014年公布的泌尿外科學(xué)名詞。美國綿羊精子分析W.H.O 5

精液顯微鏡檢查

精子計(jì)數(shù)：正常人精子計(jì)數(shù)為0．6×10¹²～1．5×0.012/L，相當(dāng)于一次排出的精子總數(shù)為400×10⁶～600×10⁶。當(dāng)精子計(jì)數(shù)值＜20×10⁶/ml或一次排精總數(shù)＜100×10⁶為精子減少，超過致孕極限而導(dǎo)致不育。精液直接涂片或離心沉淀后均未查到精子為無精癥。見于先天性睪丸發(fā)育不全、畸形或后天睪丸損傷和萎縮(如睪丸結(jié)核、炎癥、淋病、垂體或腎上腺功能異常的內(nèi)分泌性疾病等)、輸精管阻塞或是先天性輸精管及精囊缺陷，是導(dǎo)致少精或無精的重要原因，也是導(dǎo)致不育的重要原因。檢查有無精子也是檢查輸精管結(jié)扎術(shù)的效果觀察。結(jié)扎六周后，連續(xù)檢查無精子，說明手術(shù)成功，如果結(jié)扎兩個(gè)月后，精液中仍有精子，說明手術(shù)不成功。 美國綿羊精子分析W.H.O 5